Platinum™ GenoType Tsp DNA Polymerase

Name: Platinum™ GenoType Tsp DNA Polymerase
SKU: 11448032

ADN polimerasa Platinum™ GenoType Tsp está diseñada y calificada específicamente para la amplificación de marcadores de repetición de dinucleótidos enMás información

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Número de catálogo	N.º de reacciones
11448032 también denominado 11448-032	2000 reacciones
11448024	400 reacciones

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Número de catálogo 11448032

también denominado 11448-032

Precio (MXN)

N.º de reacciones:

2000 reacciones

ADN polimerasa Platinum™ GenoType Tsp está diseñada y calificada específicamente para la amplificación de marcadores de repetición de dinucleótidos en aplicaciones de genotipado basadas en PCR. La enzima es precomplexada con un inhibidor termolábil que contiene anticuerpos monoclonales para ADN polimerasa Tsp , lo que proporciona un método “de inicio en caliente” automático que mejora la especificidad de la PCR y permite el ensamblaje de la reacción a temperatura ambiente. ADN polimerasa™ Platinum GenoType Tsp :

• Muestra una adición mínima de nucleótido sin molde a productos de PCR
• Sin actividad exonucleasa 5´ y 3´
• Amplifica fragmentos de hasta 500 bp

Aplicación
Amplificación de loci de repetición de dinucleótidos en aplicaciones en las que es deseable la eliminación de la adición de nucleótido sin molde.

Definición de unidad
Una unidad de ADN polimerasa Platinum™ GenoType Tsp se ha determinado funcionalmente como equivalente a una unidad de ADN polimerasa Taq en la amplificación de repeticiones de dinucleótidos utilizando condiciones de reacción estándar de ADN polimerasa Taq. Una unidad de ADN polimerasa Tsp se aproxima a 2,5 unidades de actividad. Una unidad de actividad incorpora 10 nmoles de desoxirribonucleótido en material precipitado por ácido en 30 min a 74 °C en óptimas condiciones de reacción.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Fidelidad (frente a Taq)1 X

Inicio en calienteInicio en caliente integrado

N.º de reacciones2000 reacciones

SobranteRomo

PolimerasaPolimerasa de identificación de genotipos TSP

Cantidad2500 unidades

Formato de reacciónComponentes separados

Condiciones de envíoAprobado para su envío en hielo húmedo o seco

Tamaño (producto final)500 bp o menos

Volumen500 μl

Para utilizar con (aplicación)Hot-start PCR

GC-Rich PCR PerformanceBajo

Velocidad de reacciónEstándar

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Contenido:
• 1 Tubo 500 μde l (5 tsp U/μl)
• 10X tampón PCR (200 mm Tris-HCl, pH 8,4, 500 mm KCl)
• 1 vial de 50 mm MgCl₂

Almacenar a - 20 °C. Estabilidad garantizada durante 6 meses cuando se almacena correctamente.

Preguntas frecuentes

What is the difference between Platinum technology and AccuPrime technology?

With Platinum technology, anti-DNA polymerase antibodies bind to the enzyme until the denaturing step at 94 degrees C, when the antibodies degrade. The polymerase is now active and primer extension can occur. AccuPrime Taq combines Platinum Taq (Taq + Platinum antibodies) with proprietary thermostable AccuPrime accessory proteins. The 10X reaction buffer contains the accessory proteins which enhance specific primer-template hybridization during each cycle of PCR.

Is there anything to prevent AmpliTaq Gold DNA polymerase from extending from the 3’ end of a TaqMan probe in a 5’ nuclease assay?

Yes. There is a phosphate group on the 3' end of all TaqMan probes that prevents such extension.

How does AmpliTaq Gold DNA Polymerase differ from AmpliTaq DNA Polymerase?

AmpliTaq Gold DNA Polymerase is a modified form of AmpliTaq DNA Polymerase that contains a proprietary chemical (or so-called hot start molecule) bound to the enzyme's active site. In order to activate the AmpliTaq Gold DNA Polymerase fully, we recommend an initial activation step of 95 degrees C for 10 min when using GeneAmp 10X PCR Buffer I and/or GeneAmp 10X PCR Buffer II and Mg in one of our thermal cyclers. When using GeneAmp 10X PCR Gold Buffer, activation time can be reduced to 5 minutes. Once activation is complete, you can proceed with your standard PCR cycling program (denaturing, annealing, extension, etc).

Does AmpliTaq Gold DNA Polymerase contain exonuclease (proofreading) activity?

No, AmpliTaq Gold DNA polymerase does not contain proofreading activity, however fidelity in PCR amplifications utilizing this enzyme may be improved. High fidelity can be achieved by: 1. Decreasing the final concentration of each nucleotide to 40-50 uM. 2. Using the lowest MgCl2 concentration possible. 3. Using less enzyme. 4. Decreasing extension times. 5. Using the highest annealing temperature possible. 6. Using as few cycles as possible.

Does the fidelity of AmpliTaq DNA Polymerase change in the presence of base analogs?

The fidelity of this PCR enzyme is affected in two ways. First, AmpliTaq DNA Polymerase typically binds to and incorporates base analogs less efficiently than conventional dNTPs, which means that polymerase activity is lower in reactions that contain base analogs. Second, the analog may pair with more than one conventional complementary template base, so the analog may be incorporated at an increased level compared to conventional dNTPs. For the best fidelity, we recommend that base analogs are included at low concentrations in the reaction.

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