Silencer™ Select Negative Control No. 1 siRNA
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Invitrogen™

Silencer™ Select Negative Control No. 1 siRNA

Ambion™ 검증된 GAPDH Positive Control siRNA 및 non-targeting Negative Control siRNAs는 효과를 최적화 하기 위해 Silencer™ Select siRNAs와 동일한 chemical자세히 알아보기
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Ambion™ 검증된 GAPDH Positive Control siRNA 및 non-targeting Negative Control siRNAs는 효과를 최적화 하기 위해 Silencer™ Select siRNAs와 동일한 chemical modification이 적용되었습니다.

• siRNA 실험 최적화에 검증된 siRNA 대조군
• 여러 세포주에서 기능적으로 검사된 GAPDH Positive Control
• 세포 증식 및 세포 활성에 미치는 영향이 최소 수준인 것으로 기능적으로 입증된 Negative Control
• Specificity 강화를 위해 Silencer™ Select modification 포함
• 사람, mouse 및 rat 세포에 이용

Silencer™ Select siRNAs이란?
Ambion™ Silencer™Select siRNAs는 차세대 Ambion™ siRNAs입니다. 이 siRNA는 최신 siRNA 디자인 및 off-target 영향 예측 알고리즘을 이용하여 디자인되며 chemical modification의 높은 specificity 및 효과 등을 보여주게 됩니다. 그 결과 낮은 silencing 효과로 인한 실험 실패가 적고 보다 명확하고 일관된 데이터를 제공합니다. 데이터, 브로셔, 웨비나, FAQ 등에 대한 자세한 정보는 applied biosystem 웹사이트를 방문하세요.

Silencer™ Select GAPDH Positive Control siRNA
사람, mouse, rat GAPDH에 대해 광범위하게 검증된 positive control siRNA는 다양한 기능을 갖습니다. 첫째, 여러 세포주 작업에 검증되어 있어 이제 막 siRNA 실험을 시작하는 사람들에게 이상적인 “test” siRNA 입니다. 또한 내부 control로 흔히 사용되는 GAPDH mRNA를 표적으로 하여 그 효과를 쉽게 분석할 수 있으므로 real-time RT-PCR 및 Ambion™ KDalert™ GAPDH Assay Kit로 siRNA transfection의 효율을 모니터링할 수 있는 탁월한 도구로 활용됩니다. Silencer™ Select GAPDH Positive Control siRNA은 다른 Silencer™ Select siRNA에 적용된 동일한 off-target 효과를 줄일 수 있는 chemical modification을 포함합니다.

Silencer™ Select Negative Control siRNAs
Negative control siRNAs—siRNA은 세포내의 그 어떠한 유전자 산물도 표적으로 하지 않아 SiRNA 전달 영향 평가에 필수적인 염기서열을 가지고 있으며 siRNA 처리 샘플과 비교할 수 있는 기준을 제공합니다. Applied Biosystems™은 두 가지 Silencer™ Select Negative Control siRNAs를 디자인하고 다양한 세포주에서 이를 검증하였습니다. 이들 siRNAs는 다른 Silencer™ Select siRNAs에서 관찰되는 것과 동일한 off-target 영향을 줄인 chemical modification 처리가 되어있으며 mouse, rat 또는 사람 유전자 염기서열과 염기서열의 유사성이 없습니다. Negative control siRNAs은 microarray 분석으로 검사되었으며 유전자 발현에 미치는 영향은 최소입니다. 또한 이런 두 control들은 다중 파라미터 세포기반 분석을 통해 검증되었으며 검사된 세포주에서 세포 증식, 활성, 형태에 중대한 영향을 미치지 않는 것으로 입증되었습니다.

품질 관리
Applied Biosystems™는 높은 품질 표준에 부합하는 첨단 시설에서 각 Silencer™ Select siRNA를 합성, 정제합니다. 본사의 엄격한 품질 관리 절차의 일부로 각 RNA oligonucleotide는 MALDI-TOF mass spectrometry로 분석되며 분석 HPLC를 사용해 순도를 모니터링합니다. 최고의 품질을 제공하기 위해 당사에서는 각 annealed siRNA를 겔 전기영동법으로 평가하여 strand의 적절한 annealing을 확인합니다. 따라서 정제되고 즉시 사용이 가능한 탁월한 품질의 siRNA를 제공합니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
사양
용도(애플리케이션)RNAi, Transfection
라벨 또는 염료Unconjugated
제품라인Silencer, Silencer Select, Ambion
제품 유형siRNA
순도HPLC
수량5 nmol
배송 조건Room Temperature
제어 유형Negative Control
RNAi TypesiRNA
Unit SizeEach
구성 및 보관
Contains dried siRNA at (5 nmol) and Nuclease-free Water (1.75 mL), shipped at ambient temperature. Upon receipt, store siRNAs in a non-frost-free freezer at or below –20°.

자주 묻는 질문(FAQ)

What are the benefits of using a vector to deliver RNAi?

Vector technologies allow you to:

Achieve transient or stable target knockdown
Perform RNAi in any cell type, even hard-to-transfect, primary, and non-dividing cells
Regulate gene inhibition with inducible siRNA expression
Select for a pure population of cells stably expressing an siRNA sequence
Control gene expression in vivo with tissue-specific promoters

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our RNAi Support Center.

Why are my cells dying after transfection?

We would suggest running a transfection reagent control only to determine if your cells are sensitive to the transfection reagent. Additionally, you can try using different cell densities and siRNA concentrations to diminish any toxic effects from the transfection itself.

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I transfected my siRNA and the mRNA levels are down, but the protein is not. Why is that?

In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down. Additionally, a longer time course may be needed to see an effect on protein compared to mRNA.

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I am not getting my target knockdown. What could be the cause of this?

Please see the following possibilities and suggestions:

- How many siRNA did you test? Is there any knockdown? If there is no knockdown (<10%) in any of the siRNA, then the assay is likely the problem. Try using a different qRT-PCR assay to assess knockdown.
- What was the positioning of the qRT-PCR assay target site relative to the cut site for the siRNA? If greater than 3,000 bases away, the problem could be alternative splice transcripts.
- What are the Cts for the experiment? They should be below 35 in a 40-cycle qRT-PCR experiment.
- Did you confirm the siRNA got into the cell? We recommend using a validated positive control siRNA to check the transfection efficiency.

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I am not getting any knockdown with my siRNA. What do you suggest I try?

Please see the following possibilities and suggestions:

- Were the mRNA levels checked? The most reliable method is real-time PCR. In some cases, knockdown of a protein can be affected by other variables, such as protein turnover rate, even though the RNA is knocked down.
- How is the RNA being isolated? Has the quality of the isolated RNA been checked? Ensure that the RNA has not been degraded.
- Was a positive control used? This can help to determine whether the reagents are working and whether the siRNA was delivered correctly to the cell. Run your experiment in parallel with the positive control siRNA.
- Was a transfection control used? What is the percentage of transfected cells?
- Was a time course used? Generally, gene silencing can be assessed as early as 24 hours posttransfection. However, the duration and level of knockdown are dependent on cell type and concentration of siRNA.
- Was optimization of transfection conditions performed? You can try using different cell densities and siRNA concentrations.
- Which concentration of siRNA did you use? We recommend testing multiple concentrations between 5 nM and 100 nM.

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