Dextran, Alexa Fluor™ 647; 10,000 MW, Anionic, Fixable
Dextran, Alexa Fluor™ 647; 10,000 MW, Anionic, Fixable
인용 및 참조 문헌 (33)
Invitrogen™

Dextran, Alexa Fluor™ 647; 10,000 MW, Anionic, Fixable

표지된 dextrans은 세포 분화 모니터링, live cell의 추적, 세포질 기질(cytoplasmic matrix)의 유체역학적 변화의 관찰 등을 위한 현미경분석에서 가장 흔히 사용되는자세히 알아보기
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표지된 dextrans은 세포 분화 모니터링, live cell의 추적, 세포질 기질(cytoplasmic matrix)의 유체역학적 변화의 관찰 등을 위한 현미경분석에서 가장 흔히 사용되는 hydrophilic polysaccharides입니다. 표지된 dextran은 미세 접종을 통해 세포에 도입됩니다.

Dextran 사양:
  • Label (Ex/Em): Alexa Fluor™ 647 (650/668)
  • 크기: 10,000 MW
  • 전하: 음이온
  • 고정성: 유리 amine을 통해 고정 가능
Molecular Probes™ Dextrans의 높은 제조 표준
자사는 다양한 분자량 범위에서 50개 이상의 형광 및 biotinylated dextran conjugate를 제공합니다. Dextran은 중간 정도에서 큰 분자량, 우수한 용해도, 낮은 독성으로 특징지어지는 hydrophilic polysaccharides입니다. 또한 일반적으로 면역반응에 대한 발생이 낮습니다. Dextran은 특징적인 poly-(α-D-1,6-glucose) 결합으로 인해 생물학적으로 불활성이며, 대부분의 endogenous cellular glycosidase에 의한 절단에 내성이 있습니다.

대부분의 경우 Molecular Probes™ fluorescent dextrans는 다른 곳에서 이용할 수 있는 dextrans보다 밝고 음전하가 많습니다. 또한, 자사는 현실적으로 미접합 염료(unconjugated dye)를 제거하는 탁월한 방법을 사용하며 이후에 thin-layer 크로마토그래피로 자사의 dextran conjugate를 분석하여 저분자량 오염물이 존재하지 않음을 보장합니다.

다양한 치환물 및 분자량
Molecular Probes™ dextrans은 biotin 또는 자사의 7가지 Alexa Fluor™ dye를 비롯해 다양한 fluorophore에 접합하며Molecular Probes dextran conjugates-Table 14.4) 다음과 같은 다양한 분자량(MW)의 제품을 구입할 수 있습니다.: 3,000; 10,000; 40,000; 70,000; 500,000; 2,000,000 daltons.

Dextran 순전하 (net charge) 및 고정력 (fixability)
자사의 dye와 dextran 분자에 succinimidyl 결합 방식을 사용해 대부분의 경우에서 중성 또는 음이온 dextran을 만듭니다. Rhodamine Green™ 및 Alexa Fluor™ 488 dextrans 생성에 사용되는 반응은 최종 산물을 중성, 음이온 또는 양이온으로 만듭니다. Alexa Fluor™, Cascade Blue™, lucifer yellow, fluorescein, 및 Oregon Green™ dextrans은 본질적으로 음이온이며 zwitterionic rhodamine B, tetramethylrhodamine, 및 Texas Red™ dye로 표지되는 dextrans 대부분은 근본적으로 중성입니다. 보다 많은 음이온 dextran을 생성하기 위해 자사는 음전하기를 dextran 운반자에 추가하는 고유한 공정을 개발하였습니다. 이 산물이 “polyanionic” dextrans입니다.

일부 어플리케이션에는 추후 분석을 위해 dextran 추적자를 포름알데히드 또는 glutaraldehyde로 처리해야 합니다. 이런 어플리케이션에서 본사는 fluorophores 또는 biotin의 dextran conjugate 대부분에서 “lysine-fixable” 버전을 제공합니다. 이런 dextrans은 lysine residues와 공유결합하여 추후 면역조직화학 및 초미세구조 기법(ultrastructural technique) 검출을 위해 알데히드를 이용한 고정 과정 이후 dextran 추적자가 주변 생체분자에 접합할 수 있게 합니다. 또한 자사의 10,000 MW Alexa Fluor™ dextran conjugate 모두 알데히드 기반 fixative로 고정될 수 있다는 점도 밝혔습니다

표지 Dextrans을 이용한 주요 어플리케이션
표지된 dextrans의 사용에 대해 인용된 많은 문헌이 있습니다. 가장 흔한 몇 가지 용도는 다음과 같습니다.
  • Live cell에서 뉴런 추적(순행 및 역행 [anterograde and retrograde])
  • Live cell에서 세포 계통 추적
  • 뉴런의 해부학적 추적
  • 세포 내의 신호전달의 분석(예: gap junction, 상처 회복 중, 배아 발생 중)
  • 혈관 투과성 및 혈관-뇌 관문 (blood-brain barrier) 완전성 검사
  • endocytosis 추적
  • 산성화 모니터링(일부 dextran-dye conjugate는 pH 에 민감합니다.)
  • 세포질 기질의 유체역학 속성 연구
연구용으로만 사용할 수 있습니다.  동물 또는 사람의 치료 또는 진단용으로 사용할 수 없습니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
사양
라벨 또는 염료Alexa Fluor Dyes
제품 유형Dextran
수량2 mg
배송 조건Room Temperature
Excitation/Emission650/668 nm
제품라인Alexa Fluor
Unit SizeEach
구성 및 보관
Store in freezer (-5 to -30°C) and protect from light.

자주 묻는 질문(FAQ)

I can't see the structural details of neurons when I inject my fluorescent dextran. What can I do to improve the detailed structure?

If you want to see the most detailed structure you should use the low molecular weight conjugated dextrans such as the 3,000 MW dextrans.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Why isn't my fluorescently conjugated dextran signal retained after fixation?

Ensure that the dextran you are using is the fixable form (i.e., contains a primary amine). Dextrans that do not contain a primary amine will not be fixed. Another factor could be that the concentration of the dextran is too low, and the concentration use can be increased up to 10 mg/mL.

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What are the charges of the dextrans?

We do not determine the net charge of the dextran conjugates. The net charge depends on the fluorophore used to label the dextran and the method of preparing the conjugate. We label some dextrans as neutral or anionic based on the fluorophore used, however the net charge of the dextran may not always be the same as the dye. The Alexa Fluor, Cascade Blue, Lucifer Yellow, fluorescein, and Oregon Green dextrans are intrinsically anionic, whereas most of the dextrans labeled with the zwitterionic Rhodamine B, tetramethylrhodamine and Texas Red dyes are essentially neutral.

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What size dextran is best for neuronal tracing?

Dextrans with molecular weights from 3,000 to 70,000 have been used, however the 3,000 and 10,000 MW dextrans are most commonly used for neuronal tracing. The 3,000 MW dextrans are used for more detailed tracing of fine neuronal projections, investigating gap junctions, and diffuse more quickly; while the 10,000 MW dextrans have slower distribution, longer cellular retention, and do not cross gap junctions.

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Do you have a neuronal tracing protocol?

The NeuroTrace BDA-10,000 Neuronal Tracer Kit (Cat. No. N7167) manual has a good protocol for injection procedures and neuronal tracing using the10,000 MW lysine-fixable biotin dextran amine (BDA). This protocol could potentially be applied to other fluorescent dextrans.

Please review Tables 1a and 1b on pages 4 and 5 - https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/mp07167.pdf

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인용 및 참조 문헌 (33)

인용 및 참조 문헌
Abstract
Glycosylation influences the lectin activities of the macrophage mannose receptor.
Authors:Su Y, Bakker T, Harris J, Tsang C, Brown GD, Wormald MR, Gordon S, Dwek RA, Rudd PM, Martinez-Pomares L
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:15983039
'The mannose receptor (MR) is a heavily glycosylated endocytic receptor that recognizes both mannosylated and sulfated ligands through its C-type lectin domains and cysteine-rich (CR) domain, respectively. Differential binding properties have been described for MR isolated from different sources, and we hypothesized that this could be due to altered glycosylation. ... More
Receptor (CD155)-dependent endocytosis of poliovirus and retrograde axonal transport of the endosome.
Authors:Ohka S, Matsuda N, Tohyama K, Oda T, Morikawa M, Kuge S, Nomoto A
Journal:J Virol
PubMed ID:15194795
'Poliovirus (PV), when injected intramuscularly into the calf, is incorporated into the sciatic nerve and causes an initial paralysis of the inoculated limb in transgenic mice carrying the human PV receptor (hPVR/CD155) gene. Here, we demonstrated by using an immunoelectron microscope that PV particles exist on vesicle structures in nerve ... More
Characterizing peptide-mediated DNA internalization in human cancer cells.
Authors:Wittrup A, Belting M,
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:19085116
'Cell penetrating peptides (CPPs) are currently used to deliver various macromolecular cargos to intracellular sites of action both in vitro and in vivo on an experimental basis. During the last few years, even more evidence has accumulated indicating that the main route of entry for most CPPs is through endocytosis ... More
Control of cellular physiology by TM9 proteins in yeast and Dictyostelium.
Authors:Froquet R, Cherix N, Birke R, Benghezal M, Cameroni E, Letourneur F, Mösch HU, De Virgilio C, Cosson P,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:18178563
'TM9 proteins constitute a well defined family, characterized by the presence of a large variable extracellular domain and nine putative transmembrane domains. This family is highly conserved throughout evolution and comprises three members in Dictyostelium discoideum and Saccharomyces cerevisiae and four in humans and mice. In Dictyostelium, previous analysis demonstrated ... More
A stepwise dissection of the intracellular fate of cationic cell-penetrating peptides.
Authors:Fischer R, Köhler K, Fotin-Mleczek M, Brock R
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:14707144
'The role of endosomal acidification and retrograde transport for the uptake of the highly basic cell-penetrating peptides penetratin, Tat, and oligoarginine was investigated. The effect of a panel of drugs that interfere with discrete steps of endocytosis or Golgi-mediated transport on uptake and cellular distribution of fluorescein-labeled peptide analogues was ... More
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