Pierce™ F(ab')2 Micro Preparation Kit
Pierce™ F(ab')2 Micro Preparation Kit
Pierce™ F(ab')2 Micro Preparation Kit
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Thermo Scientific™

Pierce™ F(ab')2 Micro Preparation Kit

Le micro-kit de préparation de fragments F(ab’)2 Thermo Scientific Pierce utilisent de la protéase de pepsine immobilisée pour réaliser laAfficher plus
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RéférenceQuantité
4468810 échantillons d’anticorps contenant chacun 25 à 250 μg d’IgG
Référence 44688
Prix (EUR)
640,00
Each
Quantité:
10 échantillons d’anticorps contenant chacun 25 à 250 μg d’IgG
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
640,00
Each
Le micro-kit de préparation de fragments F(ab’)2 Thermo Scientific Pierce utilisent de la protéase de pepsine immobilisée pour réaliser la digestion sélective des anticorps IgG entiers humains et autres afin de produire des fragments F(ab’)2 qui conservent l’activité de fixation antigène.

Caractéristiques du micro-kit de préparation de fragments F(ab’)2 :

• Idéal lorsque la taille de l’échantillon est limitée : utilisez le kit micro pour 25 à 250 µg d’IgG.
• Produits de digestion sans enzymes  la pepsine immobilisée (résine d’agarose en microbilles) assure le contrôle de la réaction de digestion et la suppression totale des fragments d’anticorps produits à partir de l’enzyme protéolytique
• Conviennent aux espèces humaines d’IgG et d’autres espèces : la procédure du kit est optimisée pour les IgG humaines, de lapin et de souris. La digestion basée sur la pepsine est efficace pour d’autres espèces et sous-catégories d’IgG, bien que l’étape de purification nécessite une liaison efficace de l’anticorps à la protéine A. (Remarque : pour de meilleurs résultats avec l’IgG1 de souris, utilisez le réf. 44980.)
• Complets : les kits comprennent tous les réactifs nécessaires à la préparation et à la purification des fragments d’anticorps
• Rapides : le format de centrifugation réduit fortement la durée de traitement des échantillons
• Adaptables  les protocoles sont fournis pour plusieurs espèces et sous-classes d’IgG, ainsi que pour différentes concentrations et tailles d’échantillon.
• Efficace—amélioration du rendement et de la purée des échantillons

Ces kits de préparation de F(ab’)2 conviennent aux IgG d’espèces humaines, de lapin, de souris et autres espèces et sous-catégories, à l’exception des IgG1 de souris La réaction de digestion des anticorps avec l’agarose de pepsine est réalisée dans des colonnes à centrifuger jetables pratiques qui permettent le retrait efficace de la protéase immobilisée et une récupération maximale des fragments d’IgG. Sont également inclus dans les kits des colonnes de centrifugation de la protéine A Thermo Scientific NAb et des tampons pour purifier efficacement les fragments produits. La protéine A se lie aux fragments Fc et aux IgG non digérés et permet ainsi la récupération des fragments F(ab’)2 purs dans la fraction d’écoulement. Les kits comprennent également des colonnes de centrifugation de dessalage Thermo Scientific Zeba pour préparer rapidement des échantillons d’IgG sans dilution au lieu d’utiliser des étapes de dialyse chronophages.

Les kits utilisent la pepsine, une endopeptidase non spécifique, pour procéder à la digestion enzymatique du fragment Fc des IgG entiers afin d’obtenir le fragment F(ab’)2. Ce fragment est composé d’une paire d’unités Fab’ reliées par deux liaisons disulfure. Étant donné que la protéase de pepsine est fournie sous forme immobilisée en microbilles de résine d’agarose, la réaction de digestion s’arrête facilement en éliminant la résine de la solution d’IgG ; ce qui donne des produits digérés qui sont sans enzymes.

Produits associés
Kit de préparation de fragments F(ab’)2 Pierce™
Micro-kit de préparation de fragments Fab Pierce™
Micro-kit de préparation de fragments d’IgG1 de souris Fab et F(ab)2 Pierce™
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Quantité10 échantillons d’anticorps contenant chacun 25 à 250 μg d’IgG
Gène cibleERK5/BMK1 (pan)
Gamme de produitsPierce
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Suffisant pour : 10 échantillons d’anticorps, contenant chacun 25 à 250 μg d’IgG
• Agarose de pepsine Pierce, 0,5 ml
• Tampon de digestion F(ab’)2, 55 ml
• Colonnes de centrifugation de protéine A Plus NAb, 0,2 ml, 2 colonnes
• Boîtes de PBS (produisant chacune 500 ml), 2 boîtes
• Tampon d’élution d’IgG, 50 ml
• Colonnes de centrifugation de dessalage Zeba, à MWCO de 7 K, 0,5 ml, 10 colonnes
• Colonnes de centrifugation, 0,8 ml, 10 colonnes
• Microtubes à centrifuger, 2 ml, 30 tubes

Conserver à 4°C.

Foire aux questions (FAQ)

Can I reuse the immobilized digestion enzymes in the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit?

No. For best results, use the immobilized enzyme once and discard after use.

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How long does IgG digestion take using the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit?

The digestion time is a function of the IgG concentration and source. For rabbit, mouse and human IgG, optimized digestion times are given in the instructions for each kit. Digestion times listed in the product instructions result in 80-90% digestion, although efficiency varies depending on IgG preparation and source.

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In the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit, when digesting an IgG that does not bind to Protein A, how do I purify the Fab and F(abÁ)2 fragments?

If the IgG is a species or subclass that does not bind to Protein A, researchers can immobilize an antibody specific for the desired fragment. For example, to purify digested rat IgG2a, use the Aminolink Plus Immobilization Kit (Cat. No. 44894) to immobilize goat anti-rat Fc antibody. Our Tech Tip #34 and other web resources list IgG binding properties of Protein A. (Because Protein G and Protein A/G bind Fab fragments, they are not effective for this application.)

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Can I purchase the immobilized enzymes (proteases) from the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit separately?

Yes. The three immobilized enzymes are available in 5 mL package sizes as shown below:

• Immobilized Ficin, Cat. No. 44881
• Immobilized Papain, Cat. No. 20341
• Immobilized Pepsin, Cat. No. 20343

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How many Thermo Scientific IgG Fragmentation kits are available and which enzymes are included?

There are six Thermo Scientific IgG fragmentation kits:

• Fab Preparation Kit (Papain), Cat. No. 44985
• Fab Micro Preparation Kit (Papain), Cat. No. 44685
• F(abÁ)2 Preparation Kit (Pepsin), Cat. No. 44988
• F(abÁ)2 Micro Preparation Kit, (Pepsin), Cat. No. 44688
• Mouse IgG1 Fab and F(abÁ)2 Preparation Kit (Ficin), Cat. No. 44980
• Mouse IgG1 Fab and F(abÁ)2 Micro Preparation Kit (Ficin), Cat. No. 44680

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