Uracil-ADN-glicosilasa

El uracil-ADN-glicosilasa (uracil-N-glicosilasa) elimina los residuos de uracilo de la fracción de azúcar del ADN monocatenario y bicatenario sin destruir la cadena principal del fosfodiéster, evitando su uso como objetivo de hibridación o como molde para las ADN polimerasas.La UDG no elimina el uracilo del ARN.

Aplicaciones:Ayuda a eliminar la contaminación por arrastre en PCR, lo que resulta en menos falsos positivos (1,2) para la clonación de fragmentos de PCR (3).

Fuente:Purificado a partir de E. coli que expresa el gen UNG de la E. coli en el plásmido (4,5).

Pruebas de rendimiento y calidad:Ensayos de exonucleasa, endonucleasa y fosfatasa.

Definición de unidad:Una unidad cataliza la liberación de 1 nmol de uracilo libre a partir de ³H-poli(dU) en 1 hora a 37 °C

Condiciones de reacción de la unidad:30 mM de Tris-HCl (pH 8,3), 50 mM de KCl, 5 mM de MgCl₂, 4 μg/ml de ³H-poli(dU)n a 7 x 10 5 cpm/μg y 1 unidad de
enzima en 50 μl durante 10 min. a 37 °C (4).