El reactivo de Marfey (FDAA) Pierce de Thermo Scientific reacciona con aminas primarias para permitir la separación y cuantificación rápida y sencilla de isómeros ópticos de aminoácidos mediante cromatografía de fase inversa.

Características del reactivo de Marfey (FDAA):

• Para la derivación precolumna de aminas primarias para la detección por absorbancia UV (λmáx = 340 nm)
• Proporciona sensibilidad de nanomoles en aplicaciones de HPLC típicas con aminoácidos
• Los productos de reacción permiten la separación quiral de aminoácidos D y L
• Tras la HPLC de fase inversa, los derivados tienen un coeficiente de extinción de 3 x 10^4M-1 cm-1

FDAA es 1-fluoro-2-4-dinitrofenilo-5-L-alaninamida, también llamado reactivo de Marfey. El compuesto reacciona a aminas primarias y se utiliza como reactivo de derivación para la detección UV en métodos de cromatografía líquida. El reactivo permite la detección a 340 nm con sensibilidad de nanomoles. Los derivados del FDAA de los aminoácidos D presentan una fuerte unión intramolecular, lo que reduce su polaridad en comparación con los derivados de los aminoácidos L correspondientes. En consecuencia, los derivados D se retienen de forma selectiva en columnas de fase inversa y se eluyen mucho más tarde que los derivados L.

Propiedades del reactivo:
• Nombres alternativos: FDAA, reactivo de Marfey
• Nombre químico: 1-fluoro-2-4-dinitrofenilo-5-L-alaninamida; N2-(5-Fluoro-2,4-dinitrofenilo)-L-alaninamida
• Reactiva a: Aminas primarias (—NH2)
• Fórmula química: C9H9FN4O5
• Número de CAS: 95713-52-3
• Peso molecular: 272,19
• Forma: Cristales o polvo amarillo brillante o naranja, sin partículas

Los derivados del FDAA pueden separarse con un gradiente lineal simple de fosfato/acetonitrilo trietilamina en una columna de cartucho para HPLC Spheri-5 RP-18 HPLC. El FDAA reduce la necesidad de una columna quiral, ya que los derivados D se conservan en la columna y se eluyen después de los derivados L. La derivación es fácil de realizar y completar en 90 minutos, lo que da como resultado derivados estables durante al menos 48 horas.