Tubos de yodación Pierce™

Los tubos de yodación Pierce Thermo Scientific son tubos de ensayo de vidrio de 12 x 75 mm previamente recubiertos en la parte inferior con el reactivo de yodo Pierce, que activa el yodo-125 para los procedimientos de yodación de proteínas o péptidos.

Características de los tubos de yodación:

• Elimina el tedioso paso de revestimiento de superficie del reactivo
• Revestimiento consistente y resistente a las escamas del reactivo de yodación
• Genera una capacidad oxidativa más que suficiente para un protocolo típico
• Permite que las yodaciones se realicen directamente en el tubo o en dos pasos (consulte la siguiente)

Los tubos de yodación prerrecubiertos proporcionan un etiquetado de yodo cómodo y eficaz sin las molestias y los efectos oxidativos perjudiciales que se asocian normalmente con la cloramina T y otros métodos basados en soluciones. Revestir superficies de vidrio para garantizar los experimentos de etiquetado de yodo es difícil de lograr de manera fiable. Estos tubos de vidrio prerrecubiertos eliminan ese difícil paso de preparación para asegurar que los experimentos de yodación sean lo más simples posible.

La yodación implica la introducción de yodo radiactivo en ciertos aminoácidos (generalmente tirosinas) en proteínas y péptidos. La yodación se lleva a cabo en las posiciones orto al grupo hidroxilo en tirosina; puede producirse monosustitución o disustitución. Cuando los puntos yodables, como las tirosinas, están ausentes o tienen una accesibilidad limitada en una proteína, los sitios fenólicos yodables pueden introducirse usando los reactivos Bolton-Hunter (SHPP y Sulfo-SHPP). Algunos entrecruzadores también contienen grupos tirosilo yodables en sus agentes separadores.

125-i o 131-i radiactivos se pueden incorporar en las proteínas por oxidación enzimática o química. En el método de oxidación química, el yoduro de sodio se convierte a su correspondiente forma de yodo reactivo, que luego se incorpora espontáneamente en grupos tirosilo. Aunque son necesarios para la activación del yodo, los reactivos oxidantes son potencialmente dañinos para las proteínas. El reactivo de yodación Pierce (anteriormente conocido como reactivo IODO-GEN) es más suave que la cloramina-T, pero igualmente eficaz para la activación de yodo. La disposición de fase sólida proporcionada por los tubos prerrecubiertos optimiza aún más la yodación y minimiza los efectos dañinos.

Ventajas del método de etiquetado en dos pasos (Chizzonite, 1996):
• Elimina el daño oxidativo a las proteínas al evitar el contacto directo con el reactivo de yodación
• No hay pérdidas de proteína no específica que se une a la superficie del tubo recubierto
• Flexibilidad para realizar la yodación en una amplia variedad de recipientes
• Fácil escalamiento o reducción del protocolo de yodación
• Etiquetado de yodo suave de una gran variedad de proteínas, péptidos o superficies celulares
• Compatibilidad con detergentes comunes