HisPur™ Ni-NTA Resin
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Thermo Scientific™

HisPur™ Ni-NTA Resin

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Resin은 His 태그 융합 단백질의 일반적인 친화 정제를 위한 고수용력, 고성능 nickel-IMAC 수지입니다.HisPur Ni-NTA Resin의 특징:•자세히 알아보기
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카탈로그 번호 88221
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Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Resin은 His 태그 융합 단백질의 일반적인 친화 정제를 위한 고수용력, 고성능 nickel-IMAC 수지입니다.

HisPur Ni-NTA Resin의 특징:

고수용력—수지 1ml당 최대 60mg의 6xHis 태그 단백질 결합
활용성—천연 또는 변성 조건을 사용해 단백질 정제
호환성— Thermo Scientific Cell Lysis Reagent와 다양한 버퍼 첨가제와 함께 사용
비용 효율성—동일한 배치(batch)의 수지를 5회 이상 재사용
사용 용이성—키트 형식에서 사용 가능한 사전 제형화된 버퍼
융통성—대량 수지, spin column, 크로마토그래피 카트리지, 96-well 필터 플레이트를 비롯한 다양한 형식으로 사용 가능

특수 조제된 이 보조제는 NTA(nitrilotriacetic acid) 킬레이트화 moiety로 유도되고 2가 니켈 이온(Ni2+)을 함유한 beaded agarose로 이뤄져 있습니다. 고정 금속 친화 크로마토그래피(immobilized metal affinity chromatography, IMAC) 수지는 재조합 His 태그 단백질 정제에서 우수한 결합능과 성능을 나타냅니다.

재조합 단백질의 발현 및 정제는 단백질 조절, 구조, 기능 연구에 있어 핵심적인 부분입니다. 대다수 재조합 단백질은 짧은 친화 태그(가장 인기 많은 태그는 polyhistidine (6xHis) 태그)와의 융합으로서 발현됩니다. 재조합 His 태그 단백질을 정제하는 데 사용되는 방법은 고정 금속 친화 크래마토그래피(IMAC)로, histidine 측 사슬과 조화되는 니켈이나 코발트 이온으로 하전된 킬레이트 수지로 구성되어 있습니다.

HisPur Ni-NTA Resin은 Thermo Scientific B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent로 채취한 단백질과 같이 박테리아 용해물에서 과발현된 His 태그 융합 단백질 다량을 효과적으로 정제합니다. 이 수지는 다양한 규모의 배치(batch) 결합 및 스핀-컬럼 절차에서 우수한 성능을 발휘합니다. 성능은 다른 공급업체의 인기 있는 Ni-NTA 수지와 동등하거나 그보다 우수합니다. HisPur Ni-NTA Resin은 안정적이고 회복력이 우수한 고품질 보조제입니다. 5회 이상 반복 사용 한 후 검사를 통해 성능 저하가 있는지 확인합니다. 이 데이터에 따르면 이 수지는 일반 사용 중에 구조적 분해나 니켈 이온 리칭(leaching)에 대한 내성이 강합니다.

HisPur Ni-NTA Resin과 HisPur Cobalt Resin은 His 태그 결합을 담당하는 킬레이트화 금속 이온으로서 니켈을 사용하는 전자와 코발트를 사용하는 후자, IMAC의 대체 형태입니다. Ni-NTA 수지는 킬레이트에서 금속 결합 부위가 4개 있기 때문에 6xHis 태그 단백질 정제를 위한 가장 일반적인 IMAC 수지 제품으로, 높은 단백질 결합과 낮은 금속 이온 리칭이 가능합니다. 코발트는 약한 강도로 결합하여 확연히 판별 가능하고, His 태그 단백질 정제에서 순도가 높아지지만 수율은 낮아집니다.

사용 가능한 형식:
수지 슬러리(Resin Slurry)—교차결합된 6% beaded agarose. 10mL, 100mL, 500mL 병
스핀 컬럼(Spin Column)—0.2mL(미세원심분리), 1mL, 3mL 컬럼
정제 키트(Purification Kit)—세 가지 컬럼 크기 전체가 든 완전한 키트
크로마토그래피 카트리지(Chromatography Cartridge)—자세히 알아보기 및 HisPur Chromatography Cartridge 데이터 참조
96-well 스핀 플레이트—

관련 자료:
His 태그 융합 단백질 생성 및 정제 검토

관련 제품:
His-Tag Antibodies
His 태그 단백질 정제 제품—Ni-NTA 및 Cobalt Superflow 수지 포함
Ni-NTA Magnetic Beads—벤치톱 또는 자동 자기 분리
Nickel Coated Plates—His 태그 단백질을 사용한 플레이트 기반 분석 전용
B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent—박테리아에서 고수율 추출 가능

—융합 단백질 정제 전용
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
사양
컬럼 유형Affinity, Agarose Resin
설명HisPur Ni-NTA Resin
형식Bottle
수량10 mL
정지상Divalent Nickel, Metal Chelate
타겟His-Tagged Protein
용량(미터법)Up to 60 mg of 6xHis-Tagged Protein Binding per mL Resin
형태Liquid Suspension
제품라인HisPur
유형Resin
Unit SizeEach
구성 및 보관
Store at 4°C

자주 묻는 질문(FAQ)

Are there other sequences that can bind to nickel more tightly than 6xHis-tagged proteins and how can they be eluted.

Yes, 7xHis-tagged proteins, proteins naturally high in histidine, and other combinations of His and other amino acids will bind. To elute them, you have to increase the concentration of imidazole. Generally these peptides will not contaminate your fraction since they remain on the column. However after multiple uses of the same column, these peptides may reduce the binding capacity of the column.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can the HisPur Ni-NTA Spin plates (Cat. No. 88230) be regenerated and reused, or are they for single-use only?

The resin can be re-used at least five times; this is also for the resin in the plates. Regeneration is possible using this procedure (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0011700_HisPur_NiNTA_Resin_UG.pdf) Since the resin bed volume in each well is 50 µL, you can use 250 µL twice to give a total of 10 resin-bed volume.

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How do I perform Ni-NTA bead regeneration with the HisPur Ni-NTA Resin (Cat. No. 88221)?

Please refer to page 2 (buffer preparation) and page 3 (procedure) of the manual (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN0011700_HisPur_NiNTA_Resin_UG.pdf) for information regarding bead regeneration.

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Can ProBond or Ni-NTA beads be used for large-scale preparations?

ProBond and Ni-NTA beads can be used in FPLC columns. However, the beads can only withstand low pressure (~43.5 psi max).

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What should the typical protein recovery be when using the Probond Purification System or Ni-NTA Purification system?

Both systems are qualified by purifying 2 mg of myoglobin protein on a column and performing a Bradford assay. Protein recovery must be 75% or higher.

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