Mélange d’ADN polymérase et dNTP Phusion™ Hot Start II (10 mM chacun)

Cet emballage comprend l’ADN polymérase haute fidélité Phusion Hot Start II (4 x 500 U) et un mélange de dNTP haute qualité (10 mM chacun, 2 x 1 ml).

ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité
Les ADN polymérases Thermo Scientific Phusion haute fidélité ont établi une norme élevée pour la PCR haute performance. Grâce à un taux d’erreur 52 fois inférieur à celui de Taq et 6 fois inférieur à celui de Pfu, elle est excellente pour le clonage et d’autres applications exigeant une haute fidélité. Elle offre une performance fiable avec des délais courts de protocoles, même avec des inhibiteurs PCR. Ell produit de meilleurs rendements avec des quantités réduites d’enzymes que les autres ADN polymérases.

• Haute fidélité (52X Taq)
• Pas d’amplification non spécifique et dégradation de l’amorce pendant la configuration de la réaction
• PCR rapide en raison de temps d’extension courts (15 à 30 s / kb)
• Augmentation des rendements du produit avec des quantités d’enzymes minimales

Lors de l’utilisation de l’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité, l’amplification se produit sans la production de produits non spécifiques en raison de la combinaison de l’ADN polymérase Phusion et d’un ligand Affibody spécifique lié de façon réversible qui inhibe l’activité de l’ADN polymérase à température ambiante. Le ligand Affibody inhibe également l’activité exonucléase 3´ → 5´ de la polymérase, empêchant ainsi la dégradation des amorces et du modèle d’ADN durant la configuration de la réaction. Le ligand est libéré à des températures qui stimulent l’activité de la polymérase, cette dernière devenant pleinement active. L’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité est immédiatement réactivée à des températures élevées, ce qui ne nécessite pas une étape d’activation distincte dans les protocoles PCR.

Utilisation des ADN polymérases Phusion
Les règles d’hybridation des ADN polymérases Phusion sont différentes de nombreuses ADN polymérases courantes (telles que les ADN polymérases Taq). Pour des résultats optimaux, utilisez notre calculatrice Tm à l’adresse www.thermofisher.com/tmcalculator.

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Mélange de dNTP
Le mélange de dNTP Thermo Scientific contient des solutions aqueuses pré-mélangées de dATP, dCTP, dGTP et dTTP, chacune à une concentration finale de 10 mM. Les nucléotides affichent une pureté supérieure à 99 % et sont exempts d’activités de nucléases, ainsi que d’ADN humain et d’ADN d’E. coli. Les mélanges permettent de réduire le nombre d’étapes de pipetage et le risque d’erreurs de configuration des réactions.

• Pureté supérieure à 99 % confirmée par HPLC
• Sans ADN humain et d’E. coli
• Stable après plusieurs cycles de congélation-décongélation
• Jusqu’à 95 % des dNTP restent sous forme de triphosphate après 7 semaines à température ambiante
• Jusqu’à 90 % des dNTP restent sous forme de triphosphate après 30 cycles de PCR (1 minute à 94°C ; 3 minutes à 72°C)

À utiliser dans toutes les applications de biologie moléculaire, y compris PCR, PCR en temps réel, PCR haute fidélité et longue, LAMP-PCR, synthèse d’ADNc, RT-PCR, RDA, MDA, marquage de l’ADN et séquençage de l’ADN.

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