TOPO™ TA Cloning™ Kit for Sequencing, with One Shot™ Mach1™ T1 Phage-Resistant Chemically Competent E. coli

TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing은 염기서열분석을 위해 Taq polymerase 증폭 PCR 산물을 plasmid vector로 직접 삽입하는 효율성 높은 5분 원스텝 클로닝 전략('TOPO™ Cloning')을 제공합니다. 각 키트는 pCR™4 TOPO™ TA vector를 이용하며 이 vector는 sequencing 시에 vector에서 유래되는 염기서열이 최소화 되게 디자인되어 있습니다. 이들 키트에는 선택한 PCR fragement를 갖는 재조합 vector 클로닝과 selection에 필요한 모든 것이 들어있습니다.

• 더 많은 염기서열 획득—표준 염기서열분석 primer를 사용할 때보다 삽입 염기서열이 많고 vector 염기서열이 적습니다.
• 신속성과 용이성—PCR에서 클로닝까지 단 3단계로 이루어지며 작업 시간이 5분 이내입니다.
• 효율성—올바른 삽입으로 최대 95%의 클론을 얻습니다
• 입증된 성능—십여년 동안 4000건 이상 인용된 믿을 수 있는 성능을 제공합니다.

TOPO™ TA Cloning™ Kits 염기서열분석 키트 개요

• Vector:pCR™4-TOPO™ TA Vector
  — 염기서열분석 결과 개선을 위해 최적화된 클로닝 vector
  
  
• 클로닝 방법:TOPO™ TA 클로닝
  — Topoisomerase I 기반, 5분 이내에 3´A overhangs (Taq-증폭)이 있는 PCR 산물을 vector에 결합
  
  
• COMPETENT CELLS:다양한 옵션
  — 일반적인 고효율 bacteriophage T1-내성 세포 또는 fast-growing competent 세포로 키트 선택

pCR™4-TOPO™ TA Vector—염기서열분석에 최적화
pCR™4-TOPO™ TA vector에서 여러 다중 클로닝 부위를 제거하여 염기서열분석 primer 부위와 삽입 부위 간 거리를 33 bp까지 줄였습니다.이는 염기서열분석 반응으로 vector 서열 감소와 삽입 염기서열이 많아짐을 의미합니다. pCR™4-TOPO™ TA vector는 다음과 같은 4가지 공통 염기서열분석 primer 부위를 가지고 있습니다:M13 forward, M13 reverse, T7, T3.키트마다 각 aliquot가 들어있습니다.

pCR™4-TOPO™ TA Clone selection 및 조작
pCR™4-TOPO™ TA vector에는 ampicillin 및 kanamycin 내성 표지자와 LacZα-ccdB 유전자 융합이 들어있어 양성 선택 및 청색⁄백색 스크리닝이 가능합니다. 이 vector는 다중 클로닝 부위가 최소화되어 있지만 여전히 클로닝된 PCR 산물의 간편한 절단을 위한 flanking EcoRI 부위와 염기서열분석 전 nested을 만들기 위한 고유한 Sse8387I 제한 부위를 가지고 있습니다. T7 및 T3 promoter는 in vitro transcription에 이용될 수 있습니다.

편한 TOPO™-기반 클로닝
TOPO™ 클로닝 기술을 사용하여 특정 염기서열을 포함한 PCR primer, PCR 후 절차, vector 준비 또는 기타 시간이 허비되는 DNA 조작 단계가 필요하지 않습니다. PCR 산물을 곧바로 제공된 topoisomerase charged vector에 추가하여 5분 간 반응시킨 후 E. coli competent cells로 transform합니다.

효율적인 클로닝
원하는 insert를 가진 클론의 최대 95%까지 스크리닝하는 클론을 줄여 시간과 비용을 절약할 수 있습니다.이 키트에 사용되는 pCR™2.1-TOPO™ TA vector는 3´A overhangs을 가진 Taq 증폭 PCR 산물의 효과적인 결합을 위해 3´T overhangs와 함께 제공됩니다.

클로닝 표준
클로닝의 경우, TOPO™ 클로닝 기술이 10년 이상 수 천명의 과학자들의 믿음직한 파트너가 되고 있습니다. 빠르고 사용하기 간편한 효율적인 TOPO™ 클로닝이 다양한 어플리케이션의 여러 다른 vector에 적용됩니다.

TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing Kit 옵션
TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing은 여러분의 필요에 따라 다양한 competent cell들과 함께 구매할 수 있습니다.

• 일반 클로닝:TOP10 (Cat. No. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
  
• 고효율 클로닝:TOP10 Electrocomp™ Cells (Cat. No. K4580-01, K4580-40)
• 일반 클로닝 bacteriophage T1 내성:DH5α-T1R (Cat. No. K4595-01, K4595-40)
  
• 빠른 성장:Mach1™-T1R Chemically Competent E. Coli (Cat. No. K4530-20)

염기서열분석을 바로 실시할 수 있는 깨끗한 재조합 plasmid 분리에 사용할 수 있는 PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (Cat. No. K4575-02)가 포함된 키트 버전도 제공합니다.

TOPO™ 제품은 연구용으로만 사용할 수 있습니다. 치료 또는 진단 목적으로 동물이나 사람에게 사용할 수 없습니다.

관련 링크

• 맞춤형 vector 구성 및 클로닝 서비스
• Plasmid DNA 정제 키트 선택 가이드 
  
• PCR 시약, 기기, 공급품