El reactivo de detección/aislamiento de exosomas-estreptavidina, cuando se combina con el anticuerpo primario biotinilado de su elección, permite la purificaciónMás información
Have Questions?
Número de catálogo
Cantidad
10608D
3 mL
Número de catálogo 10608D
Precio (MXN)
-
Cantidad:
3 mL
El reactivo de detección/aislamiento de exosomas-estreptavidina, cuando se combina con el anticuerpo primario biotinilado de su elección, permite la purificación de exosomas (también llamados vesículas extracelulares y cuerpos multivesiculares) a partir de muestras preenriquecidas. Estos exosomas pueden ser detectados usando técnicas como citometría de flujo, microscopia electrónica o Western blotting. Los exosomas deben enriquecerse antes del aislamiento. Esto se puede hacer mediante ultracentrifugación o mediante el uso del reactivo de aislamiento de exosomas totales (a partir de medios de cultivo celular).
• Máxima flexibilidad con la elección del anticuerpo biotinilado • Vea su muestra durante la manipulación • Protocolo fácilmente ampliable • Detecte exosomas a través de citometría de flujo, en menos de 1 hora
El aislamiento y la detección de exosomas ha sido un proceso tedioso, inespecífico y difícil. El reactivo de exosomas-estreptavidina para aislamiento/detección utiliza la conocida tecnología de separación magnética Dynabeads™. Cuando se combina con el anticuerpo biotinilado de su elección, esta tecnología le permite purificar fácilmente exosomas pre-enriquecidos de medios de cultivo celular y luego pasar a detectar los exosomas purificados a través de técnicas como citometría de flujo, microscopia electrónica o Western blotting.
Detección por citometría de flujo Debido a que los exosomas libres solos son demasiado pequeños para ser detectados por citometría de flujo, una de las principales ventajas de emplear la tecnología de separación magnética es que los exosomas purificados y unidos a gránulos pueden visualizarse fácilmente mediante citometría de flujo. Los gránulos Dynabeads™ monodispersos y relativamente grandes (4,5 µm de diámetro) permiten realizar una detección de la dispersión frontal (FSC) y de la dispersión lateral (SSC) clara y definida normalmente en menos de 1 hora.
Vea su muestra Los gránulos Dynabeads™ superparamagnéticos no solo se conocen por su sensibilidad, reproducibilidad y estabilidad, sino que la manipulación magnética también le permite ver su muestra debido al color marrón claro de los gránulos. Cuando se coloca un tubo de muestra en el imán, los exosomas unidos a gránulos son arrastrados hacia un lado del tubo, lo que permite llevar a cabo tareas de separación y purificación sencillas. Además, el volumen de la muestra y de los gránulos se puede ampliar o reducir fácilmente según el tamaño de la muestra o las aplicaciones secuencia abajo.
Una buena mezcla es fundamental Para un correcto aislamiento de exosomas, es importante usar un mezclador que se incline y gire para asegurar que los gránulos no se depositen en el tubo. Evite la rotación de extremo a extremo para volúmenes de muestra pequeños (por ejemplo, 100 µl). Consulte el manual de usuario a continuación para obtener más instrucciones.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de célulaCélulas en cultivo
Línea de productosDynabeads
Cantidad3 mL
Tipo de muestraSobrenadantes de cultivo celular
Especies dianaHumano
Diámetro (métrico)4,5 μm
Tipo de productoReactivo de aislamiento/detección de estreptavidina
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar a una temperatura de entre 2 y 8 °C
Preguntas frecuentes
Can Dynabeads Streptavidin magnetic beads be boiled?
We do not recommend this as streptavidin becomes hydrophobic and aggregates during denaturation.
My Dynabeads magnetic beads are not pelleting well with the magnet. Do you have any suggestions for me?
Please review the following possibilities for why your Dynabeads magnetic beads are not pelleting:
- The solution is too viscous.
- The beads have formed aggregates because of protein-protein interaction.
Try these suggestions:
- Increase separation time (leave tub on magnet for 2-5 minutes)
- Add DNase I to the lysate (~0.01 mg/mL)
- Increase the Tween 20 concentration to ~0.05% of the binding and/or washing buffer.
- Add up to 20 mM beta-merecaptoethanol to the binding and/or wash buffers.
Which streptavidin-conjugated Dynabeads magnetic beads are the right beads for my application?
Which product to choose depends on the properties of your sample, the buffers and solutions applied, as well as the downstream application. In general, all Dynabeads Streptavidin beads can be used in applications involving biotinylated ligands; however, some beads may perform better than others in particular applications due to their characteristics. Dynabeads M-280 Streptavidin beads and Dynabeads MyOne Streptavidin T1 beads are commonly used for protein and nucleic acid applications. Dynabeads M-270 Streptavidin beads and MyOne Streptavidin C1 beads are preferred for nucleic acid diagnostics, specifically with samples that have a high concentration of chaotropic salts, immunoassays involving small biotinylated antigens, and in applications that are not compatible with BSA, as these beads are not blocked with BSA. Dynabeads MyOne Streptavidin beads offer increased binding capacity and slower sedimentation rate, making them ideal for automated applications and when larger amounts of a biotinylated compound or its specific target need to be isolated. Please see the selection guide here ( https://www.thermofisher.com/us/en/home/brands/product-brand/dynal/streptavidin-coupled-dynabeads.html?icid=fr-strep-1).
How do I measure the binding of biotinylated nucleic acid on streptavidin beads?
You can assay the supernatant for unbound nucleic acid to determine the amount of nucleic acid bound to the Dynabeads Streptavidin beads. The concentration of nucleic acids can be checked by measuring the OD or by running them on a gel. Alternatively, the nucleic acids can be labeled radioactively and the concentration measured directly on the beads, or fluorescently and measured in the supernatant.
Can Dynabeads Streptavidin beads be used directly in PCR or real-time PCR reactions?
Our Dynabeads Streptavidin magnetic beads can be used directly in PCR or real-time PCR. However, you would have to empirically optimize the amount of beads to be used per volume of reaction.