DNase I, RNase-free (1 U/μL)

1U/μL에서 1000개 단위로 사용 가능한 Thermo Scientific DNase I, RNase-free는 단일 가닥 DNA와 이중 가닥 DNA를 절단하는 endonuclease입니다. 이 효소는 phosphodiester 결합을 가수분해하여 5'-phosphate 및 3'-OH 기(group)를 갖는 mono 및 oligodeoxyribonucleotide를 생성합니다.

효소 활성은 Ca²⁺에 따라 엄격히 달라지고 Mg²⁺ 또는 Mn²⁺ 이온을 통해 활성화됩니다.

• Mg²⁺가 있으면, DNase I는 통계적 무작위 방식으로 dsDNA의 각 가닥을 독립적으로 절단합니다.
• Mn²⁺가 있으면, 이 효소는 대략 동일한 부위에서 양쪽 DNA 가닥을 절단하여 blunt-end을 갖는 DNA 분절이나 뉴클레오티드 1개 또는 2개의 돌출 말단을 갖는 DNA 분절을 생성합니다.

주요 특징

• 재조합 효소
• 낮은 수준의 RNase로 내재적 비동물성 숙주에서 정제됨

어플리케이션

• DNA-free RNA 조제 
• in vitro 전사 후 템플릿 DNA 제거 
• RT-PCR와 RT-qPCR 전 DNA-free RNA 조제 
• DNA Polymerase I을 함께 사용해 nick-translation으로 DNA 표지 
• DNase I, RNase-free footprinting을 통해 DNA-단백질 상호작용 연구
• 무작위 중첩 DNA 인서트의 라이브러리 구축. Mn²⁺를 함유한 반응 버퍼가 사용됩니다. 

참고

DNase I은 물리적 변성에 민감합니다. 튜브를 뒤집어 부드럽게 혼합합니다. 교반하지 마십시오.