Medio de expresión de CHO Freestyle™
Medio de expresión de CHO Freestyle™
Gibco™

Medio de expresión de CHO Freestyle™

El medio de expresión FreeStyle™ CHO es un medio libre de material de origen animal, definido químicamente y libre deMás información
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Número de catálogoCantidad
126510141000 mL
126510226 x 1 L
Número de catálogo 12651014
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1000 mL
El medio de expresión FreeStyle™ CHO es un medio libre de material de origen animal, definido químicamente y libre de proteínas que se ha desarrollado específicamente para apoyar el crecimiento y la transfección de células CHO-S en suspensión sin adaptación.

Este medio requiere suplementación con glutamina 8 mM antes de su uso. Características del medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ CHO:

• Formulación sin hipoxantina ni timidina para su uso con o sin sistemas DHFR
• Capacidad para favorecer el crecimiento en suspensión a alta densidad y la transfección transitoria de células CHO-S
•Formulación libre de origen animal y de proteínas, y definida químicamente
• Uso sencillo como parte del sistema de expresión FreeStyle™ MAX CHO para la producción de proteínas
• Capacidad de ampliación en matraces para dispositivos giratorios y biorreactores

Formulación sin hipoxantina ni timidina para su uso con o sin sistemas DHFR
El medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ CHO se fabrica sin hipoxantina ni timidina para su uso en sistemas de amplificación de la dihidrofolato reductasa (DHFR). Los sistemas que no sean DHFR requieren la adición de suplemento de HT antes de su uso.

Capacidad para favorecer el crecimiento en suspensión a alta densidad y la transfección transitoria de células CHO-S
Las células CHO Gibco™ FreeStyle™ en suspensión se pueden cultivar directamente en el medio de expresión CHO Gibco™ FreeStyle™ sin adaptación. Las células adaptadas a otros medios sin suero disponibles comercialmente se pueden subcultivar directamente en el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ CHO, generalmente sin ninguna otra adaptación. Las células normalmente requieren adaptación de formulaciones que contienen suero. Las células cultivadas en el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ CHO se pueden transfectar utilizando reactivos de transfección basados en lípidos, como reactivo Freestyle™ MAX.

Formulación libre de origen animal y de proteínas, y definida químicamente
El medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ CHO no contiene origen animal ni proteínas y se ha definido químicamente, lo que permite una purificación más sencilla de la proteína de interés. Los medios químicamente definidos Gibco™ no contienen proteínas, hidrolisatos ni componentes de composición desconocida.

Uso sencillo como parte del sistema de expresión FreeStyle™ MAX CHO para la producción de proteínas
El sistema de expresión Freestyle™ MAX CHO es una tecnología innovadora para la producción rápida (ver figura) y de alto rendimiento de proteínas de mamíferos en tamaños de lote de 30 ml y 1 l (ver figura). El sistema de expresión FreeStyle™ MAX CHO combina los medios Gibco™ FreeStyle™, el reactivo FreeStyle™ MAX y células FreeStyle™ CHO-S o FreeStyle™ 293-F en un kit.

Capacidad de ampliación en matraces para dispositivos giratorios y biorreactores
La producción de proteínas con el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ CHO se puede ampliar en matraces para dispositivos giratorios o biorreactores. Se deben optimizar para cada sistema la velocidad apropiada del dispositivo giratorio o del propulsor y la densidad de siembra. En función del diseño y de la velocidad del rotor, puede que sea necesario suplementar el medio Gibco™ FreeStyle™ CHO con Pluronic™ F-68 adicional para evitar el esfuerzo de cizallamiento en el cultivo.

Sistema de fabricación y calidad conforme con las buenas prácticas de fabricación actuales
El medio Gibco™ FreeStyle™ CHO se fabrica en unas instalaciones que cumplen con las buenas prácticas de fabricación actuales y que se encuentran situadas en Grand Island, Nueva York (EE. UU.). Las instalaciones están registradas en la Agencia estadounidense de alimentos y medicamentos (FDA) como fabricante de dispositivos médicos y están certificadas según la norma ISO 13485.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Línea de célulasCélulas CHO-S FreeStyle™, CHO
ClasificaciónDefinido químicamente, sin proteínas, sin suero
Tipo de cultivoCultivos celulares en suspensión
Nivel de endotoxinas≤0,25 EU/mL, ≤ 0,25 EU/mL
FormularioLíquido
GlutaminaSin glutamina
Indicador de rojo de fenolSin rojo fenol
Línea de productosFreestyle, Gibco
Tipo de productoMedio de expresión
Cantidad1000 mL
Nivel de sueroSin suero
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Condiciones de almacenamiento: 2 °C a 8 °C. Proteger de la luz
Condiciones de envío: Ambiente
Vida útil: 12 meses a partir de la fecha de fabricación

Preguntas frecuentes

Can I load the FreeStyle 293 Expression Medium or FreeStyle CHO Expression Medium directly onto a nickel column for His-tagged protein purification?

With FreeStyle 293 Expression Medium, we would recommend harvesting the cells a little earlier to reduce any nonspecific binding by host cell proteins and then filtering the culture supernatant through a 0.2 or 0.1 µM membrane before loading onto the column. On the other hand, FreeStyle CHO Expression Medium contains EDTA that will strip the nickel column. The medium can be subjected to dialysis or buffer exchange prior to loading on the column, or the EDTA can be chelated by adding 1-3 mg/L NiSO4 or NiCl to the supernatant. Iron or cobalt salts can also be used.

Are there any recommendations for preventing or dispersing cell clumps in a suspension culture?

When cells meant to be grown in suspension are grown in static culture, they may form clumps. These clumps will severely limit transfection efficiency and protein expression. It is suggested that FreeStyle 293 cells in FreeStyle media and CHO-S cells in CD-CHO or CHO-SFM are grown in agitated suspension to reduce the appearance of clumps. However, if clumps do form, you can try the following protocol to select for cells that don't form clumps:

- Transfer cells into an appropriate size centrifuge tube that will hold the entire cell suspension.
- Allow cells to sit undisturbed for about 5 minutes. The time can vary depending on the specific cell line. Larger cell clumps will settle to the bottom of the tube.
- Collect cells from the upper portion of the tube to passage into a new flask.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Culture Support Center.

Citations & References (1)

Citations & References
Abstract
Transient transfection factors for high-level recombinant protein production in suspension cultured mammalian cells.
Authors:Liu C, Dalby B, Chen W, Kilzer JM, Chiou HC,
Journal:Mol Biotechnol
PubMed ID:18327552
'The efficient transfection of cloned genes into mammalian cells system plays a critical role in the production of large quantities of recombinant proteins (r-proteins). In order to establish a simple and scaleable transient protein production system, we have used a cationic lipid-based transfection reagent-FreeStyle MAX to study transient transfection in ... More