MeltDoctor™ HRM Master Mix
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Applied Biosystems™

MeltDoctor™ HRM Master Mix

Applied Biosystems™ MeltDoctor™ HRM Master Mix는 다양한 genome 표적 전반에서 우수한 HRM 성능을 발휘하도록 제제화된 모든 성분(template 및 primer 제외)을자세히 알아보기
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카탈로그 번호수량
44154405 mL
440953550 mL
441545010 x 5 mL
44154525 x 5 mL
카탈로그 번호 4415440
제품 가격(KRW)
981,000
Each
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수량:
5 mL
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Applied Biosystems™ MeltDoctor™ HRM Master Mix는 다양한 genome 표적 전반에서 우수한 HRM 성능을 발휘하도록 제제화된 모든 성분(template 및 primer 제외)을 포함합니다. HRM(High Resolution Melting) 분석은 핵산과 염기서열에서 유전적 변이를 확인하기 위해 사용하는 PCR 후 분석 방법입니다. 일부 경쟁사 mix와 달리 MeltDoctor™ HRM Master Mix는 사용전 추가 혼합이 필요하지 않으며 HRM 어플리케이션만을 위해 개발, 최적화되었습니다.
• 낮은 형광 background
• double-stranded DNA가 있는 부분의 밝기가 높습니다.
• dye 결합으로 DNA melting의 최소 온도 변화
• PCR cycling 조건을 견디는 열안정성
• Polymerase 의 활성을 억제하지 않아 PCR 효율이 높습니다.
• dUTP를 포함한 dNTP 혼합으로 추후 PCR 반응에서 UDG(DNA glycosylase)로 amplicon 분해가 가능하여 전달 오염(Carryover contamination)을 최소화합니다.

돌연변이 스캔 수행
HRM 분석을 사용해 염기서열 분석 전 여러 표적 샘플의 유전자 돌연변이를 스캔하는데 사용할 수 있습니다. 돌연변이의 검출 기술로써 HRM는 Denaturing High- Performance Liquid Chromatography (DHPLC) 및 Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE) 등의 다른 기존 방법보다 큰 장점을 제공합니다. 특히 돌연변이 스캔에 대한 HRM의 장점은 다음과 같습니다.
• 낮은 시약 소비 및 폐기물 감소: HRM은 각 샘플 분석에 단 20 μL PCR 반응만 필요로 하며 HPLC 용매 또는 DGGE 겔이 필요하지 않습니다.
• 간편하고 신속한 workflow: PCR 증폭 후 추가 기기조작이 필요하지 않습니다. 고분해능 melt 단계를 PCR 프로필 종료 후 간편하게 추가하여 즉시 분석할 수 있습니다.
• 빠른 최적화: DHPLC와 달리 열 최적화가 필요하지 않습니다.
• 낮은 샘플 소비: HRM 분석 후 PCR 산물을 직접 Sanger sequencing 반응에 사용할 수 있습니다.

고품질 성분
• 최적의 HRM 결과를 얻도록 정밀하게 제제화된 Magnesium 염 및 기타 buffer성분.
• AmpliTaq Gold™ 360 DNA Polymerase는 고순도 DNA polymerase로 hot-start 성능을 제공하며 비특이 산물 형성을 최소화하고 실온에서 실험을 진행할 수 있습니다.
• MeltDoctor™ HRM Dye- Molecular Probes에서 개발한 형광 SYTO™ 9 double-stranded 핵산 염색 시약의 안정한 형태입니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
사양
용도(장비)7500 Fast System, 7900HT Fast System, QuantStudio™ 12k Flex, QuantStudio™ 3, QuantStudio™ 5, QuantStudio™ 6 Flex, QuantStudio™ 7, StepOne™, StepOnePlus™, ViiA™ 7 System
유전형 분석 타겟SNPs (Unknown or Numerous), Epigenetic Targets
반응 수500 Reactions
중합효소AmpliTaq Gold 360 DNA Polymerase
제품라인MeltDoctor
제품 유형HRM Master Mix
수량5 mL
샘플 종류DNA (Genomic), cDNA
배송 조건Wet Ice
기술HRM (High Resolution Melting) Analysis, Mutation Scanning
부피5 mL
검출 방법HRM
용도(애플리케이션)Genotyping
형태Liquid
GC-Rich PCR PerformanceHigh
라벨 또는 염료High Resolution Melting (HRM), SYTO 9
PCR 방법qPCR
반응 속도Fast
Unit SizeEach
구성 및 보관
Components of the MeltDoctor™ HRM Master Mix, provided in a convenient 2X mix, include: AmpliTaq Gold™ 360 DNA Polymerase, MeltDoctor*trade; HRM Dye, a dNTP blend including dUTP, Magnesium salts and other buffer components, precisely formulated to obtain optimal HRM results.

Store at -15 °C to -25 °C

Guaranteed minimum shelf life is 60 days (exact expiry date printed on product and CofA).

자주 묻는 질문(FAQ)

The HRM software will not accept my calibration file. What is wrong?

Check that there are no outliers on the plate. You cannot omit any wells on the HRM calibration plate.

I have a 7900HT Fast Real-Time PCR System, and cannot open the data file in HRM software. What could be causing this?

There are a few possibilities. First, make sure the HRM Software version is v2.0.1, and the 7900HT Fast Real-Time PCR System software version is v2.3 or above. Second, check that the run method used was as recommended in the HRM protocol; make sure the ramp rate for the dissociation stage is 1%. Then try to open the calibration file from the HRM Software; if it does not open, the calibration file is defective. The defects could be due to a bad calibration plate or instrument uniformity issue.

My 7500 Fast Real-Time PCR System has been upgraded to v2.0.6, so why can't I analyze my files with HRM Software v2.0.1?

For the 7500 Fast Real-Time PCR System, if the software version is below v2.0.4, the compatible HRM Software is v2.0.1. If the 7500 Fast Real-Time PCR System has been upgraded to software version 2.0.4 or above, then you will need to get HRM Software version 3.0.1.

How can I get positive controls for the different genotypes for my HRM experiment?

You can order a synthetic positive control plasmid using our GeneArt Gene Synthesis services. The final product is sequence verified and provided as 5 µg of lyophilized plasmid. Alternatively, you may be able to find a positive control sample from Coriell.

How do I perform the HRM calibration on my real-time PCR instrument?

The HRM calibration is a 3-step procedure. In some instrument software, the calibration process has been streamlined to a single-step procedure (applies to the ViiA7 Real-Time PCR System and QuantStudio Real-Time PCR Systems).

For the HRM calibration, the first step is a PCR reaction to generate the HRM dye plate. The reaction plate contains a DNA template, a primer pair, and the PCR mix with HRM dye. The second step is dye calibration using the PCR plate from step 1. The last step is a melt curve run, again using the same plate. For details, please refer to the HRM guides for each instrument:

- 7500 Fast Real-Time PCR System (with software version 1.4 or 2.0.4 and below) (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/cms_050347.pdf)
- 7500 Fast Real-Time PCR System (with software version 2.0.5 and above) (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/4457847.pdf)
- 7900HT Real-Time PCR System (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/cms_050347.pdf)
- StepOne and StepOnePlus Real-Time PCR Systems (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/4457847.pdf)
- ViiA 7 Real-Time PCR System (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/4443531.pdf)
- QuantStudio 6 and 7 Real-Time PCR Systems (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/4489823.pdf)
- QuantStudio 6 and 7 Pro Real-Time PCR Systems (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN0018981_HighResolutionMelt_DA_SW_UG.pdf)
- QuantStudio 3 and 5 Real Time PCR Systems (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/MAN0014394_HighResMeltExperiment_GSG.pdf)
- QuantStudio 12K Flex Real-Time PCR System (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/4470692A.pdf)

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