Pierce™ Glutathione Superflow Agarose

Thermo Scientific Pierce Glutathione Superflow Agarose se compone de glutatión inmovilizado en microesferas de agarosa al 6 % entrecruzada y diseñada para la purificación a gran escala y con alta pureza de proteínas etiquetadas con GST.

Características de Glutathione Superflow Agarose:

• Alta capacidad de unión dinámica: une 10 mg de GST pura por ml de resina a un flujo lineal de 150 cm/hora; puede unir más de 20 mg/ml a un flujo de 30 cm/hora
• Alta pureza: proporciona una pureza superior al 90 % cuando se utiliza para purificar GST o proteínas de fusión de GST sobreexpresadas a partir de lisados
• Sólido: el soporte de microesferas de agarosa al 6 % altamente entrecruzada Superflow tolera flujos lineales de hasta 1200 cm/hora
• Compatible: mantiene la función tras la exposición a una amplia variedad de productos químicos y valores de pH
• Rentable: la resina es estable a lo largo de múltiples ciclos de limpieza y reutilización

Pierce Glutathione Superflow Agarose es una resina duradera altamente entrecruzada que no se comprime a los flujos requeridos para las purificaciones por FPLC a media y gran escala. La resina aguanta bien diversos productos químicos y valores de pH y es compatible con los procedimientos más frecuentes de limpieza in situ. La unión específica del glutatión a la etiqueta GST da lugar a una pureza y rendimiento elevados en un proceso de purificación en un solo paso.

Aplicaciones:
• Purificación en FPLC de gran a media escala de proteínas etiquetadas con GST

La cromatografía de afinidad se utiliza a menudo como una estrategia rápida y fácil para la purificación de proteínas recombinantes. Uno de los métodos de purificación de proteínas recombinantes más frecuente supone la expresión de una proteína diana como proteína de fusión con la glutatión S-transferasa (GST) y, a continuación, su purificación a través de la interacción fuerte y altamente específica de GST con el glutatión inmovilizado en un soporte de microesferas.

Pierce Glutathione Superflow Agarose permite una purificación de alta pureza de proteínas de fusión con GST usando flujos de medios a altos. El glutatión se ha inmovilizado a través de su grupo sulfhidrilo central mediante un brazo espaciador de 12 átomos en microesferas de agarosa al 6 % altamente entrecruzada Superflow. Para demostrar el rendimiento, se sobreexpresó GST y se purificó a una escala de 48 l. La biomasa (170 g) que contiene la GST sobreexpresada se lisó con 1,7 l de tampón de lisis. El lisado se aclaró mediante centrifugación y se dividió en dos fracciones. A continuación, se purificó la proteína diana con Pierce Glutathione Superflow Agarose y otra resina de la competencia en columnas equivalente de microesferas empaquetadas de 200 ml. El rendimiento, la recuperación y la pureza (> 95 %) totales fueron prácticamente idénticos para ambas resinas.

Más datos del producto
• Caracterización del rendimiento de la agarosa Pierce Glutatione Superflow

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