Amine-reactive Thermo Scientific TMT™ Isobaric Mass Tagging Kits and Reagents는 직렬 질량분광분석법을 사용해 세포와 조직에서 추출된 단백질을 다중으로 정량할 수 있습니다.

Tandem Mass Tag™ 6-plex (TMTsixplex™) Reagents는 동중핵(isobaric) 화합물 세트(즉, 질량과 구조가 동일함, 동위원소 이성질체[isotopomer]라고도 함)로서 NHS 활성화되어 있어 일차 아민(–NH2) 기(group)를 공유 및 비가역적 방식으로 표지할 수 있습니다. 각 동중핵 시약은 질량 리포터 영역에 각기 다른 개수의 무거운 동위원소를 함유하고 있어 샘플 확인과 상대적 정량이 가능하도록 직렬 MS/MS 중에 고유한 리포터 질량이 나타납니다. 이 시약은 세포나 조직 샘플로 조제된 모든 펩티드를 표지하므로 단일 MS 분석에서 샘플을 최대 6개까지 분석할 수 있습니다.

TMTsixplex Isobaric Mass Tagging Kit의 특징:

• 우수한 성능 – 여러 샘플의 동시 MS 분석이 가능하여 샘플 처리량이 증가하고 세포, 조직, 생물 체액에서 유래된 샘플을 최대 6개까지 상대 정량할 수 있음
• 일관성 – TMTzero™, TMTduplex™, TMTsixplex™ TMT10plex™ 시약의 시약 구조와 성능이 동일하므로 방법 개발부터 다중 정량까지의 효율적인 전환이 가능하여 여러 플랫폼과 데이터세트에서 생물표지자 발견 연구에 유용함
• 강건성 – 일관된 화학을 통해 방법 개발부터 다중 정량까지의 효율적인 전환이 가능하여 생물표지자 발견 연구에 유용함
• 효율성 – 아민 반응성 NHS-에스테르 활성 시약은 단백질 염기서열이나 단백질의 가수분해(proteolytic) 효소 특이성에 상관 없이 모든 펩티드를 효율적으로 표지
• 호환성 – Proteome Discoverer™ 1.0 이상이 완벽하게 지원하는 데이터 분석이 가능한 Q Exactive, Orbitrap Elite™, Orbitrap Fusion™ Tribrid™ 기기 등 고해상도 Thermo Scientific MS/MS 플랫폼에서 사용할 수 있도록 최적화됨

어플리케이션:
• 세포, 조직, 생물 체액에서 유래한 여러 샘플의 단백질 확인과 정량
• 정상 상태와 질병 상태 비교 또는 대조군과 치료된 상태 비교를 위한 단백질 발현 프로파일링
• 단일 실험에서 최대 6가지 샘플을 동시에 측정
• 사용 가능한 항체가 없는 단백질의 정량 분석
• 막(membrane) 및 번역 후 변형 단백질(post-translationally modified proteins)의 확인과 정량
• 단일 실험에서 수백, 수천 개의 단백질을 확인하고 정량

단백질 발현과 번역 후 변형에서의 변화는 생물학적 조절과 질병의 필수적인 기전입니다. 액체 크로마토그래피(LC), 질량분광분석법(MS) 기기, 생물정보학(Bioinformatic)이 발전을 거듭하면서 이제 연구자들은 준비된 샘플에서 높은 신뢰도로 수천 개의 단백질을 확인할 수 있습니다.  그렇지만, 질량분광분석법을 사용해 샘플 내에서 각기 다른 단백질을 높은 재현성으로 검출하고 정량하는 일은 펩티드 분리, 이온화, 검출의 변동성으로 인해 여전히 어렵습니다.

Tandem Mass Tag (TMT) Reagent는 직렬 질량분광분석법을 사용해 각기 다른 샘플에서 동시에 단백질을 확인하고 정량하는 동중핵(isobaric) 화학적 태그입니다. 아민 반응성 NHS-에스테르 활성 화합물은 펩티드 아미노 말단, 그리고 펩티드와 단백질 lysine 잔기의 유리(free) 아미노 말단에 매우 효율적으로 공유 결합되므로, 절단에 사용되는 효소에 상관 없이 준비된 샘플의 모든 펩티드를 표지합니다. TMT 시약은 동일한 구조와 질량(즉, 동위원소 이성질체[isotopomer])을 공유하기 때문에, 표지된 펩티드는 LC 분리 중에 동시에 용출되고 MS/MS 분석 중에는 동시에 분리되므로, 여러 샘플에서 펩티드 확인이 누락되는 횟수가 줄어듭니다. MS/MS 분석 중에 각 동중핵 태그도 분절되어 샘플 확인과 정량에 사용되는 고유한 리포터 이온 질량을 생성합니다. 단백질 정량은 MS/MS 스펙트럼에서 리포터 이온 6개의 상태적인 강도를 비교하여 실시합니다.

Tandem Mass Tag(TMT) Reagent 제품군은 방법 개발부터 고효율 단백질 정량까지 저렴하고 신속하게 전환할 수 있는 TMTzero, TMTduplex, TMTsixplex, TMT10plex 세트로 구성되어 있습니다. TMTzero 태그를 사용해 샘플 조제의 검사 및 최적화, 표지, 분획, MS 분획이 가능하므로 고가의 동위원소 표지 화합물을 사용하지 않고도 펩티드를 확인하고 리포터를 검출할 수 있습니다. TMTsixplex 시약 세트를 사용해 시간 경과, 용량 반응, 복제, 여러 동일 비교를 비롯한 여러 조건에서 6개 단백질 프로파일링이 가능합니다. 각 TMT 태그는 동일한 화학적 구조를 기반으로 하므로, 여러 실험 사이에서 표지 조건이나 HPLC 분리 조건을 수정하지 않아도 됩니다.

TMT Reagent은 단독형 세트나 모든 필수 시약과 대조군을 포함하는 최적화된 키트 형태로 출시되므로 최고의 융통성, 편의성, 안정성을 보장합니다. 업계 최고의 Thermo Scientific 기기와 소프트웨어가 들어 있는 Tandem Mass Tag Reagent는 정량 단백질 발현 분석을 위한 통합형 토탈 시스템 솔루션입니다.

관련 자료
질량분광분석법 샘플 조제 Workflow - 제품 가이드
질량분광분석법 기술 가이드
정량 단백질체학(proteomics) 기술 가이드

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