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La ADN polimerasa Biosystems Applied™ AmpliTaq Gold™ 360, cuando se utiliza con un tampón AmpliTaq Gold 360 mejorado, y la opción potenciadora 360 GC, amplifica una amplia gama de contextos de secuencia de ADN. ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ 360 ofrece° una cobertura de 360 para una gama completa de objetivos. * Optimizado para la gama más amplia de objetivos, desde los más cotidianos hasta los más complejos * Inigualable sensibilidad, especificidad y rendimiento *Amplificación sólida de secuencias con gran cantidad de GC con el potenciador 360 GC líder del mercado Consigue los datos de secuenciación de mejor calidad Optimizado para objetivos fáciles y desafiantes Entre los objetivos más complejos están los amplicones formados por dímeros del cebador, ricos en AT y GC, repeticiones de homopolímeros, y amplicones que plantean desafíos de secuenciación. Los amplicones que anteriormente requerían enzimas especializadas y condiciones de reacción pueden ahora amplificarse de forma reproducible con un solo reactivo en condiciones estandarizadas (consulte la figura 1). La comparación competitiva entre más de 40 amplicones distingue a AmpliTaq Gold™ 360 como la enzima de mejor rendimiento, asegurando la mayor probabilidad de éxito para la amplificación de objetivos tanto cotidianos como complejos (consulte la tabla 1). Como se muestra en la figura 1, las regiones ricas en GC están especialmente mal amplificadas con ADN polimerasas de la competencia y la AmpliTaq Gold original, mientras que AmpliTaq Gold 360 proporciona una amplificación sólida y exitosa. Optimizado para PCR de inicio en caliente ADN polimerasa AmpliTaq Gold 360 proporciona la misma especificidad de inicio en caliente que la ADN polimerasa AmpliTaq Gold. Se requiere un paso de incubación a alta temperatura para activar la ADN polimerasa AmpliTaq Gold, que asegura que la enzima activa se genere solo a temperaturas en las que el ADN se desnaturalice completamente y cuando los cebadores no se recuezan. Cuando la polimerasa se añada a la mezcla de reacción a temperatura ambiente, la extensión del primer no ocurre porque la enzima está inactivada. Ningún caso de cebado incorrecto de baja astringencia que pueda producirse se extenderá enzimáticamente ni se amplificará. Por lo tanto, la configuración de PCR se puede realizar a temperatura ambiente sin tener que preocuparse por la extensión en sitios con cebadores incorrectos. La cantidad de ADN polimerasa AmpliTaq Gold 360 aumenta en la reacción lentamente con cada número de ciclo, mientras que la generación del producto específico aumenta sin que se acumulen productos inespecíficos, como los dímeros del cebador. En la figura 1 se muestra una excelente especificidad en una amplia gama de objetivos, y todo ello se resume después en a figura 2. La exquisita especificidad permite un multiplexing y una discriminación alélica más sencillos. La cantidad de ADN polimerasa AmpliTaq Gold 360 aumenta en la reacción lentamente con cada número de ciclo, mientras que la generación del producto específico aumenta sin que se acumulen productos inespecíficos, como los dímeros del cebador. La excelente especificidad en una amplia gama de objetivos se muestra en la figura 1 y se resume en las figuras 2A & B. La exquisita especificidad permite un multiplexing y una discriminación alélica más sencillos. Sensibilidad y longitud de amplificación superiores En comparación con la ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ original, la ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ 360 se purifica mediante un proceso de separación patentado adicional para eliminar las secuencias de ADN bacteriano contaminante de la preparación enzimática. Cuando se utiliza con el tampón 360 Gold mejorado, esta enzima ultrapura, además de sus capacidades de arranque en caliente, reduce los resultados falsos positivos, amplifica las secuencias de objetivos de bajo nivel y promueve la amplificación de una variedad de moldes, incluidos los de genomas bacterianos y humanos. La ADN polimerasa AmpliTaq Gold 360 amplifica eficazmente los objetivos presentes con un número de copias bajo (figura 3), incluso en presencia de altas concentraciones de ADN complejo, lo que la hace especialmente adecuada para la detección de patógenos de copia baja y la amplificación de los objetivos a partir de muestras de ADN degradadas. La extrema pureza de la enzima contribuye a su sensibilidad inigualable. La ADN polimerasa AmpliTaq Gold 360 amplifica de forma eficaz y reproducible secuencias de ADN prolongadas (de hasta 5 kb). La Figura 4 demuestra la amplificación por PCR sólida de ADN plasmídico y humano prolongado.
Nota: Consulte en el manual del usuario o el prospecto del envase la licencia de etiqueta limitada y la información de marca comercial. Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Actividad exonucleasa5' - 3'
Fidelidad (frente a Taq)1 X
FormatoTubo
Características ecológicasEmbalaje sostenible
Inicio en calienteInicio en caliente integrado
N.º de reacciones200 reacciones
Sobrante3'-A
PolimerasaADN polimerasa AmpliTaq Gold 360
Tipo de productoADN polimerasa
Cantidad250 unidades
Formato de reacciónComponentes separados
Condiciones de envíoAprobado para su envío a temperatura ambiente o en hielo húmedo
Tamaño (producto final)5 kb o menos
Material de partidaADN
Concentración5 U/μl
Para utilizar con (aplicación)Hot-start PCR
GC-Rich PCR PerformanceAlto
Velocidad de reacciónEstándar
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• 1 x 250 U ADN polimerasa AmpliTaq Gold 360 • 1 x 1,5 ml tampón AmpliTaq Gold 360, 10X • 1 x 1,5 ml 25 mm de MgCl2 • 1 x 1,5 ml 360 potenciador de GC
Almacenar a una temperatura entre -15 y -25 °C.
Preguntas frecuentes
My oligonucleotide does not appear to be the right length when I checked by gel electrophoresis. Why is this?
Oligos should be run on a polyacrylamide gel containing 7 M urea and loaded with a 50% formamide solution to avoid compressions and secondary structures. Oligos of the same length and different compositions can electrophorese differently. dC's migrate fastest, followed by dA's, dT's, and then dG's. Oligos containing N's tend to run as a blurry band and generally have a problem with secondary structure.
The primers I am using worked for PCR initially, but over time, have stopped working. What happened?
Primers should be aliquoted for single use before PCR set-up. Heat just the aliquoted primers to 94 degrees for 1 min. Quick chill the primer on ice before adding to the PCR reaction. Some primers may anneal to themselves or curl up on themselves.
I don't see a pellet in my oligo tube order. Should I ask for a replacement?
The drying method dries the primer in a thin layer along the sidewalls of the tube instead of the bottom, therefore a pellet is not always visible and should still be ready to use.
There is a ball-shaped pellet at the bottom of my oligo tube. What is this and can I still use my oligo?
If the oligo was overheated, it will appear as a ball-shaped pellet attached to the bottom of the tube. This should not affect the quality of the oligo, and the oligo should be readily soluble in water.
There is a green color in my lyophilized oligo. Can I still use it?
If an oligo appears green in color, this is most likely due to ink falling into the tube. The oligo should still be fully functional. The color can be removed by doing an ethanol precipitation.