EZ-Link™ NHS-PEG12-Biotin, No-Weigh™ Format

La NHS-PEG12-biotina Thermo Scientific EZ-Link permite el etiquetado con biotina sencillo y eficaz de anticuerpos, proteínas y cualquier otra macromolécula que contenga aminas primarias. El agente separador de polietilenglicol hidrofílico (PEG) imparte solubilidad en agua que se transfiere a la molécula biotinilada. Por ejemplo, los anticuerpos marcados con NHS-PEG4-biotina muestran menos agregación cuando se almacenan en solución que los anticuerpos marcados con reactivos que solo tienen separadores de hidrocarburos. El etiquetado específico de las proteínas de la superficie celular es otra aplicación útil para la que sirven estos reactivos solubles en agua e impermeables a la membrana.

Los productos Thermo Scientific No-Weigh son reactivos especiales suministrados en un formato previamente indicado. El envase prepesado evita la pérdida de reactividad del reactivo y la contaminación con el tiempo eliminando la apertura y el cierre repetitivos del vial. El formato permite el uso de un vial de reactivo fresco cada vez, lo que elimina la molestia de pesar pequeñas cantidades de reactivos y reduce las preocupaciones sobre la estabilidad del reactivo.

Características de la NHS-PEG12-biotina EZ-Link:

• Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos u otras proteínas para la detección o purificación mediante sondas de estreptavidina o resinas.
• Aminoreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como la cadena lateral de lisinas (K) o el extremo amino de polipéptidos.
• Pegilado: el agente separador contiene un grupo de polietilenglicol (PEG) hidrófilo, de 12 unidades.
• Mejora la solubilidad: la pegilación imparte solubilidad en agua a la molécula biotinilada, lo que ayuda a prevenir la agregación de anticuerpos biotinilados almacenados en la solución.
• Irreversible: forma enlaces de amida permanentes; el agente separador no se puede escindir.
• Alcance muy largo: el agente separador (longitud total añadida a la diana) tiene una longitud de 56 angstroms; esto reduce el impedimento estérico al unirse a moléculas de avidina.

La NHS-PEG12-biotina es un reactivo de NHS-éster de biotinilación largo (56,0 Å), pegilado y soluble en agua ideal para marcar aminas y maximizar la solubilidad de anticuerpos y otras proteínas. El grupo de éster de N-hidroxisuccinimida (NHS) reacciona de forma específica y eficaz con los grupos amino lisina y N-terminal a pH 7-9 para formar enlaces de amida estables. El brazo espaciador de polietilenglicol hidrófilo (PEG) proporciona solubilidad en agua que se transfiere a la molécula biotinilada, lo que reduce la acumulación de proteínas etiquetadas almacenadas en la solución. El agente separador PEG también proporciona al reactivo una conexión larga y flexible para minimizar el obstáculo estérico en la unión a las moléculas de avidina.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, consistencia y rendimiento global posible del producto para las aplicaciones de investigación previstas.

Los ésteres de N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el tipo más popular de reactivo de biotinilación. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como dianas para el etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.