L-Photo-Methionine

La L-Photo-Méthionine Thermo Scientific Pierce est un analogue de la L-méthionine qui peut être incorporé dans les protéines pendant la synthèse, puis activé par la lumière pour réticuler de manière covalente les protéines en interaction dans les cellules.

Caractéristiques de la L-Photo-Méthionine :

• Marquage in vivo : incorporez un groupe photo-réactif dans les protéines en utilisant la machinerie cellulaire normale des cellules vivantes
• Réticulation in vivo : trouvez des protéines en interaction dans l’environnement cellulaire natif
• Spécificité accrue : réticulez les protéines en interaction correctement positionnées à leurs interfaces dans les domaines d’interaction des protéines
• Récupération efficace : 90 % de récupération des protéines dans les lysats cellulaires après réticulation
• Compatible : réticulez les protéines exprimées dans une grande variété de lignées cellulaires, notamment HeLa, 293T, COS7, U2OS, A549, A431, HepG2, NIH 3T3 et C6
• Facile à utiliser : les réactifs sont photostables sous un éclairage de laboratoire normal, ce qui évite de travailler dans l’obscurité

La L-Photo-Méthionine Thermo Scientific est un analogue de la L-méthionine qui peut être incorporé de manière endogène dans la séquence primaire des protéines pendant la synthèse, puis activé par la lumière ultraviolette (UV) pour réticuler de manière covalente les protéines dans les domaines d’interaction protéine-protéine dans leur environnement naturel au sein des cellules vivantes. Cette puissante méthode permet d’étudier et de caractériser les interactions protéiques stables et transitoires dans les cellules sans avoir recours à des réticulants chimiques complètement étrangers et à des solvants réactifs associés pendant l’expérience d’interaction qui peuvent nuire à certains aspects de la biologie cellulaire étudiée.

Lorsqu’il est utilisé en combinaison avec un milieu limitant spécialement formulé et dépourvu de méthionine, le dérivé photo-activable est traité comme un acide aminé naturel par le mécanisme de synthèse des protéines dans la cellule. Par conséquent, il peut être substitué à la méthionine dans la séquence primaire des protéines pendant le catabolisme et la croissance. Les dérivés de la photo-méthionine contiennent des anneaux de diazirine qui s’activent lorsqu’ils sont exposés à la lumière UV pour devenir des intermédiaires réactifs qui forment des liaisons covalentes avec des chaînes latérales de protéines et des structures moléculaires voisines. Les partenaires de liaison associés naturellement à l’intérieur de la cellule peuvent être piégés instantanément par la photoactivation des protéines contenant de la diazirine dans les cellules cultivées. Les complexes de protéines réticulées peuvent être détectés par une mobilité réduite sur SDS-PAGE, suivie par la détection par transfert western, la chromatographie d’exclusion stérique, la sédimentation par gradient de densité de saccharose ou la spectrométrie de masse.

Ressources :

FAQ sur l’acide aminé photoréactif

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