RNaseAlert™ QC System v2

El sistema de control de calidad RNaseAlert™ v2 detecta la actividad de la ARNasa en un ensayo fluorimétrico práctico y sensible que proporciona resultados en tiempo real. Esta versión contiene un sustrato que es un ∼60 % más sensible que la versión anterior. El kit contiene suficientes reactivos para ensayos de alto rendimiento de 5 x 96 (480).

Características de RnaseAlert™ QC System v2:

• Detecta tan poco como ∼0,3 pg de ARNasa A con un fluorómetro
• Ensayo sencillo y directo de 30 minutos
• Diseñado para supervisar la actividad de la RNasa en las fracciones de columna durante la purificación de las proteínas
• Utilizar con DNaseAlert™ Sistema de control de calidad para detectar de forma cuantitativa las ARNasas y las ADNasas en la misma muestra

El sistema de control de calidad RNaseAlert™ v2 utiliza un nuevo sustrato ARN más sensible que está marcado con una molécula indicadora fluorescente (fluor) en un extremo y un dispositivo desactivador en el otro. En ausencia de ARNasas, la proximidad física del supresor reduce la fluorescencia del flúor a niveles extremadamente bajos. Sin embargo, cuando hay ARNasas, el sustrato ARN se escinde y se crea una separación espacial entre el flúor y el supresor en la solución. Esto hace que el flúor emita una señal verde brillante cuando una luz de la longitud de onda apropiada hace que se excite.

La fluorescencia se puede detectar fácilmente con un fluorímetro basado en filtro o en monocromador. Dado que la fluorescencia del sustrato RNaseAlert™ aumenta con el tiempo cuando hay actividad de ARNasa, los resultados monitorizados con un fluorímetro pueden evaluarse de forma cinética. La secuencia del sustrato RNaseAlert™ se ha optimizado cuidadosamente para detectar varias ARNasas, incluyendo ARNasa A, RNasa T1, RNasa I, nucleasa microcócica, nucleasa S1, nucleasa de hongo y Benzonase™.

Protocolo rápido y práctico
El procedimiento RNaseAlert™ requiere solo unos minutos para su configuración. El sustrato fluorescente liofilizado se reconstituye en el tubo suministrado y se incuba con la solución de ensayo durante unos minutos. Después de esto, los resultados se leen en un fluorímetro. Las muestras que emiten una fluorescencia notable en comparación con el control negativo están contaminadas y no se deben combinar con el ARN. El agua libre de nucleasas y la ARNasa A se proporcionan para su uso como controles.

Producto acompañante
El sistema de control de calidad RNaseAlert™ v2 es totalmente compatible con el sistema de control de calidad DNaseAlert™. Dado que el sustrato DNaseAlert™ contiene una etiqueta fluorescente que es espectralmente distinta al sustrato RNaseAlert™, los dos kits se pueden utilizar simultáneamente para el análisis cuantitativo en tiempo real de RNasas y DNasas en una sola muestra.