Pierce™ Iodination Beads

Las partículas de yodo Pierce Thermo Scientific son gránulos de poliestireno de 3 mm de diámetro recubiertas con un reactivo oxidante, que proporciona una activación eficaz del yodo-125 para los procedimientos de yodación de proteínas o péptidos.

Características de las partículas de yodación:

• Gránulos de poliestireno derivados, uniformes y no porosos
• Yodaciones de reproducibilidad notable
• Incorporación de hasta el 99 % de yodo-125; recuperación de > 90 % de proteínas etiquetadas
• Funciona en un amplio rango de pH y temperatura
• Yoda en presencia de acidas, detergentes, urea y altas concentraciones de sal
• Permiten la yodación eficiente de las proteínas de la superficie de la membrana celular
• Método más suave para la yodación que la cloramina-T soluble, ya que no hay contacto entre la proteína y el agente oxidante inmovilizado (Markwell, 1982)
•Rápida y fácil de usar…Las yodaciones se completan en 2-15 minutos
• La reacción se para simplemente eliminando las partículas de la mezcla de reacción con pinzas o pipeta pasteur; no se requiere ningún agente reductor para terminar la reacción
• Más control del tiempo de incubación
• Yoda hasta 500 µg de péptidos que contienen tirosina o proteínas/partículas
• Se puede utilizar para yodar cuantitativamente histidina a pH 8,22

Las partículas de yodación revestidas proporcionan un etiquetado práctico y eficaz del yodo sin las molestias y los efectos oxidativos perjudiciales que se asocian normalmente con la cloramina T y otros métodos basados en soluciones. Se pueden añadir una o dos partículas por mililitro de solución proteica y, a continuación, se pueden retirar fácilmente tras la reacción de etiquetado, eliminando por completo el reactivo oxidante de la proteína.

La yodación implica la introducción de yodo radiactivo en ciertos aminoácidos (generalmente tirosinos) en proteínas y péptidos. La yodación se lleva a cabo en las posiciones orto al grupo hidroxilo en tirosina; puede producirse monosustitución o disustitución. Cuando los lugares yodables, como los tirosinos, están ausentes o tienen una accesibilidad limitada en una proteína, los sitios fenólicos yodables pueden ser introducidos usando los reactivos Bolton-Hunter (SHPP y Sulfo-SHPP). Algunos entrecruzadores también contienen grupos tirosilo yodables en sus agentes separadores.

125-i o 131-i radiactivos se pueden incorporar en las proteínas por oxidación enzimática o química. En el método de oxidación química, el yoduro de sodio se convierte a su correspondiente forma de yodo reactivo, que luego se incorpora espontáneamente en grupos tirosilo. Aunque son necesarios para la activación del yodo, los reactivos oxidantes son potencialmente dañinos para las proteínas. La disposición de fase sólida proporcionada por las partículas de yodo (anteriormente denominadas IODO-BEADS) minimiza los efectos perjudiciales.