Kit de secuenciación de ciclos BigDye™ Terminator v1.1
Kit de secuenciación de ciclos BigDye™ Terminator v1.1
Applied Biosystems™

Kit de secuenciación de ciclos BigDye™ Terminator v1.1

Este kit de secuenciación de ciclos BigDye™ Terminator v1.1 está diseñado para aplicaciones especializadas que requieren una identificación de basesMás información
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Número de catálogoCantidad
43374491 mL
4337450100 reacciones
43374511000 reacciones
43374525000 reacciones
Número de catálogo 4337449
Precio (MXN)
-
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Cantidad:
1 mL
Este kit de secuenciación de ciclos BigDye™ Terminator v1.1 está diseñado para aplicaciones especializadas que requieren una identificación de bases óptima adyacente al primer, además de para secuenciar plantillas de productos de PCR cortas con módulos rápidos de electroforesis.

•Mejore la calidad de sus resultados para una amplia variedad de aplicaciones de secuenciación.
•Realice una secuenciación de secuencias y plantillas complejas con más éxito.
• Obtenga lecturas más largas y de mayor calidad con alturas de picos más uniformes y un equilibrio de señal óptimo
• Mejore la productividad y reduzca los costes.

Aborde secuencias difíciles
Con el kit de secuenciación de ciclos BigDye Terminator v1.1 obtendrá una química sólida y altamente flexible para una amplia gama de aplicaciones, incluidas la secuenciación de novo y la resecuenciación.

Obtenga alturas de picos más uniformes y una precisión mejorada
Gracias a la química superior del kit BigDye Terminator v1.1, se generan datos con alturas de picos uniformes y un equilibrio de la señal optimizado, lo que se traduce en lecturas más largas y de mayor calidad.También puede obtener asignaciones de base más precisas para la detección de heterocigotos y mutaciones.

Fácil de integrar en el flujo de trabajo
La química del kit BigDye™ Terminator v.1.1 no requiere software nuevo ni recalibración de instrumentos. Puede integrar fácilmente el kit en su flujo de trabajo con cambios mínimos en sus protocolos.

Para uso exclusivo en investigación.No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Para utilizar con (aplicación)Secuenciación rica en AT (>65 %), secuenciación comparativa (mutaciones germinales: 50:50), secuenciación de productos de PCR cortos, secuenciación rica en GC (>65 %), secuenciación con moldes ricos en GT o moldes difíciles, secuenciación de Novo: bajo a medio rendimiento
Para utilizar con (equipo)Analizador genético 310, analizador genético 3100, analizador genético 3100-Avant, analizador genético 3130xl, analizador genético 3700, ABI PRISM™ 377, GeneAmp 2700, GeneAmp 9600, GeneAmp 9700, GeneAmp™ 2400
Línea de productosTerminador BigDye
Tipo de productoSequencing Buffer
Cantidad1 mL
TécnicaFluorescent Dye Terminator Sequencing
Compatibilidad de plantillasBAC DNA, Plasmid DNA (≤15 Kb), PCR Amplicons, Single Stranded DNA
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Tubo de 200 µl de mezcla de reacción lista BigDye™ Terminator v1.1, tubo de cebador M13 (-21), tubo de ADN de control de pGEM, tubo de 1 ml de tampón de secuenciación 5x. Almacenar el kit de -15 a -25 °C. El tampón de secuenciación BigDye™ se puede almacenar a 4 °C.

Preguntas frecuentes

My DNA sequencing data from the capillary electrophoresis system does not look good. Why?

Capillary electrophoresis systems are complex systems, and troubleshooting data quality can be complicated. The biggest contributors to data quality can be divided into these areas: software, chemistry, and instrument performance.

Troubleshooting software
Ensure that the run module you are using and the dye set match the chemistry and instrument setup. For example, if you are running a multicapillary instrument with a 50 cm array on it, the run module should have a “50” in the name. On a multicapillary system, BigDye Terminator v3.1 should run under Dye Set Z, BigDye Terminator v1.1 chemistry should run in Dye Set E (on the ABI PRISM 310 Genetic Analyzer, both chemistries run under Filter Set E, but require different matrices for analysis). The mobility file (DyeSet/Primer) should have the correct instrument, polymer, and chemistry in the name (e.g. KB_3130_POP7_BDTv.3.mob).

Troubleshooting chemistry and instrument performance
•Sequencing Standards: validate instrument
If Sequencing Standards fail, it suggests a possible electrophoresis problem due to array, polymer, buffer, water, septa, plastics, or maybe a hardware failure such as autosampler, laser, camera, etc.

•pREF-BDT Control DNA: validate cycle sequencing and its clean-up
If the pREF-BDT control reactions fail and the Sequencing Standards pass, look into potential problems with the sequencing kit, thermal cycler, and cleanup procedure.
The pREF-BDT Control DNA and M13 (–21) primers needed to run the reactions are included with each BigDye Terminator Cycle Sequencing Kit

•Custom Internal Controls: validate PCR and its clean-up
If the Sequencing Standards and the pGEM controls passed, then look into potential problems with template quantity and quality, primers, PCR reaction and purification.

For more information on troubleshooting your data, please refer to the DNA Sequencing by Capillary Electrophoresis: Applied Biosystems Chemistry Guide: 3rd Edition, which can be downloaded from this link (https://www.thermofisher.com/us/en/home/global/forms/sanger-sequencing-guide-download-form.html).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.

What are the concentrations of the pREF-BDT and M13 primer controls that come with the BigDye Terminator kits?

The concentration of the pREF-BDT control is 200 ng/µL. The concentration of the M13 primer is 0.8 pmol/µL.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.

How do I determine the annealing temperature for the DNA sequencing thermal cycling conditions?



Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.

Can I purchase the -21 M13 forward control primer from the BigDye Terminator kit separately?

We do not sell the -21 M13 forward control primer separately, however we provide the primer sequence for your convenience: TGTAAAACGACGGCCAGT

Please feel free to use our oligo services to order this primer (https://www.thermofisher.com/us/en/home/products-and-services/product-types/primers-oligos-nucleotides/invitrogen-custom-dna-oligos.html).
We also offer an -21M13 forward primer that is one basepair shorter than that contained in the kit (Cat. No. N52002).

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Can I purchase the pREF-BDT control from the BigDye Terminator kit separately?

We do not sell the pREF-BDT control separately from the DNA sequencing kit.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.