Protein Thermal Shift™ Starter Kit

Protein Thermal Shift™ Starter Kit

Les kits Protein Thermal Shift™ Applied Biosystems™ permettent aux utilisateurs d’utiliser un colorant qui se lie aux résidus hydrophobes exposésAfficher plus
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RéférenceQuantité
44622631,000 reactions
Référence 4462263
Prix (EUR)
496,00
Each
Quantité:
1,000 reactions
Prix (EUR)
496,00
Each
Les kits Protein Thermal Shift™ Applied Biosystems™ permettent aux utilisateurs d’utiliser un colorant qui se lie aux résidus hydrophobes exposés pour surveiller la stabilité thermique des protéines à l’aide d’un instrument de PCR en temps réel afin d’identifier les conditions de tampon qui stabilisent la protéine d’intérêt ou analyse les bibliothèques de ligands pour les composés qui lient la protéine d’intérêt.

Économisez du temps et de l’argent lors de votre sélection d’échantillons
Cette solution réduit considérablement le temps et le coût associés à la lecture d’échantillons par rapport aux méthodes actuellement disponibles.Les produits Protein Thermal Shift™, utilisés sur nos systèmes de PCR en temps réel, permettent aux chercheurs de réaliser les actions suivantes de façon économique et efficace :

• Analyser les échantillons pour assurer la stabilité thermique relative des protéines
• Analyser les molécules (par exemple, les candidats à des médicaments à petite molécule, les bibliothèques à base de fragments et les anticorps) pour la liaison des ligands aux protéines à haut débit
• Analyser les échantillons pour les changements de stabilité après des mutations ou des modifications de points de protéines
• Identifier systématiquement les conditions tampons appropriées⁄optimales pour la mesure des interactions protéine-ligand, la production de préparations protéiques stables, la cristallisation des protéines et le stockage des protéines
• Effectuer rapidement des CQ des préparations de protéines pour garantir l’intégrité et⁄ou la pureté des protéines

Deux kits au choix
Le kit de colorant Protein Thermal Shift™ contient le colorant et le tampon pour effectuer des expériences de variation de la thermostabilité des protéines, pouvant aller jusqu’à 1 000 réactions.Le kit de démarrage Protein Thermal Shift™ contient le kit de colorants ainsi qu’un ligand de contrôle et de protéine pour les expériences de test et le dépannage.Les composants du kit de démarrage Protein Thermal Shift™ sont conditionnés en deux boîtes, l’une devant être stockée à -20°C et l’autre à 4°C, pour une flexibilité maximale dans la formulation des réactifs.

Simplifiez l’analyse avec le logiciel Protein Thermal Shift™
Notre solution complète Protein Thermal Shift™ comprend un logiciel d’analyse compatible avec les fichiers d’exécution générés à partir de cinq de nos systèmes de PCR en temps réel :StepOne™ Real-Time PCR System, StepOnePlus™ Real-Time PCR system, 7500 Fast Real-Time PCR System et ViiA™7 Real-Time PCR System.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (équipement)Système 7500 Fast, Système 7500, StepOne™, StepOnePlus™, Système ViiA™ 7
Type de kitKit de démarrage
Nbre de réactions1 000 réactions
Gamme de produitsProtein Thermal Shift
Quantité1,000 reactions
Type d’échantillonProtéine
Spécificité cibleNon spécifique à la cible
TechniqueIntensité de fluorescence
Méthode de détectionAmorce-sonde
À utiliser avec (application)Protein Thermal Shift
Méthode PCRqPCR
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver le colorant et le tampon entre 18° et 25°C
Conserver le ligand de contrôle et la protéine de contrôle entre -15° et -25°C.

Foire aux questions (FAQ)

In the Protein Thermal Shift Assay, my replicates have different levels of fluorescence. Is this a problem?

We recommend looking at the spread in Tm, which is more important than the relative fluorescence.

What can I do for a protein that starts out high and then shows a region of melt (flattening of the curve, but no real rise in signal) when performing a Protein Thermal Shift assay?

Some proteins have hydrophobic residues on the surface and the dye binds to these residues. Heating results in unfolding of the protein causing more hydrophobic residues to be exposed. The dyes bind preferentially to these inner locations and so there is a flattening (or a very low rise) of the melt discernable in the melt profile. If there is no positive slope, you will not get a Boltzmann Tm, but you should still get a derivative one. And you can always draw a manual region to get a Tm out. Some proteins will not work with this technology if the hydrophobic residues are already exposed on the surface and the dye binds strongly to it. Please contact Technical Support at techsupport@thermofisher.com about the possibility of other dyes being available for this issue.

I am getting an error message when I try to open my *.eds data file in the Protein Thermal Shift Software? What should I do?

Make sure that you first open the file in the corresponding instrument software, click “Analyze”, and then save the file, before trying to open with the Protein Thermal Shift Software. The file must first be analyzed before it can be used in the Protein Thermal Shift Software.

The software allows for data from different plates to be analyzed together, what should be considered when mixing data from multiple plates?

The software will allow for ≥100 plates per study. We allow the user this flexibility but do not recommend you mix data from multiple plates unless they have validated their results in advance. At a minimum, we recommend researchers include a reference assay in each plate to ensure reproducibility.

Which analysis method should I choose? The Boltzmann fit or the derivative method?

We provide two independent methods because they each have unique things to offer in terms of the analysis. The two-state Boltzmann model has a physical meaning and appeal. It also provides a great way to normalize across noisy undulations in the signal. However, those undulations may be of actual interest and not noise, such as for multi-domain proteins where they may correspond to different domains coming apart in stages. Here the two-state model is inappropriate. The derivative method can help get a temperature at which the local peaks occur. These are two completely unrelated approaches. If the two-state model is a great fit for your data, the results should be in close agreement.