HPDP-biotina EZ-Link™, formato No-Weigh™

La HPDP-biotina Thermo Scientific EZ-Link es un reactivo de marcado de biotina permeable a la membrana que reacciona con los grupos sulfhidrilo (-SH). El enlace de disulfuro resultante entre la molécula de sulfhidrilo objetivo y el grupo de biotina se puede escindir reduciendo los agentes para liberar el grupo de biotina y regenerar la proteína (o el péptido) en su forma original, sin modificar. El marcado con HPDP-biotina resulta práctico cuando se utiliza avidina, estreptavidina o la proteína Thermo Scientific NeutrAvidin inmovilizadas para purificar las moléculas objetivo para reducir el análisis SDS PAGE o de masas; las moléculas biotiniladas capturadas se pueden eluir eficazmente del soporte escindiendo el enlace de disulfuro con ditiotreitol (DTT) u otro agente reductor en lugar de intentar disociar la interacción de alta afinidad entre la avidina y la biotina con ácido fuerte o desnaturalizante.

Los productos Thermo Scientific No-Weigh son reactivos especiales suministrados en un formato previamente indicado. El envase prepesado evita la pérdida de reactividad del reactivo y la contaminación con el tiempo eliminando la apertura y el cierre repetitivos del vial. El formato permite el uso de un vial de reactivo fresco cada vez, lo que elimina la molestia de pesar pequeñas cantidades de reactivos y reduce las preocupaciones sobre la estabilidad del reactivo.

Características de la HPDP-biotina EZ-Link:

• Marcado de proteínas: anticuerpos biotinilados u otras proteínas para uso en métodos proteicos
• Reactiva al tiol: reacciona con sulfhidrilos (-SH), como la cadena lateral de cisteína (C)
• Activada por iridilditiol: lleve a cabo reacciones a pH 6,5-7,5 en tampones como PBS
• Reversible: forma enlaces de disulfuro, que se pueden escindir con DTT u otro agente reductor
• Solubilidad: debe disolverse en DMSO o DMF antes de una dilución posterior en tampones acuosos
• Longitud media: el agente separador mide 29,2 angstroms (longitud total añadida al objetivo)

La HPDP-biotina es un compuesto de piridilditiol-biotina para marcar cisteínas y otras moléculas que contienen grupos sulfhidrilo. Este reactivo reacciona específicamente con tioles reducidos (-SH) en tampones casi neutros para formar enlaces de disulfuro reversibles. La HPDP-biotina es útil para aplicaciones de marcado y purificación por afinidad que requieren la recuperación de la molécula original sin modificar. Por ejemplo, es posible biotinilar una proteína, permitirle que se una a su interactor, capturarla a una columna de estreptavidina y, finalmente, eluirla y recuperarla mediante la reducción del enlace de disulfuro con ditiotreitol.

Elaboramos reactivos de biotina para garantizar los niveles más altos posibles de integridad, uniformidad y rendimiento del producto para aplicaciones de investigación específicas.

Los reactivos de biotinilación difieren en reactividad, longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Existen tres tipos de compuestos reactivos a sulfhidrilo disponibles: maleimido, yodoacetil y piridillditiol. Los reactivos de piridilditiol reaccionan específicamente con grupos sulfhidrilo (-SH) en tampones casi neutros para formar enlaces de disulfuro reversibles.

En las proteínas, los sulfhidrilos existen donde hay residuos de cisteína (C). Los enlaces de disulfuro de cistina deben reducirse para que los grupos de sulfhidrilo estén disponibles para el etiquetado. Los puentes de disulfuro de la región de bisagra de anticuerpos pueden reducirse selectivamente para producir semianticuerpos funcionales que pueden ser etiquetados.

Aplicaciones:
• Recupere los receptores de la superficie celular y escinda la biotina de una columna de avidina inmovilizada