Pierce™ Reversible Protein Stain Kit for PVDF Membranes
Pierce™ Reversible Protein Stain Kit for PVDF Membranes
Thermo Scientific™

Pierce™ Reversible Protein Stain Kit for PVDF Membranes

El kit de tinción reversible de proteínas Pierce Thermo Scientific para membranas PVDF es una alternativa rápida y sensible aMás información
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Número de catálogoCantidad
245851,75 L
Número de catálogo 24585
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1,75 L
Pedido a granel o personalizado
El kit de tinción reversible de proteínas Pierce Thermo Scientific para membranas PVDF es una alternativa rápida y sensible a la tinción Ponceau S para la detección de proteínas en la membrana PVDF después de la transferencia desde geles de poliacrilamida.

Características del kit de tinción reversible de proteínas para membranas PVDF:

Mejor que Ponceau S: más sensible, más fácil de documentar, permanente hasta su eliminación (no se decolora)
Sensible: tinción de proteínas total de alta avidez; el límite inferior de detección es de 25 a 50 ng por banda
Específico: solo detecta proteínas; no se une ni interactúa con otros componentes de la electroforesis o de la muestra
Rápido: tinción en menos de 30 minutos; la tinción se elimina y se revierte por completo en menos de 15 minutos
Estable: los componentes son estables a temperatura ambiente, lo que ahorra espacio en el refrigerador y elimina los pasos de equilibrado

Este kit para tinción de membrana utiliza un método no destructivo, reversible, fiable y sensible para teñir y detectar proteínas en membranas de nitrocelulosa y PVDF. Este kit es una alternativa superior a las tinciones Ponceau S para evaluar la eficacia de la transferencia de proteínas después de SDS-PAGE y antes de la inmunotransferencia. El límite inferior de detección con este método es de 25 a 50 ng por banda (al menos cinco veces más sensible que la tinción Ponceau S tradicional). El protocolo de tinción es simple, rápido y da lugar a bandas de color azul turquesa que no se decoloran y que se fotografían con facilidad para futuras consultas. La tinción se puede invertir fácilmente en menos de 15 minutos. La posterior detección de Western Blot no se ve afectada porque la tinción no altera la proteína y se elimina por completo.

El kit de tinción reversible de proteínas Pierce para membranas PVDF tiene una avidez excelente para una amplia gama de proteínas, lo que resulta en una baja variabilidad entre proteínas y permite que la mayoría de ellas se detecten a niveles muy bajos (25 a 50 ng por banda). La tinción de membranas Pierce es superior a otras tinciones de proteínas disponibles para las membranas de PVDF. Por ejemplo, Ponceau S es menos sensible y da lugar a bandas rojas que se decoloran con facilidad y son difíciles de fotografiar. El colorante Coomassie es una tinción sensible, pero se une de manera permanente a las proteínas y puede interferir con la inmunotransferencia (Western Blotting).

El kit utiliza un colorante que tiene una alta afinidad con la proteína, pero no se une de forma permanente. La tinción tiene interacciones mínimas no específicas con la superficie de la membrana y los reactivos de transferencia de proteínas, y la técnica es compatible con los sistemas de inmunotransferencia (Western Blotting). La membrana tratada no interfiere con la detección quimioluminiscente o cromogénica convencional y utiliza sustratos de HRP y fosfatasa alcalina. Además, la tinción es compatible con el análisis de secuencia N-terminal de proteínas extirpadas y eluidas de la membrana.

Productos relacionados
Kit de tinción reversible de proteínas Pierce™ para membranas de nitrocelulosa
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
DescripciónKit de tinción reversible de proteínas Pierce para membranas de PVDF
Ubicación de detecciónDetección en transferencia
Método de detecciónColorimétrico
Línea de productosPierce
Tipo de productoKit de tinción de proteínas reversibles
Cantidad1,75 L
Molécula dianaproteína
Etiqueta o tinteMezcla patentada
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Suficiente para: 10 membranas de PVDF (8 cm x 8 cm) de minigeles (SDS-PAGE)
• Sensibilizador, 250 ml
• Tinción reversible, 250 ml
• Decoloración, 1 l
• Borrador de manchas, 250 ml

Almacenar a temperatura ambiente.

Preguntas frecuentes

Are SuperBlock Blocking Buffers compatible with the Pierce Reversible Protein Stain Kit for PVDF Membranes (Cat. No. 24585)?

The procedure for the Reversible Protein Stain Kit for PVDF Membranes (Cat. No. 24585) is performed before the membrane is blocked with the blocking buffer, and thus, has no effect on the subsequent blocking.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How can I increase the signal intensity when I am using SuperSignal West Femto Maximum Sensitivity Substrate?

The following are possible causes for weak signal intensity:
- Low level of protein transferred from the gel to the membrane. This is particularly true for high molecular weight proteins. Reversible Protein Stain Kits for Nitrocellulose and PVDF membranes (Cat. Nos. 24580 and 24585, respectively) may be used to stain the bands on the membrane to indicate transfer efficiency.
- Over-diluted primary and secondary antibody probes. We suggest using the recommended dilution for the antibody probes for each substrate. More sensitive substrates will require a more dilute antibody solution.
- Short substrate incubation time. For best results, incubate the membrane for 5-15 min in the SuperSignal substrate.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Electrophoresis and Western Blotting Support Center.

How can I increase the signal intensity when I am using SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate?

The following are possible causes for weak signal intensity:
- Low level of protein transferred from the gel to the membrane. This is particularly true for high molecular weight proteins. Reversible Protein Stain Kits for Nitrocellulose and PVDF membranes (Cat. Nos. 24580 and 24585, respectively) may be used to stain the bands on the membrane to indicate transfer efficiency.
- Over-diluted primary and secondary antibody probes. We suggest using the recommended dilution for the antibody probes for each substrate. More sensitive substrates will require a more dilute antibody solution.
- Short substrate incubation time. For best results, incubate the membrane for 5-15 min in the SuperSignal substrate.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Electrophoresis and Western Blotting Support Center.

I used the MemCode Reversible Protein Stain Kit but the stain is not completely reversible. Why is this?

Here are possible causes and solutions:

- Membrane was allowed to dry before reversing. Keep the membrane wet.
- High protein concentration in the sample. Extend incubation in the Stain Eraser up to 5 minutes. Reduce the protein concentration in the sample.

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I used the MemCode Reversible Protein Stain Kit and my bands are faint or not visible at all. What is going on?

This is likely due to low amounts or no protein present in the sample. Please determine the protein concentration in the original sample.

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Citations & References (1)

Citations & References
Abstract
A high-affinity reversible protein stain for Western blots.
Authors:Antharavally BS, Carter B, Bell PA, Krishna Mallia A
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:15158487
'We describe a reversible staining technique, using MemCode, a reversible protein stain by which proteins can be visualized on nitrocellulose and polyvinylidine fluoride (PVDF) membranes without being permanently fixed to the membrane itself. This allows subsequent immunoblot analysis of the proteins to be performed. The procedure is applicable only to ... More