Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v2
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Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v2

El panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 consta de un solo par de cebadores y se utiliza paraMás información
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Número de catálogo 4475346
Precio (MXN)
-
Cantidad:
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El panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 consta de un solo par de cebadores y se utiliza para realizar la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) multiplex para la preparación de bibliotecas de amplicones a partir de «hotspots» genómicos que mutan con frecuencia en genes cancerígenos humanos (descargue la lista de mutaciones y genes diana del panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2). Basado en las mutaciones incluidas en nuestro panel de cáncer Ion AmpliSeq™ original, el último panel listo para su uso Ion AmpliSeq™proporciona:
• Compatibilidad mantenida con las muestras FFPE mientras se amplía el contenido mutacional para una mayor cobertura de genes adicionales y mutaciones «hotspot»
• Cobertura extremadamente uniforme para una secuenciación más eficaz y ahorrar costes
• Diseño mejorado de cebadores con optimización de nuevos conjuntos de cebadores e incluso un menor sesgo de cadena para una mayor confianza en la llamada de variantes exacta
• Detección de variantes mejorada con Torrent Suite Software v3.0 y el complemento Variant Caller en la detección de variantes de alelos bajos junto con una sensibilidad de indeles mejorada

Contenido mutacional adicional para estudios de investigación avanzada del cáncer
El panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 está diseñado para amplificar 207 amplicones que abarcan aproximadamente 2800 mutaciones COSMIC de 50 oncogenes y genes supresores de tumores. Esto incluye las 739 mutaciones en COSMIC de 46 genes incluidas en el primer panel de cáncer Ion AmpliSeq™, junto con mutaciones hotspot añadidas de genes cancerígenos relevantes. A la vez que mantenemos la compatibilidad con muestras de FFPE y cubrimos los mismos objetivos incluidos en el primer panel de cáncer Ion AmpliSeq™, hemos incluido mutaciones adicionales mediante la adición de varios amplicones para hotspots en EZH2, GNA11, GNAQ e IDH2, así como de amplicones ligeramente más largos para otros genes. De esta forma, le ayudaremos a que avance en su investigación sobre el cáncer. El panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 debe utilizarse con el ™Kit de bibliotecas Ion AmpliSeq 2.0.

Secuenciación más eficaz y rentable con cobertura extremadamente uniforme
El diseño de cebadores mejorado en el panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 mejora con la uniformidad de cobertura de la tecnología Ion AmpliSeq™. Con una cobertura más uniforme, se puede conseguir una profundidad mínima en todos los amplicones utilizando mucha menos capacidad de procesamiento de secuenciación. En consecuencia, las muestras adicionales se pueden multiplexar con cualquiera de los chips Ion. Esto se traduce en unos menores costes, una secuenciación más eficaz y una mayor confianza en las nomenclaturas de variaciones. Además, el sesgo de cadena baja en los conjuntos de cebadores del panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 proporciona mayor confianza en las llamadas de variantes exactas.

Sencillez, velocidad y capacidad de ampliación de la tecnología Ion AmpliSeq™
Con la sencillez de la tecnología Ion AmpliSeq™,el panel de puntos hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 permite realizar estudios genéticos de cáncer desde tejidos FFPE con tan solo 10 ng de ADN de entrada para la construcción de bibliotecas dirigidas. El panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 también mantiene el revolucionario flujo de trabajo utilizando equipos de PCR estándar y una reacción de PCR simple para una selección de secuencias objetivo basada en PCR multiplex, sin necesidad de una gran inversión de capital. Además, el panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2 también le permite crear bibliotecas selectivas rápidamente, en aproximadamente 3,5 horas. La capacidad de ampliación y flexibilidad también se conservan con el panel de hotspots de cáncer Ion AmpliSeq™ v2, lo que permite secuenciar una muestra o muestras de códigos de barras de multiplexing mediante cualquiera de los chips Ion.

Detección de variantes mejorada con el software Torrent Suite v3.0
El intuitivo software Torrent Suite y el complemento Variant Caller le permiten pasar del ADN extraído a las llamadas de variantes en tan solo 10 horas. Con las mejoras de los algoritmos, observará una detección de indeles más sensible, junto con una detección SNP más sensible con alelos de frecuencia más baja. A continuación, puede utilizar Ion Reporter™ Software para la anotación de variantes en ensayos de ADN rutinarios para el avance en investigaciones clínicas.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Para utilizar con (aplicación)Secuenciación
Para utilizar con (equipo)Ion PGM™ System
BibliotecasTargeted Sequencing Library
Capacidad multiplex207 amplicons
N.º de reacciones8
Línea de productosIon AmpliSeq
Tipo de productoCancer Hotspot Panel
Cantidad8 Reactions
Tipo de muestraBlood, Blood, Cell Cultures, Clinical Samples, DNA (Genomic), DNA from FFPE, dsDNA, Fine Needle Aspirates (FNA), FFPE, Whole Blood
EspecieHumano
Cantidad de material de partida10 ng DNA
TécnicaAmplicon Sequencing, Post-Light™ Ion Semiconductor Sequencing
Paso del flujo de trabajoTarget Selection
Sequencing TypeGenome and DNA Sequencing
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
1 tube. Store at -30 to -10 °C

Preguntas frecuentes

What is the difference between a DNA fragment library and a DNA amplicon library?

A DNA fragment library is constructed from whole genomic DNA and is commonly used for whole genome resequencing or de novo sequencing. Briefly, the whole genomic DNA is fragmented or sheared, ligated with Ion-specific adapter sequences, and then size-selected for the library fragments of the desired length.

Amplicon libraries are constructed from PCR-amplified DNA fragments and are used for targeted sequencing (e.g., investigating variants at known genomic locations). There are two types of amplicon libraries, short and long.

A short amplicon library contains DNA fragments (targets) with lengths that are compatible with the Ion template preparation kits without any further shearing or fragmentation during library preparation. Additionally, no size-selection step is required, as the amplicons are already within the desired size range.

A long amplicon library contains DNA fragments (targets) with lengths that are longer than those compatible with the Ion template kits and requires further shearing or fragmentation during library preparation. The library preparation protocol for long amplicons is similar to fragment libraries.

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Is the Ion Library Equalizer Kit compatible with Ion Ampliseq libraries?

The Ion Library Equalizer Kit (Cat. No. 4482298) is recommended for use with Ion AmpliSeq libraries and provides an alternative to library quantification methods by using bead-based technology to normalize the final library concentration to ~100 pM.

The Ion Library Equalizer Kit is fast and cost-effective compared to traditional quantification methods; however, it may be not be the right choice for all users. Briefly, the library is amplified with the Ion Equalizer Primers, captured onto Equalizer Beads, and the normalized library is eluted from the beads using a specially formulated Equalizer Elution Buffer. The final library is normalized to ~100 pM, but there is no quality control information (e.g., measured concentration or size distribution) that can be obtained, which is possible if using the recommended library quantification kits: Ion Library Quantitation Kit (qPCR), Qubit dsDNA HS Assay Kit (Qubit 2.0 Fluorometer), or Agilent High Sensitivity DNA Kit (Agilent Bioanalyzer instrument).

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What mutations are targeted in the Ion AmpliSeq Ready-to-Use and Community panels?

Detailed information regarding the variants targeted for each of the panels can be found at www.ampliseq.com. Under the Panels tab, find your panel of interest and press the “Download panel files” buttons. The ZIP archive will contain CSV files that include links to the COSMIC entries for each mutation on the cancer-related panels.

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How do I get started with the Ion AmpliSeq Designer?

Please visit the Ion AmpliSeq Designer website (www.ampliseq.com) and log in with your Thermofisher username and password. Select the “Help” tab to review training videos and documentation, including pipeline details, troubleshooting guides, and frequently asked questions.

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How should I dilute my library for template preparation? How much volume of the diluted library is required?

For template preparation, Ion AmpliSeq libraries are diluted to 100 pM, and the volume required for template preparation will vary depending on the template preparation kit used. Please see the Ion AmpliSeq Library Preparation User Guide for details regarding library dilutions and input into template preparation.

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