Kit de test de laboratoire RNaseAlert™

Le kit de test en laboratoire Ambion™ RNaseAlert™ est une technologie en attente de brevet qui détecte l’activité RNase dans un dosage pratique et sensible procurant des résultats en temps réel. Convient pour le test de plusieurs de petits échantillons et peut être utilisé pour s’assurer que les solutions, tubes, pointes, etc. sont exempts de RNase ; le kit contient suffisamment de réactifs pour 25 réactions.

• Il est capable de détecter aussi peu que 3,5 x 10^-7 unités (environ 0,5 pg) de RNase A avec un fluoromètre ou en visuel
• Dosage simple et facile en 30 min
• Surveillez l’activité RNase dans les fractions de colonne pendant la purification des protéines
• Utiliser DNaseAlert™ pour détecter quantitativement les RNases et DNases présentes dans le même échantillon

Le système de CQ RNaseAlert™ utilise un nouveau substrat d’ARN marqué avec une molécule rapportrice fluorescente (fluor) à une extrémité et un extincteur à l’autre extrémité. En l’absence de RNases, la proximité physique de l’extincteur réduit la fluorescence du fluor à des niveaux extrêmement faibles. Cependant, lorsque des RNases sont présentes, le substrat d’ARN est clivé et le fluor et l’extincteur sont séparés spatialement dans la solution. Ainsi, une fois le fluor excité par la lumière de la longueur d’onde adaptée, ce dernier émettra un signal vert. La fluorescence peut être facilement observée à l’œil nu lors de l’illumination sous lampe UV ou avec un fluoromètre à filtres ou à monochromateurs. Étant donné que la fluorescence du substrat RNaseAlert™ augmente avec le temps lorsqu’une activité RNase est présente, les résultats observés au fluoromètre peuvent être évalués cinétiquement. La séquence du substrat RNaseAlert™ a été soigneusement optimisée pour détecter plusieurs RNases, notamment la RNase A, la RNase T1, la RNase I, la nucléase micrococcale, la nucléase S1, la nucléase du haricot mungo et la nucléase Benzonase™.

Protocole rapide et pratique
La procédure RNaseAlert™ ne nécessite que quelques minutes pour être configurée. Le substrat fluorescent et lyophilisé est reconstitué dans le tube fourni et incubé grâce à la solution pour essai à 37°C pendant 30 – 60 minutes. Les résultats sont ensuite lus sur un transilluminateur ou un fluoromètre. Les échantillons qui rayonnent nettement en comparaison du contrôle négatif sont contaminés et ne doivent pas être utilisés avec l’ARN. L’eau exempte de nucléases et la RNase A sont fournies à des fins de contrôle.

Produit accessoire :
Le système de CQ RNaseAlert™ est également disponible pour les dosages à haut débit dans un format 96 puits (n° de réf. AM1966). Le système RNaseAlert™ est également entièrement compatible avec le système de CQ Ambion™ DNaseAlert™ (n° de réf. AM1970). Étant donné que le produit DNaseAlert™ contient une étiquette fluorescente spécifique au système RNaseAlert™, les deux kits peuvent être utilisés simultanément avec un fluoromètre pour les analyses quantitatives en temps réel des RNases et des DNases dans un seul échantillon.