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Invitrogen™

Ambion™ mirVana™ miRNA Inhibitor, let-7c positive control

Contrôle positif de l’inhibiteur de micro-ARN mirVana™ let-7c
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RéférenceQuantité
446408120 nmol
44640805 nmol
Référence 4464081
Prix (EUR)
1 300,00
Each
Quantité:
20 nmol
Prix (EUR)
1 300,00
Each
Les inhibiteurs de micro-ARN sont de petites molécules d’ARN simple brin chimiquement modifiées, conçues pour se lier spécifiquement aux molécules de micro-ARN endogènes et les inhiber et permettre l’analyse fonctionnelle du micro-ARN par la régulation négative de son activité.

Nous avons désormais lancé la deuxième génération d’inhibiteurs de micro-ARN, les inhibiteurs de micro-ARN mirVana™, qui :
Affichent une meilleure puissance que le produit du concurrent principal
• Offrent, à faible concentration in vitro, des effets maximum et constants
• Sont non toxiques
• Ciblent le contenu Sanger le plus actualisé
• Peuvent être utilisés in vitro et in vivo, vous offrant une constance tout au long de votre projet de recherche


Des contrôles positifs et négatifs sont également disponibles pour une utilisation avec les inhibiteurs de micro-ARN mirVana™ dans les expériences de régulation négative du micro-ARN

Contrôle positif de l’inhibiteur de micro-ARN mirVana™ let-7c
Le contrôle positif de l’inhibiteur de micro-ARN mirVana™ let-7c est destiné à être utilisé comme contrôle positif dans les expériences avec culture de cellules de mammifères utilisant des inhibiteurs de micro-ARN mirVana™. Il a démontré que le micro-ARN let-7c endogène régulait négativement l’ARNm HMGA2 dans les cellules de culture. HMGA2 est une protéine chromatine omniprésente et non histone qui peut moduler l’expression génétique par des changements d’architecture de la chromatine. Le micro-ARN let-7c régule négativement les taux d’ARNm HMGA2. Lorsqu’il est transfecté dans des lignées cellulaires humaines et de souris, l’inhibiteur de micro-ARN let-7c bloque le micro-ARN let-7c endogène, ce qui entraîne une augmentation des taux d’ARNm HMGA2. Ainsi, l’activité de l’inhibiteur de micro-ARN let-7c peut être surveillée dans les cellules humaines ou de souris à l’aide de la PCR en temps réel avec transcription inverse (RT-PCR) pour détecter l’ARNm HMGA2.

Contrôles des inhibiteurs de première génération
Nos inhibiteurs de micro-ARN de première génération (et contrôles), les inhibiteurs de micro-ARN Ambion™ Anti-miR™, ont une spécificité et une puissance moindres, ainsi qu’une spécificité de brin inférieure par rapport aux nouveaux inhibiteurs de micro-ARN mirVana™. Ces inhibiteurs de première génération sont recommandés pour terminer les études de micro-ARN in vitro en cours. Pour de nouvelles études ou des études in vivo, nous recommandons vivement nos nouveaux inhibiteurs de micro-ARN mirVana™ et leurs contrôles correspondants.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (application)Analyse de miARN et d’ARN non codant
Marqueur ou colorantNon conjugué(e)
Gamme de produitsmirVana
Type de produitInhibiteur de miARN
Méthode de purificationPurifié(e)
Quantité20 nmol
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Type de contrôleContrôle positif
RNAi TypeInhibiteur de miARN
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver à une température inférieure ou égale à –20 °C. Ne pas conserver dans un congélateur à dégivrage automatique.

Foire aux questions (FAQ)

How can I quantify endogenous miRNA inactivation by mirVana inhibitors?

Using TaqMan miRNA assays, you can measure the level of miRNA of interest. If the miRNA is bound to the synthetic anti-miRs and/or mirVana inhibitors transfected, the duplex should not be detected, indicating efficient miRNA inactivation. Please note, this only works when total RNA sample isolated is not heat denatured when RT primer is added, as heat denaturation will result in complex dissociation and subsequent detection of microRNA by TaqMan miRNA assay even when cells have been transfected properly. Please see the protocol for the TaqMan MicroRNA Cells-to-CT kit (Cat. No. 4391848) for more details.

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How do you introduce mirVana miRNA mimics or inhibitors into cells?

Mimics and inhibitors can be transfected or electroporated into cells using parameters similar to those used for siRNA.

Using mirVana miRNA Mimics- For the following applications, use a cell line that expresses relatively low levels of the mature miRNA of interest.
- Cell density at the time of transfection. In general, 30-70% confluency is recommended.
- Transfection method (traditional or reverse transfection).
- Length of exposure of cells to transfection agent-RNA oligonucleotides complexes.
For many miRNA mimics, maximal activity is achieved after 24 hours, but biological assays may be performed 24-72 hours posttransfection. If you maintain your transfected cells longer than 24 hours, we suggest replacing the existing medium with fresh medium at 24 hours posttransfection, for greater viability of the cells.

Using mirVana miRNA Inhibitors to analyze endogenous miRNA function
For the following applications, use a cell line that expresses relatively high levels of the mature miRNA of interest.
General transfection starting points
mirVana miRNA Mimics and Inhibitors typically work best when transfected at a final concentration of 3-30 nM. Optimization experiments might include a concentration range of 1-100 nM. To increase accuracy and reproducibility when preparing transfection complexes, prepare a dilution of your stock oligonucleotides, and pipet a higher volume of diluted stock.

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What is the turnaround time for your mirVana miRNA Mimic and Inhibitors?

The turnaround time varies depending on the level of purification and whether it is a custom order or not. Please see the approximate timetable below:

Standard purification (5 and 20 nmol), 4 business days
HPLC/in vivo ready (250 nmol), 15 business days
Custom mirVana Mimics and Inhibitors, 15 business days

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I would like to create a custom mirVana mimic and inhibitor. Can I do this?

Yes, please provide us with your unpublished miRNA sequence and we can synthesize a corresponding mirVana mimic or inhibitor by clicking on this link (www5.invitrogen.com/custom-genomic-products/tools/mirna/).

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Can I get the sequence for the mirVana Mimics and Inhibitors negative control?

Negative control sequences require a confidential disclosure agreement while target sequences require prior proof of purchase for release.

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