La resina de proteína A Thermo Scientific Pierce UltraLink es un soporte de poliacrilamida granulada muy duradero en el que se ha inmovilizado la proteína A de unión de IgG para su uso en métodos de purificación de IgG.
Características de la resina de proteína A UltraLink:
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Proteína A inmovilizada: se une específicamente a la IgG de varias especies de mamíferos, sobre todo a la mayoría de los subtipos de IgG de humano y de conejo.
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Capacidad estándar: la carga de la proteína A inmovilizada proporciona una capacidad de unión de aproximadamente 16 mg de IgG humanos por mililitro de resina.
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Resina UltraLink: el soporte a base de acrilamida es una alternativa a los soportes de agarosa entrecruzada en gránulos para aplicaciones de presión media.
La resina de proteína A UltraLink se emplea para la unión y purificación de IgG mediante métodos cromatográficos de flujo de gravedad, con columnas de centrifugación o de presión media. La proteína A es una proteína de unión de anticuerpos que es especialmente útil en la purificación por afinidad de IgG de suero de conejo o humanos.
La proteína A es un componente de la pared celular producido por diversas cepas de
Staphylococcus aureus. La proteína de 46,7 kDa consta de una única cadena polipeptídica que no contiene hidratos de carbono. La proteína A nativa tiene cuatro puntos de unión de gran afinidad (Ka = 10^8/mol) capaces de interactuar con la región Fc de los anticuerpos de la clase IgG de determinadas especies de mamíferos. La función de unión a IgG es óptima a un pH de 8,2; no obstante, también se produce una unión eficaz en tampones neutros y fisiológicos (pH 7,0 a 7,6).
La resina UltraLink es un soporte de poliacrilamida activada con azlactonas, hidrofílico, sin carga, de gran capacidad, muy entrecruzado, rígido y poroso. Este soporte es especialmente útil para técnicas de presión media cuando se utilizan grandes volúmenes de muestras que requieren técnicas de caudal rápido (FPLC) y aplicaciones a gran escala. A diferencia de los soportes de agarosa, el soporte UltraLink no se rompe ni colapsa cuando se somete a caudales elevados que producen una presión superior a 25 psi.
Propiedades de la resina Thermo Scientific UltraLink:• Estabilidad pH del soporte: entre 1 y 13
• Tamaño medio de partícula: Desde 50 hasta 80 micrones
• Límite de exclusión: superior a 2 000 000 de daltons
• Área media de la superficie: superior a 250 m2 por gramo de microesferas
• Volumen de poro medio: superior a 1,2 ml por gramo de microesferas (> 60 % del volumen de microesferas)
• Tamaño de poro: entre 500 y 1000 angstroms (entre 50 y 100 nm)
• Velocidad lineal máxima: 3000 cm por hora
• Presión máxima: 100 psi (6,9 bares), definida como la máxima caída de presión en una columna que la resina puede soportar. (Nota: Es posible que la presión manométrica indicada en el aparato de cromatografía líquida se refiera a la presión total del sistema en lugar de a la caída de presión en la columna).
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