CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit with ROX, for ABI 7000, 7300, 7700, and 7900(HT) instruments
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Invitrogen™

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit with ROX, for ABI 7000, 7300, 7700, and 7900(HT) instruments

El kit de qRT-PCR (transcriptasa inversa-reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa) de un paso CellsDirect™ ofrece resultados de qPCRMás información
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Número de catálogoN.º de reacciones
11754100100 reacciones
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Número de catálogo 11754100
Precio (MXN)
-
N.º de reacciones:
100 reacciones
El kit de qRT-PCR (transcriptasa inversa-reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa) de un paso CellsDirect™ ofrece resultados de qPCR en tiempo real específicos y de gran sensibilidad directamente a partir de las células, sin la necesidad de un paso de purificación del ARN.

Entre las características del kit de qRT-PCR de un paso CellsDirect™ se incluyen las siguientes:

Eficacia: ofrece un importante ahorro de tiempo y costes para un mayor rendimiento
Comodidad: la mezcla de enzimas incluye transcriptasa inversa SuperScript™ III y ADN polimerasa Platinum™ Taq
Sensibilidad: al no requerir un paso de aislamiento del ARN independiente, se aumenta la sensibilidad puesto que se minimiza la pérdida de muestras
Amplio intervalo de detección: detecta objetivos en muestras de entre una sola célula y 10 000 células
Versatilidad: compatible con una amplia variedad de líneas celulares y muestras recogidas por LCM (microdisección por captura láser)

Agilice su flujo de trabajo
En la RT-PCR cuantitativa (qRT-PCR) en tiempo real tradicional, primero se aísla el ARN de las células en un proceso lento que puede conducir a la pérdida de material. Mediante el kit CellsDirect™ One-Step qRT-PCR, se lisan las células y se añade el lisado completo directamente a una reacción de qRT-PCR de un solo paso con un manejo y una pérdida de muestra mínimos.

Ideal para su aplicación qRT-PCR
La tecnología CellsDirect™ está validada para estudios de expresión génica que involucran muestras limitadas, y es adecuada para la validación de reservas de ARNi. Los kits de qRT-PCR de un paso CellsDirect™ son especialmente valiosos para aplicaciones de alto rendimiento, puesto que eliminan los costosos y lentos pasos de purificación de ARN (figura 1). El kit de qRT-PCR de un paso CellsDirect™ también se puede utilizar para detectar objetivos de ADN genómico.

Los kits de qRT-PCR de un paso CellsDirect™ pueden utilizarse en conjunción con sondas de hidrólisis (por ejemplo, primers fluorogénicos TaqMan™ o LUX™).

Nota: Este kit incluye una mezcla de reacción 2X que contiene colorante de referencia ROX™. También está disponible un kit equivalente (11753-500), que contiene un tubo separado de colorante de referencia ROX™.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Para utilizar con (equipo)Sistema 7000, sistema 7300, sistema 7700, sistema 7900HT Fast, sistema 7900HT, Eppendorf™ Mastercycler™ RealPlex, sistemas QuantStudio 3 y 5, sistemas QuantStudio 6 y 7 Pro, sistema QuantStudio 7 Flex, sistema QuantStudio 12k Flex, sistema QuantStudio 6 Flex
N.º de reacciones100 reacciones
Línea de productosCellsDirect, Platinum, SuperScript
Cantidad100 reacciones
Tipo de muestraCélulas
Concentración2X
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)RT-PCR
Velocidad de reacciónrápida o estándar
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• 10 ml de tampón de resuspensión
• 1 ml de potenciador de lisis
• 500 µl de ADNasa I, grado de amplificación (1 U/µl)
• 160 µl 10X de tampón de ADNasa I
• 400 µl 25 mM de EDTA
• 100 µl de mezcla de Taq RT/Platinum™ SuperScript™ III
• 2 × 1,25 ml de mezcla de la reacción 2X con ROX™
• 1 ml 50 mM de MgSO4
• 2 ml de agua tratada con DEPC
• 10 µl de ARN total HeLa (10 ng/µl)
El kit se envía con hielo seco y debe almacenarse a -20 °C

Preguntas frecuentes

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

I am getting amplification in my no-template control (NTC) wells in my qPCR experiment. What is causing this?

There could be several reasons for amplification in a NTC well. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/amplification-no-template-control.html) for more details.