Mezcla maestra SuperScript™ IV VILO™
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Invitrogen™

Mezcla maestra SuperScript™ IV VILO™

La mezcla maestra SuperScript™ IV VILO™ (SSIV VILO) es una mezcla maestra de reacción diseñada para una síntesis del ADNcMás información
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Número de catálogoIncluyeN.º de reacciones
11766500Kit with ezDnase500 reacciones
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Número de catálogo 11766500
Precio (MXN)
-
Incluye:
Kit with ezDnase
N.º de reacciones:
500 reacciones
Pedido a granel o personalizado
La mezcla maestra SuperScript™ IV VILO™ (SSIV VILO) es una mezcla maestra de reacción diseñada para una síntesis del ADNc rápida, sensible y reproducible en aplicaciones de RT-qPCR.

Las características de la mezcla maestra SuperScript IV VILO incluyen:
• Reacciones de RT superrápidas en solo 10 minutos
• Rendimiento superalto: valores de CT más lentos en más de 2 ciclos por delante de todos los demás reactivos de transcripción inversa
• Mezcla maestra de reacción de ADNc de un tubo supercómoda para RT-qPCR de dos pasos
• Reacción muy eficiente incluso con cantidades bajas de moldes y muestras de pureza subóptima

La mezcla maestra SSIV VILO eleva la fiable tecnología VILO al siguiente nivel con la transcriptasa inversa altamente procesiva y termoestable SuperScript IV™ y un tampón aún más optimizado. Estos componentes permiten la síntesis eficiente de ADNc a altas temperaturas y en menos tiempo. La mezcla maestra SSIV VILO proporciona una excelente sensibilidad y rendimiento de ADNc incluso con plantillas escasas o de pureza subóptima. Es su nueva herramienta para una RT-qPCR más eficaz y reproducible.

Para un rendimiento aún mejor, también ofrecemos mezcla maestra SuperScript IV VILO con DNAasa ez. La DNAasa ez acelera aún más el flujo de trabajo de RT-qPCR a través de un paso extremadamente simplificado de eliminación del ADN genómico. Esto reduce considerablemente el tiempo de todo el protocolo de transcripción inversa y reduce la variación posible en la expresión génica debido a la pérdida de ARN o de daños durante el tratamiento convencional con ADNasa.

La mezcla maestra SSIV VILO le ofrece más ADNc en menos tiempo con menos pipeteo, menos variación, una menor inhibición a la reacción, menos interferencia de ADNg y con menor cantidad de muestra que el resto de kits de síntesis de ADNc o mezclas maestras para RT-qPCR.

Fuente
Purificación a partir de E. coli que expresa el gen pol de M-MLV, modificada para aumentar la termoestabilidad, la vida útil media, la capacidad de procesamiento y la resistencia a inhibidores, así como para reducir la actividad de ribonucleasa (ARNasa) H.

Pruebas de rendimiento y calidad
Ensayos de exodesoxirribonucleasa, endodesoxiribonucleasa y ribonucleasa, además de producción y longitud del producto ADNc.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de producto finalPrimera cadena de ADNc
FormatoMezcla maestra
IncluyeKit with ezDnase
N.º de reacciones500 reacciones
Temperatura óptima de reacción50 °C
CantidadEach
Formato de reacciónMaster Mix
Tipo de reactivoTranscripción reversa
Transcriptasa inversaSuperScript IV
Actividad de la ribonucleasa HReducido
Condiciones de envíoHielo seco
Tamaño (producto final)10 kb o menos
Material de partidaARN
TécnicaTranscripción reversa
Concentración5X
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)Real Time PCR (qPCR)
GC-Rich PCR PerformanceAlto
Velocidad de reacción10 min
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• Mezcla maestra SuperScript IV VILO, 2 x 1 ml
• Mezcla maestra de control No RT SuperScript IV VILO, 1 ml
• Enzima DNAasa ez, 500 μl
• Tampón de DNAasa ez (10X), 1 ml
• Agua sin nucleasas, 1,25 ml

Almacenar a una temperatura de entre -5 y -30 °C.

Preguntas frecuentes

Does the TaqMan Cells-to-CT Express Kit contain reagents for the removal of genomic DNA (gDNA)?

Yes, the TaqMan Cells-to-CT Express Kit includes Express ezDNase which can be added to the Express Lysis Solution for removal of gDNA during cell lysis. Express ezDNase is a double-strand specific, heat-labile DNase that will only digest gDNA, making it compatible with the downstream reverse transcription reaction. The enzyme is automatically inactivated during a heat kill step included in the reverse transcription program. To avoid the detection of gDNA, we recommend using a TaqMan Gene Expression Assay specifically designed to span an intron-exon boundary. Such assays are designated with an "_m1" suffix. More information can be found here.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Real-Time PCR and Digital PCR Applications Support Center.

In your SuperScript IV RT protocols, there is no ezDNase inactivation step. Will ezDNase be active to affect RNA or the RT reaction?

The Invitrogen ezDNase Enzyme is a novel DNase that is highly specific for double-stranded DNA. It has no activity on single-stranded DNA in RT reactions (primers or probes), or on RNA. The enzyme is also thermolabile—it is inactivated quickly at temperatures typical for the SuperScript IV RT reaction (e.g., 50 degrees C). The additional inactivation step is therefore not required for most RT-qPCR applications. If the RNA sample is to be used for RT-PCR of fragments ≥3 kb, incubate the sample for 5 minutes at 55 degrees C in the presence of 10 mM DTT to inactivate the enzyme.

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Which SuperScript IV RT format do you recommend for real-time PCR applications?

For RT-qPCR applications we recommend using the Invitrogen SuperScript IV VILO Master Mix (Cat. No. 11756050). The cDNA synthesis reaction setup with this master mix requires fewer pipetting steps and therefore reduces variation in the data. SuperScript IV RT, as a component of the master mix, offers the highest efficiency of cDNA synthesis step compared to competitors’ products.

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Are there any significant changes in the SuperScript IV RT protocol compared to the SuperScript III RT protocol?

The only difference is that the incubation time for the reverse transcription reaction has been reduced to 10 minutes and inactivation time has been reduced to 5 minutes at 85 degrees C.

Can I get comparable cDNA yield and length using the SuperScript IV RT 10-minute protocol as when using the 50-minute protocol for SuperScript III RT?

When compared with SuperScript III RT (and other manufacturers’ RTs) in a synthesis reaction for a 9 kb cDNA, SuperScript IV RT performed successful synthesis in just 10 minutes and did so with comparable (or improved) yield (as shown by gel band density).

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