Kit de detección de apoptosis de anexina V eBioscience™
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Kit de detección de apoptosis de anexina V eBioscience™

Los kits utilizan la anexina V conjugada con colorante de viabilidad para etiquetar la fosfatidilserina (PS), un marcador temprano de la apoptosis, en la membrana extracelular.
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Número de catálogoCantidadExcitación/emisiónConjugado
88-8103-7250 pruebasPE/Cy7
88-8005-74200 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
88-8006-7250 pruebas405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8006-74200 pruebas405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8007-74200 pruebas650, 535/660, 617APC, yoduro de propidio
88-8008-7250 pruebasPCP-eFluor 710
88-8008-74200 pruebaPCP-eFluor 710
BMS500FI-100100 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
BMS500FI-2020 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
BMS500FI-300300 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
88-8102-7250 pruebasPE, 7-AAD
88-8102-74200 pruebasPE, 7-AAD
88-8103-74200 pruebasPE/Cy7
BMS500BT-100
también denominado BMS500BT/100
100 pruebasNA, 535/NA, 617Biotina, yoduro de propidio
BMS500BT-20
también denominado BMS500BT/20
20 pruebasNA, 535/NA, 617Biotina, yoduro de propidio
BMS500BT-300
también denominado BMS500BT/300
300 pruebasNA, 535/NA, 617Biotina, yoduro de propidio
88-8005-7250 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
88-8007-7250 pruebas650, 535/660, 617APC, yoduro de propidio
Número de catálogo 88-8103-72
Precio (MXN)
-
Cantidad:
50 pruebas
Conjugado:
PE/Cy7
Distinga fácilmente las células en fase temprana y tardía de la apoptosis con los kits de detección de apoptosis de anexina V eBioscience para el análisis de citometría de flujo. Estos kits utilizan la anexina V conjugada con colorante de viabilidad para etiquetar la fosfatidilserina (PS), un marcador temprano de la apoptosis, en la membrana extracelular. En la apoptosis en fase tardía, a medida que se pierde la integridad celular, tanto la anexina V como el colorante de viabilidad atraviesan y unen la PS en el interior de la membrana plasmática.
Las anexinas son una familia de proteínas de unión a fosfolípidos dependientes del calcio que se unen preferentemente a la fosfatidilserina (PS). En condiciones fisiológicas normales, la PS se encuentra predominantemente en la capa interna de la membrana plasmática. Al inicio de la apoptosis, la PS pierde su distribución asimétrica a través de la bicapa fosfolípida y se traslocaliza a la membrana extracelular marcando las células como objetivos de la fagocitosis. Una vez en la superficie exterior de la membrana, la PS puede detectarse mediante anexina V marcada con fluorescencia de una forma dependiente de calcio.

En la apoptosis en estadio temprano, la membrana plasmática excluye los colorantes de viabilidad como el yoduro de propidio (PI), el 7-AAD o los colorantes de viabilidad con fijación como el eFluor 450. Estas células se tiñen con anexina V, pero no con un colorante de viabilidad, distinguiendo así las células en apoptosis temprana. Sin embargo, en la fase tardía de la apoptosis, la membrana celular pierde la integridad, lo cual permite a la anexina V introducir también PS en el interior de la célula. Se puede utilizar un colorante de viabilidad para distinguir las células en fases tardías de apoptosis y las células necróticas (anexina V y colorante de viabilidad positivo) de las células en fases tempranas de apoptosis (anexina V positiva, colorante de viabilidad negativo).

Las tinciones de viabilidad actuales disponibles con los kits de detección de apoptosis de anexina V eBioscience incluyen FITC, eFluor 450, aloficocianina (APC), ficoeritrina (PE), PE-cianina7 y biotina.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
DescripciónConjunto de detección de apoptosis de anexina V-PE-cianina7 eBioscience
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Contenido del kitContiene:
• Tampón de unión de anexina V (10X), 1 frasco (30 ml)
• Anexina V-PE-cianina7, 1 vial (0,25 ml)

Nota: El tinte de viabilidad con fijación eFluor 450 no está recomendado para su uso con kits de detección de apoptosis de anexina V.
Tipo de productoKit de detección de apoptosis
Cantidad50 pruebas
Condiciones de envíoHielo húmedo
ConjugadoPE/Cy7
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Condiciones de manipulación:
Almacenar a 2-8 °C. Evite las fluctuaciones de temperatura.

Preguntas frecuentes

Can I use eFluor 450-conjugated antibodies with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits?

Yes, eFluor 450-conjugated antibodies are compatible with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits.

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I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

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When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I fix my cells after annexin V staining?

Yes, this is possible. We have established protocols for annexin V staining combined with intracellular staining of lymphocytes that can be found here. The most important step is to leave some binding buffer in the suspension when fixation is started. Compared to staining of live cells, the intensity of the annexin V signal may be somewhat reduced.