Anchored Oligo(dT)20 Primer
Anchored Oligo(dT)<sub>20</sub> Primer
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Anchored Oligo(dT)20 Primer

El primer Oligo(dT)20 es una mezcla de primers que consiste en una cadena de 20 restos de ácido desoxitimidílico seguidaMás información
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Número de catálogoCantidad
1257701125 μl
Número de catálogo 12577011
Precio (MXN)
-
Cantidad:
25 μl
El primer Oligo(dT)20 es una mezcla de primers que consiste en una cadena de 20 restos de ácido desoxitimidílico seguida de dV (ya sea dG, dA o dC) y luego de dN (dA, dT, dG o dC) Debido a la secuencia final variable, el primer se ancla al extremo 5´' de la cola de poli(A) del ARNm e impide el cebado dentro de la cola de poli(A). Se recomienda utilizar el primer Oligo(dT)20 anclado en protocolos de etiquetado de ADNc y en la RT-PCR.

Control de calidad: este producto se califica en una reacción de síntesis de ADNc de primera cadena.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Modificación del cebador 5'Fosfato
Para utilizar con (aplicación)Síntesis de la primera cadena del ADNc
Longitud del cebador22-mer
Secuencia del cebador5'd PO4 [(T)20VN]3'
Tipo de productoPrimer
Método de purificaciónPurificado de gel, desalado
Cantidad25 μl
Condiciones de envíoHielo seco
Concentración2.5 μg/μL
PrimerCebador Oligo(dT) anclado
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El primer Oligo(dT)20 se suministra a una concentración de 2,5 µg/µl en agua tratada con DEPC. Almacenar a -20 °C. Se garantiza la estabilidad durante 6 meses si se almacena correctamente.

Preguntas frecuentes

How does the Anchored Oligo(dT)20 Primer differ from standard oligo(dT) primers?

Anchored Oligo(dT) primers have 2 random bases at the 3' end of the stretch of Ts. The first random base is either an A, G, or C, while the second can be any of the 4 standard nucleotides, i.e., A, T, G or C. The use of anchored oligo(dT) primers results in increased cDNA synthesis yields.

For first-strand cDNA synthesis, is it better to use oligo(dT), random hexamers, gene-specific primer (GSP), or combination of these primers?

The choice of primer depends on your experimental goals. Oligo(dT) is recommended when using total RNA for cDNA synthesis. It is the key to full-length cDNA synthesis. Random hexamers give a series of short first-strand products spanning the entire mRNA. Use of random hexamers may be helpful if the PCR fragment is at the 5´ end of a large mRNA. To ensure full-length cDNA synthesis of large transcripts, oligo(dT) can be added along with random hexamers during first-strand synthesis. Gene-specific primers (GSP) for cDNA synthesis may also be used and are required in a few applications such as 5´ RACE and qRT-PCR. For GC-rich templates or templates rich in secondary structure, a GSP may not work as well as priming with oligo dT for first-strand synthesis. If an RT-PCR is problematic, trying different options of oligo dT, random primers and/or GSP for priming first-strand synthesis may resolve the issue. Oligo(dT)20 primer (Cat. No. 18418-020) is recommended for use with SuperScript III Reverse Transcriptase (Cat. no. 18080-044), ThermoScript Reverse Transcriptase (Cat. No. 12236-014), Thermo-X Reverse Trascriptase (Cat. No. 11150-025), and Cloned AMV Reverse Transcriptase (Cat. No. 12328-019).

Reference:
Frohman,M.A., Dush,M.K., Martin, G.R. (1988) Proc. Nat. Acad. Sci USA 85, 8998