Thermo Scientific HisPur Cobalt Superflow Agarose es un soporte Superflow 6 quelante tetradentado cargado con cobalto divalente, diseñado para la purificación con alta pureza y a gran escala de proteínas etiquetadas con polihistidina.
Características de HisPur Cobalt Superflow Agarose:
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Sólido: el soporte de microesferas de agarosa al 6 % altamente entrecruzado Superflow tolera flujos lineales de hasta 1200 cm/hora con una lixiviación mínima de cobalto debido al quelante tetradentado
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Alta capacidad: une 20 mg de 6 x His-GFP por ml de resina a un flujo lineal de 150 cm/hora, puede unir más de 30 mg por ml de resina dependiendo del flujo
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Alta pureza: la especificidad de unión del cobalto a la etiqueta de histidina generalmente da lugar a fracciones de elución con menos del 10 % de contaminación de proteínas no específicas
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Compatible: mantiene la función tras la exposición a una amplia variedad de productos químicos y valores de pH
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Rentable: la resina es estable a lo largo de múltiples ciclos de limpieza y reutilización
HisPur Cobalt Superflow Agarose es una resina duradera altamente entrecruzada que no se comprime a los flujos usados en las purificaciones por FPLC a media y gran escala. La resina aguanta bien diversos productos químicos y valores de pH, y es compatible con los procedimientos más frecuentes de limpieza in situ. En comparación con el níquel y otros ligandos utilizados normalmente para cromatografía de afinidad por iones metálicos inmovilizados (IMAC), el cobalto proporciona una mayor especificidad para la purificación de proteínas con etiquetas His. La unión específica de HisPur Cobalt Superflow Agarose da lugar a fracciones de elución más puras, reduciendo la necesidad de pasos extras de limpieza.
Aplicaciones:• Purificación en FPLC a gran escala de proteínas etiquetadas con polihistidina
La cromatografía de afinidad se utiliza a menudo como una estrategia rápida y fácil para la purificación de proteínas recombinantes. Uno de estos métodos de purificación implica la unión de una etiqueta de polihistidina a un catión metálico divalente que se ha coordinado mediante un quelante inmovilizado con un soporte de microesferas. Para la purificación por cromatografía de afinidad por iones metálicos inmovilizados (IMAC) de proteínas etiquetadas con His, el tipo de microesfera, el quelante y el metal inmovilizado influyen sobre la pureza, el rendimiento y el funcionamiento del flujo de estas purificaciones.
El soporte de microesferas de agarosa al 6 % altamente entrecruzada Superflow tolera flujos lineales mayores que las resinas de agarosa que tienen cantidades de entrecruzamientos más bajas. El protocolo de la HisPur Cobalt Superflow Agarose utiliza condiciones de lavado y elución suaves y, típicamente, produce proteínas diana con una pureza superior al 90 %. Las purezas de las proteínas alcanzadas con HisPur Cobalt Superflow Agarose son generalmente más altas que las alcanzadas con resinas de níquel IMAC, lo que hace que la HisPur Cobalt Superflow Agarose sea una herramienta valiosa para los usuarios interesados en purificaciones en un solo paso. Adicionalmente, HisPur Cobalt Superflow Agarose es perfecta para purificaciones a mayor escala que requieren que la resina aguante presiones medias sin compresión.
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Caracterización del rendimiento de HisPur Cobalt Superflow AgaroseProductos relacionadosResina de cobalto HisPur™