Pierce™ HA-Tag Magnetic IP/Co-IP Kit

El kit de marcador magnético HA para IP y Co-IP Thermo Scientific Pierce proporciona los gránulos magnéticos de inmunoafinidad específicos y los reactivos necesarios para llevar a cabo ensayos de inmunoprecipitación de proteínas de fusión HA o experimentos de co-IP con proteínas marcadas con HA como proteína cebo.

Características del kit de marcador magnético HA para IP y Co-IP:

• Gránulos magnéticos específicos: el anticuerpo anti-HA de alta calidad, inmovilizado de forma covalente, permite una alta producción de productos de inmunoprecipitación
• Unión inespecífica baja: los gránulos son estables y están prebloqueados, y los anticuerpos específicos minimizan las uniones inespecíficas
• Elución sin problemas: el tampón de elución de pH bajo garantiza la recuperación de complejos de interacción de proteínas marcadas con HA sin contaminación por lixiviación de anticuerpos
• Cómodo y rápido: el kit completo y las instrucciones fáciles de seguir proporcionan protocolos optimizados para realizar experimentos IP o co-IP en aproximadamente 1 hora
• Versátil: los gránulos magnéticos son compatibles con flujos de trabajo manuales y automáticos (por ejemplo, instrumentos Thermo Scientific KingFisher)

A diferencia de los procedimientos tradicionales de IP basados en la captura con gránulos de proteína A/G, este kit utiliza gránulos magnéticos que contienen anticuerpos anti-HA preinmovilizados. Estos gránulos magnéticos Anti-HA Pierce garantizan la unión específica de complejos de proteínas marcadas con HA a partir de muestras biológicas. Debido a que el anticuerpo se une covalentemente a las microesferas, las dianas IP se eluyen fácilmente y se recuperan sin contaminación por anticuerpos. El kit IP completo incluye los gránulos magnéticos, el tampón de lisis/lavado, el tampón de elución de pH bajo, el tampón de neutralización, el lisado de control positivo de etiqueta HA y el tampón de muestra no reductor para SDS-PAGE. Se proporcionan protocolos para flujos de trabajo de separación magnética manual y automático. Se proporcionan los componentes necesarios para llevar a cabo 40 ensayos IP o de co-IP.

El péptido hemaglutinina (HA) (YPYDVPDYA), derivado de la proteína HA del virus de la gripe humana, es una de las diversas etiquetas de proteínas de fusión que se utilizan en la expresión de proteínas recombinantes. El kit magnético de etiqueta HA-IP/Co-IP Pierce utiliza un anticuerpo específico inmovilizado de alta afinidad (clon 2-2.2.14) para la purificación rápida de proteínas de fusión marcadas con HA a partir de lisados de células bacterianas y de mamífero así como de lisados preparados con los kit de traslación in vitro Human Pierce. Los gránulos se incuban con un lisado de células que contiene proteínas marcadas con HA, se captura la proteína de fusión y, a continuación, los gránulos se lavan y eluyen usando tampón de elución con pH bajo o tampón de la muestra no reductor. El protocolo y los tampones se han optimizado tanto para las reacciones de IP como para las co-IP, que enriquecen en complejos de interacción de proteínas específicos en las muestras eluidas. El anticuerpo anti-HA se puede utilizar para detectar la proteína marcada con HA mediante análisis por Western blot.

Para obtener información sobre la capacidad de unión y otras propiedades de los gránulos magnéticos utilizados en este kit, ver Gránulos magnéticos Anti-HA Pierce (referencia 88836).

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