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Invitrogen™

Kits de détection de l’apoptose par l’Annexine V eBioscience™

Les kits utilisent l’annexine V conjuguée au colorant de viabilité pour marquer la phosphatidylsérine (PS), un marqueur précoce de l’apoptose, sur la membrane extracellulaire.
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RéférenceQuantitéExcitation / émissionConjugué
88-8008-7250 dosagesPCP-eFluor 710
88-8005-74200 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
88-8006-7250 dosages405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8006-74200 dosages405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8007-74200 dosages650, 535/660, 617APC, iodure de propidium
88-8008-74200 testsPCP-eFluor 710
BMS500FI-100100 tests488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
BMS500FI-2020 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
BMS500FI-300300 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
88-8102-7250 dosagesPE, 7-AAD
88-8102-74200 dosagesPE, 7-AAD
88-8103-7250 dosagesPE/Cy7
88-8103-74200 dosagesPE/Cy7
BMS500BT-100
également connu sous le numéro BMS500BT/100
100 testsNA, 535/NA, 617Biotine, iodure de propidium
BMS500BT-20
également connu sous le numéro BMS500BT/20
20 dosagesNA, 535/NA, 617Biotine, iodure de propidium
BMS500BT-300
également connu sous le numéro BMS500BT/300
300 dosagesNA, 535/NA, 617Biotine, iodure de propidium
88-8005-7250 dosages488, 535/520, 617FITC, iodure de propidium
88-8007-7250 dosages650, 535/660, 617APC, iodure de propidium
Référence 88-8008-72
Prix (EUR)
257,65
Online Exclusive
286,00
Économisez 28,35 (10%)
Each
Quantité:
50 dosages
Conjugué:
PCP-eFluor 710
Prix (EUR)
257,65
Online Exclusive
286,00
Économisez 28,35 (10%)
Each
Distinguez facilement les cellules soumises à une apoptose précoce et tardive grâce aux kits de détection d’apoptose eBioscience et Annexine V pour l’analyse de cytométrie en flux. Ces kits utilisent l’annexine V conjuguée au colorant de viabilité pour étiqueter la phosphatidylsérine (PS), un marqueur précoce de l’apoptose, sur la membrane extracellulaire. En fin d’apoptose, la membrane cellulaire ayant perdu son intégrité, l’annexine V et le colorant de viabilité traversent et se lient à la PS à l’intérieur de la membrane plasmique.
Les annexines sont une famille de protéines de liaison aux phospholipides calcium-dépendantes qui lient de préférence la phosphatidylsérine (PS). Dans des conditions physiologiques normales, la PS se trouve principalement dans le feuillet interne de la membrane plasmique. Au début de l’apoptose, la phosphatidylsérine (PS) perd sa répartition asymétrique à travers la bicouche des phospholipides et est transférée aux cellules de marquage du feuillet de la membrane extracellulaire comme cibles de la phagocytose. Une fois sur la surface externe de la membrane, la PS peut être détectée par l’annexine V marquée par fluorescence de manière calcium-dépendante.

Dans l’apoptose précoce, la membrane plasmique exclut les colorants de viabilité tels que l’iodure de propidium (IP), la 7-AAD ou les colorants de viabilité fixables tels que eFluor 450. Ces cellules se colorent avec l’annexine V mais pas avec un colorant de viabilité, ce qui distingue les cellules au début de l’apoptose. Cependant, en fin d’apoptose, la membrane cellulaire perd son intégrité, permettant ainsi à l’annexine V d’accéder également à la PS à l’intérieur de la cellule. Un colorant de viabilité peut être utilisé pour résoudre ces cellules apoptotiques et nécrotiques en phase tardive (positives à l’annexine V, au colorant de viabilité) à partir des cellules apoptotiques en phase précoce (positives à l’annexine V, négatives au colorant de viabilité).

Les colorants de viabilité actuels disponibles avec les kits de détection d’apoptose eBioscience Annexine V comprennent FITC, eFluor 450, allophycocyanine (APC), phycoérythrine (PE), PE-cyanine7, et biotine.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
DescriptionKit de détection de l’apoptose par annexine V PerCP eFluor 710 eBioscience
À utiliser avec (équipement)Microscope à fluorescence, cytomètre en flux
Type de produitKit de détection d’apoptose
Quantité50 dosages
Conditions d’expéditionGlace humide
ConjuguéPCP-eFluor 710
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• Tampon de liaison d’annexine V (10X), 1 flacon (30 ml)
• Annexine V PerCP-eFluor 710, 1 flacon (0,25 ml)

Remarque : L’utilisation du colorant de viabilité fixable eFluor 450 n’est pas recommandée avec les kits de détection de l’apoptose par annexine V. 2°C à 8°C. Évitez les variations de température.

Foire aux questions (FAQ)

Can I use eFluor 450-conjugated antibodies with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits?

Yes, eFluor 450-conjugated antibodies are compatible with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits.

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I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

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When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I fix my cells after annexin V staining?

Yes, this is possible. We have established protocols for annexin V staining combined with intracellular staining of lymphocytes that can be found here. The most important step is to leave some binding buffer in the suspension when fixation is started. Compared to staining of live cells, the intensity of the annexin V signal may be somewhat reduced.