EZ-Link™ Micro NHS-PEG4-Biotinylation Kit
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Thermo Scientific™

EZ-Link™ Micro NHS-PEG4-Biotinylation Kit

El kit Thermo Scientific EZ-Link de biotinilación NHS-PEG4 contiene biotina NHS-PEG4 EZ-Link y todos los reactivos adicionales necesarios para 8Más información
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Número de catálogoCantidad
21955Kit para 8 reacciones
Número de catálogo 21955
Precio (MXN)
-
Cantidad:
Kit para 8 reacciones
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El kit Thermo Scientific EZ-Link de biotinilación NHS-PEG4 contiene biotina NHS-PEG4 EZ-Link y todos los reactivos adicionales necesarios para 8 reacciones de etiquetado de proteínas de 0,05–0,2 mg. La biotina NHS-PEG4 EZ-Link es un reactivo pegilado soluble en agua que sirve para un etiquetado de biotina simple y eficaz de anticuerpos, proteínas y otras macromoléculas primarias que contienen aminas.

Características de la biotina NHS-PEG4 EZ-Link:

Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos u otras proteínas para la detección o purificación mediante resinas o sondas de estreptavidina.
Aminorreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como la cadena lateral de los lisinos (K) o los extremos de aminas de los polipéptidos.
Pegilado: el brazo espaciador contiene un grupo de polietilenglicol (PEG) hidrófilo, de cuatro unidades.
Mejora la solubilidad: la pegilación proporciona solubilidad en agua a la molécula biotinilada, lo que ayuda a evitar la acumulación de anticuerpos biotinilados almacenados en la solución.
Irreversible: forma enlaces de amida permanentes; el brazo espaciador no se puede escindir.
Largo alcance: la longitud del brazo espaciador es de 29 angstroms (longitud total añadida al elemento diana); esto reduce el impedimento estérico al unirse a las moléculas de avidina.

La biotina NHS-PEG4 es un reactivo de biotinilación de éster de NHS largo (29,0 Å), pegilado y soluble en agua ideal para marcar aminas y maximizar la solubilidad de anticuerpos y otras proteínas. El grupo de éster de N-hidroxisuccinimida (NHS) reacciona de forma específica y eficaz con los grupos amino lisina y N-terminal para formar enlaces de amida estables. El agente separador de polietilenglicol hidrófilo (PEG) imparte solubilidad en agua que se transfiere a la molécula biotinilada, reduciendo así la agregación de proteínas etiquetadas almacenadas en la solución. El agente separador PEG también proporciona al reactivo una conexión larga y flexible para minimizar el obstáculo estérico en la unión a las moléculas de avidina.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, consistencia y rendimiento global posible del producto para las aplicaciones de investigación previstas.

Los ésteres de N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el tipo más popular de reactivo de biotinilación. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.

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Kit de biotinilación NHS-PEG4-Biotin EZ-Link™
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
DescripciónKit de biotinilización de NHS-PEG4 Micro EZ-Link
Escala de etiquetado100 μg
Línea de productosEZ-Link
Tipo de productoKit de biotinilación de NHS-PEG4 Micro
CantidadKit para 8 reacciones
Labeling TargetAnticuerpos, Proteínas
Etiqueta o tinteBiotina
SolubilidadAgua
SeparadorPegilado
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Suficiente para: 8 reacciones de etiquetado, cada una con 0,05–0,2 mg de anticuerpos
• 8 NHS-PEG4-Biotin EZ-Link de 2 mg
• 1 paquete PBS (produce 500 ml)
• 10 columnas de centrifugación y desalinización Zeba (7K MWCO), 2 ml

Almacenar microtubos de reactivo de biotina a –20 °C. Almacenar los PBS a temperatura ambiente. Almacenar la columna de desalado a 4 °C. Se envía a temperatura ambiente

Preguntas frecuentes

Which EZ-Link Micro Biotinylation Kit is best for my application?

All four Micro Biotinylation Kits will label proteins for use in many applications. Consider the following guidelines for choosing among the kits:

• Choose the Sulfo-NHS-Biotinylation Kit (Cat. No. 21925) when it is important to minimize the molecular mass contributed by the label.
• Choose the Sulfo-NHS-SS-Biotinylation Kit (Cat. No. 21945) only when the downstream application require cleaving the biotin tag with a reducing agent.
• Choose the NHS-PEG4-Biotinylation Kit (Cat. No. 21955) to maximize protein solubility and prevent protein aggregation during storage.
• Choose the Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit (Cat. No. 21935) for routine purposes when a feature of one of the other reagents is not required. The longer spacer arm offers the possibility of optimizing detection experiments where steric hindrance of biotin binding is an important factor.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How long does it take to biotinylate a protein using the EZ-Link Micro Biotinylation kits?

The entire procedure can be completed in less than 3 hours.

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What types of proteins can be labeled with the EZ-Link Micro Biotinylation kits?

Any molecule containing a primary amine can be labeled. Any protein that has been labeled using the standard biotinylation kits, including antibodies and peptides, also can be labeled with the micro kits.

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Are the biotinylation reagents in the EZ-Link Micro Biotinylation Kits cleavable?

Only the sulfo-NHS-SS-Biotin is cleavable because it has a disulfide bond in its spacer arm, enabling labeled proteins to be cleaved from the biotin group by treatment with reducing agents.

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What are the reaction chemistries of the reagents in the EZ-Link Micro Biotinylation Kits?

The reagents in the Micro kits are amine reactive. NHS esters react with a-amines at the N-termini and the epsilon-amines of lysine side chains at pH 7-9 to form stable amide bonds and the release of NHS.

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Citations & References (3)

Citations & References
Abstract
Mechanism of human antibody-mediated neutralization of Marburg virus.
Authors:Flyak AI, Ilinykh PA, Murin CD, Garron T, Shen X, Fusco ML, Hashiguchi T, Bornholdt ZA, Slaughter JC, Sapparapu G, Klages C, Ksiazek TG, Ward AB, Saphire EO, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:
PubMed ID:25723164
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Authors:Flyak AI, Kuzmina N, Murin CD, Bryan C, Davidson E, Gilchuk P, Gulka CP, Ilinykh PA, Shen X, Huang K, Ramanathan P, Turner H, Fusco ML, Lampley R, Kose N, King H, Sapparapu G, Doranz BJ, Ksiazek TG, Wright DW, Saphire EO, Ward AB, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:Nat Microbiol
PubMed ID:29736037
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Authors:Flyak AI, Shen X, Murin CD, Turner HL, David JA, Fusco ML, Lampley R, Kose N, Ilinykh PA, Kuzmina N, Branchizio A, King H, Brown L, Bryan C, Davidson E, Doranz BJ, Slaughter JC, Sapparapu G, Klages C, Ksiazek TG, Saphire EO, Ward AB, Bukreyev A, Crowe JE
Journal:Cell
PubMed ID:26806128
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