Kit de coloration des cellules mortes rouge lointain fixable LIVE/DEAD™, pour excitation à 633 ou 635 nm
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Kit de coloration des cellules mortes rouge lointain fixable LIVE/DEAD™, pour excitation à 633 ou 635 nm

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RéférenceQuantité
L3497380 dosages
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L10120200 dosages
Référence L34973
Prix (EUR)
218,00
Each
Quantité:
80 dosages
Prix (EUR)
218,00
Each
Le kit de coloration rouge vif fixable des cellules mortes LIVE / DEAD™ s’utilise pour déterminer la viabilité cellulaire avant la fixation et la perméabilisation requises pour la coloration des anticorps intracellulaires ou avant l’élimination des matières présentant un risque biologique à l’aide de la fixation au formaldéhyde. Ce kit a été optimisé et validé pour une utilisation avec un cytomètre en flux à laser rouge.

• Stable—les colorants sont lyophilisés dans des flacons distincts pour assurer leur stabilité

• Robuste—le profil de coloration est identique avant et après la fixation

• Signal lumineux—permet de distinguer facilement les cellules vivantes des cellules mortes dans un seul canal

Consultez un guide de sélection pour tous les colorants de viabilité fixables pour la cytométrie en flux.

Stable
Contrairement aux produits qui sont vendus sous la forme d’une solution,la coloration bleue fixable LIVE / DEAD™ de ce kit d’échantillonneur ont été conditionnés de manière pratique dans des flacons de 40 tests afin de garantir la stabilité et les performances du colorant au fil du temps. Les colorants amino-réactifs de la solution perdront en efficacité en peu de temps. C’est pourquoi, il est recommandé d’utiliser intégralement le flacon une fois celui-ci réhydraté. Si cela n’est pas possible, aliquotez les flacons en petits volumes et stockez-les à -80°C en évitant les cycles de congélation-décongélation.

Robuste
Les colorations de discriminateurs de cellules mortes robustes peuvent perdre la sensibilité après traitement avec des fixateurs tels que le formaldéhyde ou les méthodes de fixation à base d’éthanol requises pour les études de phosphorylation intracellulaire. ™ La coloration Far-Red fixable LIVE/DEAD est un colorant réactif à l’amine qui se lie de façon covalente aux amines intracellulaires et extracellulaires, et le profil de coloration est préservé après la fixation au formaldéhyde.

Luminosité optimale
La coloration Far-Red fixable LIVE/DEAD™ a été sélectionnée en fonction de ses propriétés fluorescentes pour fournir un signal lumineux lorsqu’elle est excitée par un laser rouge. Le colorant réactif fluorescent rouge lointain a une excitation maximum d’environ 633 nm, ce qui en fait un colorant idéal pour utilisation avec le laser rouge ou HeNe avec une émission d’environ 655 nm. Comme les cellules vivantes et les cellules mortes peuvent être distinguées à l’aide d’un seul colorant et d’un seul canal de cytomètre en flux, c’est un produit idéal pour les expériences multicolores.

Fonctionnement
Dans les cellules aux membranes endommagées, le colorant réagit avec les amines libres autant à l’intérieur de la cellule qu’à sa surface, ce qui produit une coloration fluorescente intense. Dans les cellules viables, la réactivité du colorant se limite aux amines à la surface des cellules, ce qui se solde par une fluorescence moins intense. En règle générale, l’écart d’intensité est 50 fois supérieur entre les cellules vivantes et les cellules mortes, ce qui facilite la discrimination.

Couleurs disponibles
Les colorants LIVE/DEAD™ fixables pour cellules mortes sont disponibles dans une grande variété de couleurs pour répondre aux besoins de votre panel multi-couleurs.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
Perméabilité cellulaireImperméable
Type de celluleCellule eucaryote
DescriptionKit de coloration rouge lointain fixable pour cellules mortes LIVE/DEAD™, pour excitation à 633 ou 635 nm
Méthode de détectionFluorescence, Fluorescent
Type de colorantColoration rouge lointain fixable pour cellules mortes LIVE/DEAD™
FormeSolide
FormatSolide, Tube(s)
Quantité80 dosages
Conditions d’expéditionTempérature ambiante, Température ambiante
SolubilitéDMSO (diméthylsulfoxyde), DMSO (diméthylsulfoxyde)
CouleurRouge lointain
Emission655 nm
Excitation Wavelength Range633 nm
À utiliser avec (application)Test de viabilité
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux, Cytomètre en flux
Gamme de produitsLIVE/DEAD
Type de produitColoration
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contient 2 flacons de colorant fixable pour cellules mortes LIVE/DEAD™ et 500 µl de DMSO. Stockage à -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

How do I prepare dead cell controls for LIVE/DEAD cell viability assays?

There are two easy options. One is to heat-inactivate the cells by placing at 60 degrees C for 20 minutes. The second is to subject the cells to 70% ethanol. Alcohol-fixed cells can be stored indefinitely in the freezer until use, potentially up to several years.

Centrifuge cells, pellet, and remove supernatant.
Fix cells: Add 10 mL ice cold 70% ETOH to a 15 mL tube containing the cell pellet, adding dropwise at first while vortexing, mix well.
Store in freezer until use.
When ready to use, wash twice and resuspend in buffer of choice.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Which cell viability kits are compatible with fixation?

The LIVE/DEAD Fixable kits for flow cytometry analysis are compatible with fixation. These kits use amine-reactive cell-impermeant dyes that stain the cell surface of live cells and also the cytosol of dead cells-live cells are dim and dead cells are bright. Since the dye is covalently bound to the cells, it will be retained after fixation. Unfortunately, this method does not work well for imaging-based assays, as all cells are stained and it is difficult to distinguish bright dead cells from dim live cells with a microscope. Ethidium monoazide (EMA; Cat No. E1374) is a cell impermeant nucleic acid stain that can be applied to live cultures and stains only dead cells. After incubation and washing away unbound dye, the cells can be exposed to light to photoactivate EMA to crosslink to dead cell DNA. After crosslinking to dead cell DNA, the samples may be fixed and permeabilized. Image-IT DEAD Green Viability Stain (Cat. No. I10291) for imaging and high-content screening (HCS) analysis is a live-cell impermeant DNA binding dye that is compatible with fixation and permeabilization with good retention up to 48 hours. We also have a LIVE/DEAD Reduced Biohazard Cell Viability Kit (Cat. No. L7013) for imaging and flow analysis that contains two DNA binding dyes, SYTO 10 and Dead Red, that are sufficiently retained to be analyzed soon after 4% glutaraldehyde fixation.
Note: In general, DNA-binding dyes and calcein AM are not compatible with fixation, as these dyes are not covalently bound to components of the cell and will thus slowly diffuse out of cells after fixation, gradually staining all cells as dead.

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Citations et références (5)

Citations et références
Abstract
Levels of circulating endothelial cells are low in idiopathic pulmonary fibrosis and are further reduced by anti-fibrotic treatments.
Authors:De Biasi S, Cerri S, Bianchini E, Gibellini L, Persiani E, Montanari G, Luppi F, Carbonelli CM, Zucchi L, Bocchino M, Zamparelli AS, Vancheri C, Sgalla G, Richeldi L, Cossarizza A,
Journal:
PubMed ID:26552487
'It has been suggested that circulating fibrocytes and endothelial cells actively participate in the intense remodelling of the pulmonary vasculature in patients with idiopathic pulmonary fibrosis (IPF). Indeed, fibrotic areas exist that have fewer blood vessels, whereas adjacent non-fibrotic tissue is highly vascularized. The number of circulating endothelial cells (CEC) ... More
The oxysterol-CXCR2 axis plays a key role in the recruitment of tumor-promoting neutrophils.
Authors:Raccosta L, Fontana R, Maggioni D, Lanterna C, Villablanca EJ, Paniccia A, Musumeci A, Chiricozzi E, Trincavelli ML, Daniele S, Martini C, Gustafsson JA, Doglioni C, Feo SG, Leiva A, Ciampa MG, Mauri L, Sensi C, Prinetti A, Eberini I, Mora JR, Bordignon C, Steffensen KR, Sonnino S, Sozzani S, Traversari C, Russo V,
Journal:
PubMed ID:23897983
'Tumor-infiltrating immune cells can be conditioned by molecules released within the microenvironment to thwart antitumor immune responses, thereby facilitating tumor growth. Among immune cells, neutrophils play an important protumorigenic role by favoring neoangiogenesis and/or by suppressing antitumor immune responses. Tumor-derived oxysterols have recently been shown to favor tumor growth by ... More
CD8+ T cell responses to lytic EBV infection: late antigen specificities as subdominant components of the total response.
Authors:Abbott RJ, Quinn LL, Leese AM, Scholes HM, Pachnio A, Rickinson AB,
Journal:
PubMed ID:24146041
EBV elicits primary CD8(+) T cell responses that, by T cell cloning from infectious mononucleosis (IM) patients, appear skewed toward immediate early (IE) and some early (E) lytic cycle proteins, with late (L) proteins rarely targeted. However, L Ag-specific responses have been detected regularly in polyclonal T cell cultures from ... More
Deficiency of terminal ADP-ribose protein glycohydrolase TARG1/C6orf130 in neurodegenerative disease.
Authors:Sharifi R, Morra R, Appel CD, Tallis M, Chioza B, Jankevicius G, Simpson MA, Matic I, Ozkan E, Golia B, Schellenberg MJ, Weston R, Williams JG, Rossi MN, Galehdari H, Krahn J, Wan A, Trembath RC, Crosby AH, Ahel D, Hay R, Ladurner AG, Timinszky G, Williams RS, Ahel I,
Journal:EMBO J
PubMed ID:23481255
Adenosine diphosphate (ADP)-ribosylation is a post-translational protein modification implicated in the regulation of a range of cellular processes. A family of proteins that catalyse ADP-ribosylation reactions are the poly(ADP-ribose) (PAR) polymerases (PARPs). PARPs covalently attach an ADP-ribose nucleotide to target proteins and some PARP family members can subsequently add additional ... More
G-CSF activation of AKT is not sufficient to prolong neutrophil survival.
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Journal:J Leukoc Biol
PubMed ID:23559492
Neutrophils play an important role in the innate immune response against bacterial and fungal infections. They have a short lifespan in circulation, and their survival can be modulated by several cytokines, including G-CSF. Previous studies have implicated AKT as a critical signaling intermediary in the regulation of neutrophil survival. Our ... More