Phusion U Hot Start DNA Polymerases
Thermo Scientific™

Phusion U Hot Start DNA Polymerases

L’ADN polymérase Thermo Scientific Phusion U est une nouvelle enzyme de haute fidélité conçue à l’aide de la technologie deAfficher plus
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Référence F555S
Prix (EUR)
212,00
Each
Couleur:
Colorless
Nbre de réactions:
100 réactions
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
212,00
Each
L’ADN polymérase Thermo Scientific Phusion U est une nouvelle enzyme de haute fidélité conçue à l’aide de la technologie de fusion. En raison d’une mutation exclusive dans la poche de liaison dUTP de Phusion, Phusion U surmonte une limitation importante des enzymes de correction : il est capable d’incorporer le dUTP et de lire à travers l’uracile présent dans les modèles d’ADN.

En plus de la possibilité d’utilisation de l’uracile, Phusion U présente toutes les propriétés supérieures des autres ADN polymérases Phusion : grande précision, grande vitesse, capacité à amplifier de longues amplicons jusqu’à 20 kb et une grande spécificité avec le démarrage à chaud basé sur Affibody. Ces caractéristiques font de l’ADN polymérage Phusion U Hot Start un excellent choix pour des applications importantes comme l’amplification de l’ADN converti en bisulfate ou endommagé, ainsi que l’utilisation du contrôle de la contamination par le report.

L’ADN polymérase Phusion U Green Hot Start est une combinaison de l’ADN polymérase Phusion U Hot Start et des tampons Phusion Green 5X. Les tampons contiennent un réactif de densité et deux colorants de suivi qui favorisent le chargement direct des produits issus de la PCR sur un gel. Le tampon coloré n’interfère pas avec les performances de Phusion U et est compatible avec les applications en aval comme le séquençage de l’ADN, la ligature et la digestion par restriction.

Points clés

Précision : ADN polymérase haute fidélité (25x Taq)
Tolérance à l’uracile : conçu pour incorporer le dUTP et amplifier les modèles contenant de l’uracile
Spécificité : démarrage à chaud pour réduire l’amplification non spécifique et la dégradation de l’amorce
Vitesse : temps d’extension courts (15 à 30 s/kb)
Format Green : permet le chargement direct des produits PCR sur les gels

Applications

• Amplification de l’ADN converti en bisulfate
• Amplification de l’ADN endommagé ou âgé
• Contrôle de la contamination par report
• Méthodes de clonage basées sur la méthode USER

Utilisation des ADN polymérases Phusion
Les règles d’hybridation des ADN polymérases Phusion sont différentes de celles de nombreuses ADN polymérases courantes (comme les ADN polymérases Taq). Pour des résultats optimaux, utilisez notre calculatrice de Tm à l’adresse www.thermofisher.com/tmcalculator.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
CouleurColorless
Fidélité (par rapport à Taq)25 X
Hot StartFonctionnalité Hot-Start (démarrage à chaud) intégrée
Nbre de réactions100 réactions
En surplombArrondi
PolyméraseADN polymérase Phusion U à démarrage à chaud
Type de produitADN polymérase Hot Start
Quantité100 unités
Format de réactionAutonome
Conditions d’expéditionDry Ice
Taille (produit final)20 kb ou moins
Concentration2 U/μl
À utiliser avec (application)Hot-start PCR, High-fidelity PCR
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réactionRapide
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Inclut :
• Polymérase d’ADN à démarrage à chaud Phusion U, 2 U/μl
• Tampon Phusion HF 5X
• Tampon GC Phusion 5X
• DMSO
Tampons HF et GC Phusion fournissant 1,5 mM de MgCl2 dans une concentration 1X finale.

Conserver à -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

Do Phusion DNA Polymerases add the non-template dependent 3'-A overhang?

Phusion DNA Polymerases generate blunt end products; therefore, blunt end cloning is recommended. If TA cloning is required, it can be performed by adding A overhangs to the blunt PCR product with e.g. Taq DNA Polymerase (Cat. No. EP0401). However, before adding the overhangs it is very important to remove all the Phusion DNA Polymerase by purifying the PCR product carefully, as the proofreading activity in Phusion DNA Polymerase is very strong. Any remaining Phusion DNA Polymerase will degrade the A overhangs, thus creating blunt ends again.

Can Phusion DNA Polymerases extend at 1 second/kb?

Yes it is possible, especially when amplifying smaller amplicons. Processivity of Phusion DNA Polymerases is 10 times that of Pfu. We recommend extension times of 15 s/kb for Phusion Flash PCR Master Mix. 15 s/kb is a conservative value that we can promise to work with almost any amplicon. In many cases, significantly shorter extension times (0-5 s/kb) can be used without compromising the yield. What separates Phusion Flash DNA Polymerase from other fast polymerases is that all steps in the PCR protocol can be shortened, including annealing and denaturation. This results in extremely fast protocols as compared with any other polymerase.

What nucleotide analogues can I use with DyNAzyme and Phusion DNA Polymerases?

DyNAzyme II DNA Polymerase can use dUTP, biotinylated dNTPs, 7-deaza-dGTP, digoxigenin-dUTP, bromo-dUTP, radiolabeled dNTPs and ITP. DyNAzyme EXT DNA Polymerase and Phusion DNA Polymerase cannot read dUTP-derivatives or dITP in the template strand so the use of these analogues is not recommended. Use Phusion U Hot Start DNA Polymerase for amplification of dUTP and dITP containing templates.