BigDye™ Direct Cycle Sequencing Kit
BigDye™ Direct Cycle Sequencing Kit
Applied Biosystems™

BigDye™ Direct Cycle Sequencing Kit

El kit de secuenciación de ciclo BigDye™ Direct, que forma parte de la familia de productos BigDye™, es un kitMás información
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4458687100 reacciones
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445868924 reacciones
Número de catálogo 4458687
Precio (MXN)
8,971.06
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N.º de reacciones:
100 reacciones
Precio (MXN)
8,971.06
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El kit de secuenciación de ciclo BigDye™ Direct, que forma parte de la familia de productos BigDye™, es un kit completo para sus necesidades de PCR y secuenciación.Este innovador kit que permite ahorrar tiempo combina los pasos de secuenciación de ciclo y purificación de PCR, de manera que genera un protocolo simplificado y reduce el tiempo de obtención de resultados.El kit está disponible en tamaños de 24, 100 y 1000 reacciones para adaptarse a sus necesidades de rendimiento de secuenciación.

El kit de secuenciación de ciclo BigDye™ Direct le ofrece las siguientes ventajas:
• Un procedimiento ágil y sencillo
• Realización de todos los pasos de secuenciación en un solo tubo de reacción
• Migración rápida con excelente resolución que comienza en la primera base después de la secuencia de cebadores específicos de genes
• Ahorro de tiempo considerable con respecto a los flujos de trabajo anteriores

Ahorre tiempo y obtenga mejores resultados con un flujo de trabajo único optimizado
Los kits de secuenciación de ciclo BigDye™ Direct se han desarrollado para minimizar la complejidad y el tiempo de manipulación.En comparación con los anteriores procedimientos de secuenciación, que normalmente requieren 5 pasos de procesamiento y duran hasta 8 horas, BigDye™ Direct puede ofrecer resultados en 4 pasos que duran aproximadamente 5 horas, lo que supone un ahorro de tiempo de hasta el 40 % (figura 1).

El kit contiene reactivos para 2 pasos clave del flujo de trabajo de secuenciación:
• Reacción de PCR: al emplear la mezcla maestra de PCR BigDye™ Direct y el cebador de cola M13 (no suministrado), la PCR se realiza en aproximadamente 1 hora.
• La exclusiva reacción de secuenciación de ciclo de purificación de PCR: uso de la mezcla maestra de secuenciación BigDye™ Direct y los cebadores M13 BigDye™ Direct suministrados (el uso del cebador de cola M13 para la reacción de PCR simplifica la configuración de la reacción de secuenciación al emplear 2 cebadores de secuenciación independientemente del producto de PCR analizado).

Un protocolo de un tubo ofrece mayor confianza
Con el kit de secuenciación de ciclo BigDye™ Direct, todos los pasos desde la PCR hasta la carga en el capilar se pueden realizar en el mismo tubo de reacción sin transferir material de un tubo a otro.Al minimizar el número de pasos de manipulación manual, se reduce la posibilidad de variabilidad experimental; por lo tanto, puede confiar más en sus datos.

Una solución integrada ideal para resecuenciación
El kit de secuenciación de ciclo BigDye™ Direct es el primer producto diseñado para mantener condiciones que conducen a la generación de datos de alta calidad a lo largo de toda la lectura con tiempos de ejecución más rápidos en comparación con los flujos de trabajo de secuenciación comunes.Esto se consigue mediante una formulación de reactivos única que permite la lectura de datos de alta resolución más cerca del cebador y el uso del polímero POP-7™ (Figura 2) o el cartucho SeqStudio para obtener tiempos de electroforesis capilar más rápidos.El kit de secuenciación de ciclo BigDye™ Direct está optimizado para funcionar con analizadores genéticos Applied Biosystems™ y el kit de purificación BigDye XTerminator™.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Para utilizar con (aplicación)Secuenciación comparativa (mutaciones germinales: 30:70 heterocigotos), secuenciación comparativa (mutaciones germinales: 50:50), secuenciación rica en GC (>65 %), Secuenciación con moldes ricos en GT o moldes difíciles, secuenciación estándar, cierre del hueco, homopolímero A o T, secuenciación rica en AT (>65 %), secuenciación comparativa (mutaciones germinales: 10:90 heterocigotos)
Para utilizar con (equipo)Analizador genético 3130xl, analizador de ADN 3730xl, GeneAmp 9700, analizador genético SeqStudio, termociclador Veriti, analizador genético 3500, analizador genético 3500xL, analizador de ADN 3730
IncluyeBigDye™ Direct Cycle Sequencing Kit, 100 rxns, 8-well Strips, 96-well Plate, Fluorescent Dye Terminator Sequencing Technique, 3, Use with 130xl Genetic Analyzer, 3500 Genetic Analyzer, 3500xL Genetic Analyzer, 3730 DNA Analyzer, 3730xl DNA Analyzer, GeneAmp™ 9700, Veriti™ Thermal Cycler
N.º de reacciones100 reacciones
Línea de productosBigDye
Tipo de productoKit de secuenciación de ciclo Direct
Cantidad100 reactions
Condiciones de envíoHielo seco
TécnicaSecuenciación por terminador de colorante fluorescente
Compatibilidad de plantillasADN BAC, cósmidos, ADN de lambda, amplicones de PCR (10:90 heterocigotos), ADN plasmídico (≤15 kb), ADN genómico (bacteriano), fásmidos, amplicones de PCR (50:50 heterocigotos), amplicones de PCR (30:70 heterocigotos)
FormatoPlaca de 96 pocillos, tiras de 8 pocillos
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Este kit contiene la mezcla maestra de PCR BigDye™ Direct, la mezcla maestra de secuenciación BigDye™ Direct, el cebador de avance BigDye™ Direct M13, el cebador de revisión BigDye™ Direct M13 y el ADN de control CEPH 1347-02. Almacenar todos los componentes entre –15 y –25 °C. La mezcla maestra de PCR debe almacenarse a 4 °C después del primer uso. Este kit incluye reactivos suficientes para 100 reacciones.

Preguntas frecuentes

What do I do if I have pull-up peaks caused by off-scale data when using the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit?

We recommended that you perform one of the following:

- Reduce the number of PCR cycles by 2–3 cycles
- Re-inject the affected samples
- Optimize injection parameters by reducing time or voltage

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.

Do you have any recommendations for the pre-PCR template DNA concentration in the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit procedure?

The recommended DNA input amount is 4 ng.

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Am I required to use fresh PCR product with the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit, or can I store the PCR reaction before proceeding? What temperature is best for storage?

We always recommended that you use fresh PCR product, but if you need to store it, the amplified PCR reaction can be stored for 16 hours at 4°C or up to 4 weeks at –20°C.

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Can I store samples in BigDye Xterminator solution? If so, what is the optimal temperature, and for how long can I store it?

Yes, after cleaning the sequencing product using the BigDye XTerminator Purification Kit, the end product can be stored up to 10 days at either 4°C or –20°C.

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If I need to pause my experiment in the middle of the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit procedure, how long can I expect my samples to be stable?

The amplified PCR reaction can be stored for 16 hours at 4°C or up to 4 weeks at –20°C. The formulated sequencing reaction mix can be stored at ambient temperature for up to 16 hours. After cycle sequencing but before cleanup, the sequencing product can either be stored for up to 16 hours at 4°C or up to 4 weeks at –20°C. After cleaning the sequencing product up using the BigDye XTerminator Purification Kit, the end product can be stored up to 10 days at either 4°C or –20°C.

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