Conjunto de tampones de fijación y permeabilización intracelulares eBioscience™

El conjunto de tampones de fijación y permeabilización intracelulares se ha diseñado para su uso en tinción intracelular y análisis mediante citometría de flujo y se ha formulado especialmente para reducir la tinción inespecífica de anticuerpos etiquetados con fluorescencia y aumentar las relaciones señal-ruido de fluorescencia. En el primer paso, las células vivas pueden «fijarse» con el tampón de fijación, que entrecruza las proteínas En el segundo paso, utilizando el tampón de permeabilización, se crean orificios en la membrana que permiten que los anticuerpos de tinción intracelular entren eficazmente en la célula Los pasos de lavado posteriores, las adiciones de anticuerpos y las incubaciones tras la permeabilización celular se deben realizar utilizando el tampón de permeabilización. El paso de lavado final y la resuspensión celular antes de analizar la muestra se realizan con tampón de tinción de citometría de flujo (n.º de cat. 00-4222). Este kit se utiliza normalmente para tinción de proteínas citoplasmáticas y de proteínas de la ruta secretora, como quimiocinas y citocinas No se recomienda para tinción intranuclear. En su lugar, consulte el conjunto de tampones Foxp3/Transcription Factor para la tinción nuclear (n.º de cat. 00-5523) para la tinción nuclear.

Antes del paso de fijación, se recomienda etiquetar las células vivas con uno de los colorantes de viabilidad con fijación (eFluor™ 450, 506, 660, 780, 520 o 455UV) y, a continuación, proceder con la fijación.

Aplicación declarada
Tinción intracelular seguida de análisis citométrico de flujo