Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Resin은 His 태그 융합 단백질의 일반적인 친화 정제를 위한 고수용력, 고성능 nickel-IMAC 수지입니다.

HisPur Ni-NTA Resin의 특징:

• 고수용력—수지 1ml당 최대 60mg의 6xHis 태그 단백질 결합
• 활용성—천연 또는 변성 조건을 사용해 단백질 정제
• 호환성— Thermo Scientific Cell Lysis Reagent와 다양한 버퍼 첨가제와 함께 사용
• 비용 효율성—동일한 배치(batch)의 수지를 5회 이상 재사용
• 사용 용이성—키트 형식에서 사용 가능한 사전 제형화된 버퍼
• 융통성—대량 수지, spin column, 크로마토그래피 카트리지, 96-well 필터 플레이트를 비롯한 다양한 형식으로 사용 가능

특수 조제된 이 보조제는 NTA(nitrilotriacetic acid) 킬레이트화 moiety로 유도되고 2가 니켈 이온(Ni²⁺)을 함유한 beaded agarose로 이뤄져 있습니다. 고정 금속 친화 크로마토그래피(immobilized metal affinity chromatography, IMAC) 수지는 재조합 His 태그 단백질 정제에서 우수한 결합능과 성능을 나타냅니다.

재조합 단백질의 발현 및 정제는 단백질 조절, 구조, 기능 연구에 있어 핵심적인 부분입니다. 대다수 재조합 단백질은 짧은 친화 태그(가장 인기 많은 태그는 polyhistidine (6xHis) 태그)와의 융합으로서 발현됩니다. 재조합 His 태그 단백질을 정제하는 데 사용되는 방법은 고정 금속 친화 크래마토그래피(IMAC)로, histidine 측 사슬과 조화되는 니켈이나 코발트 이온으로 하전된 킬레이트 수지로 구성되어 있습니다.

HisPur Ni-NTA Resin은 Thermo Scientific B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent로 채취한 단백질과 같이 박테리아 용해물에서 과발현된 His 태그 융합 단백질 다량을 효과적으로 정제합니다. 이 수지는 다양한 규모의 배치(batch) 결합 및 스핀-컬럼 절차에서 우수한 성능을 발휘합니다. 성능은 다른 공급업체의 인기 있는 Ni-NTA 수지와 동등하거나 그보다 우수합니다. HisPur Ni-NTA Resin은 안정적이고 회복력이 우수한 고품질 보조제입니다. 5회 이상 반복 사용 한 후 검사를 통해 성능 저하가 있는지 확인합니다. 이 데이터에 따르면 이 수지는 일반 사용 중에 구조적 분해나 니켈 이온 리칭(leaching)에 대한 내성이 강합니다.

HisPur Ni-NTA Resin과 HisPur Cobalt Resin은 His 태그 결합을 담당하는 킬레이트화 금속 이온으로서 니켈을 사용하는 전자와 코발트를 사용하는 후자, IMAC의 대체 형태입니다. Ni-NTA 수지는 킬레이트에서 금속 결합 부위가 4개 있기 때문에 6xHis 태그 단백질 정제를 위한 가장 일반적인 IMAC 수지 제품으로, 높은 단백질 결합과 낮은 금속 이온 리칭이 가능합니다. 코발트는 약한 강도로 결합하여 확연히 판별 가능하고, His 태그 단백질 정제에서 순도가 높아지지만 수율은 낮아집니다.

사용 가능한 형식:
• 수지 슬러리(Resin Slurry)—교차결합된 6% beaded agarose. 10mL, 100mL, 500mL 병
• 스핀 컬럼(Spin Column)—0.2mL(미세원심분리), 1mL, 3mL 컬럼
• 정제 키트(Purification Kit)—세 가지 컬럼 크기 전체가 든 완전한 키트
• 크로마토그래피 카트리지(Chromatography Cartridge)—자세히 알아보기 및 HisPur Chromatography Cartridge 데이터 참조
• 96-well 스핀 플레이트—

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—융합 단백질 정제 전용