CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit
CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit
인용 및 참조 문헌 (1)
Invitrogen™

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit는 RNA 정제 단계없이 세포에서 직접 sensitivity와 specificity가 높은 real-time qPCR 결과를 제공합니다.CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit의 특징:•자세히 알아보기
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카탈로그 번호반응 수
11753100100 reactions
11753500500 reactions
카탈로그 번호 11753100
제품 가격(KRW)
1,229,000
Each
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반응 수:
100 reactions
제품 가격(KRW)
1,229,000
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CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit는 RNA 정제 단계없이 세포에서 직접 sensitivity와 specificity가 높은 real-time qPCR 결과를 제공합니다.

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit의 특징:

• 효율성—시간과 비용을 확실히 절감하여 효율을 높입니다.
• 편이성—Enzyme mix에는 SuperScript™ III Reverse Transcriptase와 Platinum™ Taq DNA Polymerase가 둘 다 들어있습니다.
• Sensitivity—별도의 RNA 분리 단계가 없어 샘플 손실을 최소화하며 sensitivity를 높입니다.
• 방대한 검출 범위—단일 세포에서 세포 10,000개까지 폭넓은 범위의 세포에서 표적을 검출합니다.
• 활용성—Laser Capture Microdissection (LCM)로 수집한 다양한 세포주와 샘플에 사용할 수 있습니다.

작업 간편화
예전 실시간 정량 RT-PCR (qRT-PCR)에서는 먼저 시간이 많이 소요되며 물질 손실도 야기할 수 있는 RNA 세포 분리가 필요했습니다. CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit를 사용하면 세포를 용해시켜 완전한 용해물을 직접 one-step qRT-PCR 반응에 첨가해 취급과 샘플 손실을 최소화합니다.

qRT-PCR 어플리케이션에 이상적
CellsDirect™ 기술은 샘플량이 제한된 유전자 발현 연구에서 검증되었으며 RNAi knockdown 밸리데이션에 적합합니다. CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit는 특히 비용과 시간이 많이 소요되는 RNA 정제 단계를 없애 고효율 어플리케이션에서 가치를 발휘합니다 (그림 1). CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit는 유전체 DNA 표적의 검출에도 사용할 수 있습니다.

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit는 hydrolysis probes (예: TaqMan™) 또는 LUX™ 형광 프라이머와 함께 사용할 수 있습니다.

참고: 이 키트에는 별도의 ROX™ Reference Dye tube가 포함되어 있습니다. ROX™ Reference Dye를 함유한 2x Reaction Mix 상응 키트(11754-100)도 구매할 수 있습니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
사양
용도(장비)7500 Fast System, 7500 System, BioRad iQ5, BioRad MyiQ, Corbett RotorGene, MJ Opticon, Stratagene Mx3000P, Stratagene Mx3005P, Stratagene Mx4000, BioRad iCycler iQ, Cepheid SmartCycler, MJ Chromo4, QuantStudio 3 and 5 systems, QuantStudio 6 and 7 Pro systems, QuantStudio 7 Flex system, QuantStudio 12k Flex system, QuantStudio 6 Flex system
반응 수100 reactions
제품라인CellsDirect, Platinum, SuperScript
수량100 reactions
샘플 종류Cells
농도2X
검출 방법Primer-probe
용도(애플리케이션)RT-PCR
반응 속도Fast or Standard
Unit SizeEach
구성 및 보관
• 10 mL Resuspension Buffer
• 1 mL Lysis Enhancer
• 500 μL DNase I, Amplification Grade (1 U/μL)
• 160 μL 10X DNase I Buffer
• 400 μL 25 mM EDTA
• 100 μL SuperScript™ III RT/Platinum™ Taq Mix
• 2 × 1.25 mL 2X Reaction Mix
• 1 mL 50 mM MgSO4
• 2 mL DEPC-treated water
• 10 μL HeLa Total RNA (10 ng/μL)
• 100 μL ROX™ Reference Dye (store at -20°C in the dark)
The kit is shipped on dry ice and should be stored at -20°C

자주 묻는 질문(FAQ)

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

I am getting amplification in my no-template control (NTC) wells in my qPCR experiment. What is causing this?

There could be several reasons for amplification in a NTC well. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/amplification-no-template-control.html) for more details.

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인용 및 참조 문헌 (1)

인용 및 참조 문헌
Abstract
Comparison of reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction methods and platforms for single cell gene expression analysis.
Authors:Fox BC, Devonshire AS, Baradez MO, Marshall D, Foy CA,
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:22617801
Single cell gene expression analysis can provide insights into development and disease progression by profiling individual cellular responses as opposed to reporting the global average of a population. Reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) is the  ... More