Protein Thermal Shift™ Starter Kit
Protein Thermal Shift™ Starter Kit

Protein Thermal Shift™ Starter Kit

Los kits Protein Thermal Shift™ de Applied Biosystems™ permiten a los usuarios emplear un colorante que se une a losMás información
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Número de catálogoCantidad
44622631,000 reactions
Número de catálogo 4462263
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1,000 reactions
Los kits Protein Thermal Shift™ de Applied Biosystems™ permiten a los usuarios emplear un colorante que se une a los residuos hidrofóbicos expuestos para controlar la estabilidad térmica de las proteínas mediante un instrumento de PCR en tiempo real con el fin de identificar las condiciones de tampón que estabilizan la proteína de interés o las bibliotecas de detección de ligandos para compuestos que unen la proteína de interés.

Ahorre tiempo y dinero con su cribaje de muestras
Esta solución reduce significativamente el tiempo y el coste asociados con las muestras de detección en relación con los métodos disponibles en la actualidad.Los productos Protein Thermal Shift™ que se ejecutan en nuestros sistemas de PCR en tiempo real permiten a los investigadores realizar una investigación económica y eficaz:

• Seleccione muestras para la estabilidad térmica relativa de la proteína
• Seleccione moléculas (por ejemplo, candidatos a fármacos para moléculas pequeñas, bibliotecas basadas en fragmentos y anticuerpos) para la unión al ligando de proteínas de un modo de alto rendimiento
• Seleccione muestras para detectar cambios de estabilidad después de mutaciones o. modificaciones de puntos de proteínas
• Identifique sistemáticamente las condiciones de tampón adecuadas⁄óptimas para la medición de las interacciones de proteína-ligando, la producción de preparados de proteínas estables, la cristalización de proteínas y el almacenamiento de proteínas
• Prepare rápidamente las proteínas de control de calidad para garantizar la integridad y⁄o pureza de las proteínas

Hay dos kit para elegir
El kit de colorante Protein Thermal Shift™ contiene el colorante y el tampón para realizar experimentos de desplazamiento térmico de proteínas, suficiente para hasta 1000 reacciones.El kit de inicio Protein Thermal Shift™ contiene el kit de colorante más una proteína de control y un ligando de control para experimentos de prueba y solución de problemas.Los componentes del kit de inicio Protein Thermal Shift™ se envasan en dos cajas, una que se almacena a -20 °C y la otra a 4 °C, para obtener la máxima flexibilidad en la formulación de reactivos.

Simplifique el análisis con el software Protein Thermal Shift™
Nuestra solución completa Protein Thermal Shift™ incluye un software de análisis compatible con archivos de ejecución generados a partir de cinco de nuestros sistemas de PCR en tiempo real:Sistema de PCR en tiempo real StepOne™, sistema de PCR en tiempo real StepOnePlus™, sistema de PCR en tiempo real 7500 Fast y sistema de PCR en tiempo real 7 ViiA™.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Para utilizar con (equipo)Sistema 7500 Fast, sistema 7500, sistema StepOne™, sistema StepOnePlus™, sistema 7 ViiA™
Tipo de kitKit de inicio
N.º de reacciones1000 reacciones
Línea de productosProtein Thermal Shift
Cantidad1,000 reactions
Tipo de muestraproteína
Especificidad de dianaSin especificidad
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)Protein Thermal Shift
Método de PCRqPCR
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar el colorante y el tampón entre 18 °C y 25 °C
Almacenar el ligando de control y la proteína de control entre -15 °C y -25 °C.

Preguntas frecuentes

In the Protein Thermal Shift Assay, my replicates have different levels of fluorescence. Is this a problem?

We recommend looking at the spread in Tm, which is more important than the relative fluorescence.

What can I do for a protein that starts out high and then shows a region of melt (flattening of the curve, but no real rise in signal) when performing a Protein Thermal Shift assay?

Some proteins have hydrophobic residues on the surface and the dye binds to these residues. Heating results in unfolding of the protein causing more hydrophobic residues to be exposed. The dyes bind preferentially to these inner locations and so there is a flattening (or a very low rise) of the melt discernable in the melt profile. If there is no positive slope, you will not get a Boltzmann Tm, but you should still get a derivative one. And you can always draw a manual region to get a Tm out. Some proteins will not work with this technology if the hydrophobic residues are already exposed on the surface and the dye binds strongly to it. Please contact Technical Support at techsupport@thermofisher.com about the possibility of other dyes being available for this issue.

I am getting an error message when I try to open my *.eds data file in the Protein Thermal Shift Software? What should I do?

Make sure that you first open the file in the corresponding instrument software, click “Analyze”, and then save the file, before trying to open with the Protein Thermal Shift Software. The file must first be analyzed before it can be used in the Protein Thermal Shift Software.

The software allows for data from different plates to be analyzed together, what should be considered when mixing data from multiple plates?

The software will allow for ≥100 plates per study. We allow the user this flexibility but do not recommend you mix data from multiple plates unless they have validated their results in advance. At a minimum, we recommend researchers include a reference assay in each plate to ensure reproducibility.

Which analysis method should I choose? The Boltzmann fit or the derivative method?

We provide two independent methods because they each have unique things to offer in terms of the analysis. The two-state Boltzmann model has a physical meaning and appeal. It also provides a great way to normalize across noisy undulations in the signal. However, those undulations may be of actual interest and not noise, such as for multi-domain proteins where they may correspond to different domains coming apart in stages. Here the two-state model is inappropriate. The derivative method can help get a temperature at which the local peaks occur. These are two completely unrelated approaches. If the two-state model is a great fit for your data, the results should be in close agreement.