eBioscience™ Mouse Regulatory T Cell Staining Kit #1

FJK-16 항체는 FORKHEAD BOX P3, SCURFIN 및 JM2로도 불리는 생쥐/쥐 Foxp3과 반응하며, 다른 단백질에 대한 이 항체의 교차 반응도는 정확하게 밝혀지지 않았습니다. 49-55 kDa 단백질인 Foxp3은 전사제어인자의 포크헤드/날개 나선군(forkhead/winged-helix family)에 속하며 스커피(SF) 쥐의 결함 유전자로 확인되었습니다. CD4+CD25+ 조절 T 세포(Treg 세포)에서 높은 수준으로 Foxp3 mRNA의 구성적 발현이 관찰되었으며, CD4+CD25-세포에서 Foxp3의 이소성 발현은 이들 세포에 Treg 표현형을 부여합니다.

FJK-16 항체를 이용한 면역 블로팅법으로 생쥐 Foxp3 단백질의 아미노산 75-125에 항원결정인자를 매핑하였습니다. 인간 세포에서는 이 부위가 mRNA 수준에서 선택적으로 스플라이싱되는 것으로 확인되었습니다. 선택적으로 스플라이싱되거나 스플라이싱되지 않은 동형 모두 CD4+CD25+ 림프구 아집단에서 관찰됩니다. 예비 RT-PCR 실험을 통해 생쥐 비장세포에서는 이와 같은 선택적으로 스플라이싱된 동형이 관찰되지 않았으며, 이는 생쥐와 인간의 유전자 조절 방식이 다름을 시사합니다.

생쥐 Foxp3 염색 세트와 프로토콜을 이용한 FJK-16 생쥐 비장세포의 세포내 염색을 통해 총 비장세포 중 약 2%의 C57Bl/6 생쥐 변이종과 3 ∼ 5%의 BALB/c 생쥐 변이종이 확인됩니다. 다색 유세포분석에서는 FJK-16 염색을 통해 CD4+CD25+ 세포의 약 90%와 CD4+CD25- 세포의 약 4%가 확인되었습니다. B220+, CD11b+, CD11c+ 및 Ly6G/Gr-1+ 세포는 FJK-16을 이용한 동시 염색이 유의하게 나타나지 않았습니다. 이 데이터는 GFP 녹인 기법을 이용한 Foxp3 발현에 관한 최근 보고와 일관성을 보입니다(Fontenot 등 2005).

FJK-16은 Foxp3과 교차 반응합니다. 이러한 사실은 생쥐 조직에 사용된 것과 동일한 방법 및 시약을 이용하여 Foxp3을 세포내 염색하고 유세포분석을 실시하여 확인했습니다. 단, 이 키트에 포함된 CD4와 CD25 항체는 생쥐 항원만 인식합니다. 쥐 조직 염색은 (CD4 FITC cat. 11-0040 및 CD25 APC cat. 17-0390)을 이용하십시오.

항-생쥐 Foxp3 염색 세트는 FJK-16 단클론항체를 이용한 생쥐 비장세포에 최적화된 형태로 조제되었습니다.

미포함:
항-CD4(rat IgG2a, cat. 11-4321)와 항-CD25(rat IgG1, cat. 17-4301)의 동형 항체