Solución de lisozima (50 mg/ml)
Solución de lisozima (50 mg/ml)
Thermo Scientific™

Solución de lisozima (50 mg/ml)

La lisozima Thermo Scientific es una enzima que se caracteriza por su capacidad de descomponer la pared celular bacteriana paraMás información
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Número de catálogoCantidad
900820,5 mL
Número de catálogo 90082
Precio (MXN)
-
Cantidad:
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La lisozima Thermo Scientific es una enzima que se caracteriza por su capacidad de descomponer la pared celular bacteriana para mejorar la eficacia de la extracción de ácidos nucleicos o proteínas.

Características de la lisozima, existencias del congelador de glicerol:

• Enzima lítica de la pared celular bacteriana que mejora la purificación de proteínas de inclusión
• Compatible con los reactivos para lisis celular Thermo Scientific Pierce
• Transparente e incolora, sin material insoluble
• pH: 4,7 ±0,2
• ≥50 unidades/ml at 5 µg/ml

La lisozima es una enzima que se utiliza para descomponer las paredes celulares bacterianas para mejorar la eficacia de extracción de ácidos nucleicos o proteínas. Las lisozimas (muramidasas) son una familia de enzimas con actividad antimicrobiana que se caracterizan por la capacidad de dañar la pared celular de las bacterias. La enzima actúa mediante la catalización de la hidrólisis de los enlaces 1,4-beta entre los residuos de ácido N-acetilmurámico y N-acetil D-glucosamina en peptidoglicanos y entre los residuos de N-acetil D-glucosamina en quitodextrinas. Aunque la lisozima de clara de huevo de gallina es muy eficaz para la lisis de bacterias grampositivas, también facilita la lisis de bacterias gramnegativas, como Salmonella y Shigella. La lisis de E. coli se mejora con la adición de la lisozima y las nucleasas como la desoxirribonucleasa (ADNasa) I.

Descripción y características de la lisozima:
La lisozima se genera naturalmente en tejidos animales y vegetales y en secreciones, como las lágrimas, la saliva y las mucosas. Abunda especialmente en la clara de huevo, fuente principal de los suministros comerciales. La lisozima de clara de huevo fue la primera enzima cuya estructura a 2 amstrongs fue resuelta por cristalografía de rayos x. Esta enzima se ha estudiado ampliamente. La lisozima se utiliza con frecuencia en la extracción de proteínas bacterianas. En la purificación de cuerpos de inclusión, la lisozima se añade para digerir el material residual celular y liberar los cuerpos de inclusión. La enzima se elimina fácilmente con otras proteínas durante la purificación por afinidad no específica de etiquetas de fusión de la proteína recombinante diana en la formación del cuerpo de inclusión.

• Función enzimática: Cataliza la hidrólisis de los enlaces 1,4-β entre los residuos de ácido N-acetilmurámico y N-acetil D-glucosamina en peptidoglicanos y entre los residuos de N-acetil D-glucosamina en quitodextrinas
• Peso molecular: 14,388 kDa
• Coeficiente de extinción: ∼ 26,4 a 280 nm
• Punto isoeléctrico: pH 11,0
• Definición de la unidad: 1 unidad es la cantidad de enzima necesaria para catalizar una disminución de la absorbancia a 450 nm de 0,001/min a 25 grados con un pH 6,24 en una cubeta de 1 cm debido a que la lisis utiliza una suspensión de ∼ 0,25 mg/ml de Micrococcus luteus.

Productos relacionados
Lisozima
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
EnzimaLisozima (muramidasa)
Cantidad0,5 mL
Tipo de reactivoEnzimas para lisis celular
FormularioLíquido
Tipo de productoSolución de lisado
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar por debajo de los -20 °C

Preguntas frecuentes

How can I measure the amount of protein I have extracted with B-PER reagent?

The Thermo Scientific BCA Protein Assay Kit (Cat. No. 23225, 23227) works very well to detect proteins extracted with B-PER Reagent. The Coomassie Plus Protein Assay (Cat. No. 23236) can be used with B-PER Reagent Protein extractions, however when using B-PER with PBS or B-PER II reagents, dilute the protein preparation two-to-four fold before assaying with Coomassie Plus or Prepare sample with Compat-Able Protein Assay Preparation Reagent Set (Cat. No. 23215). Finally, Thermo Scientific 660 nm Assay Kit (Cat. No. 22662) can also be used if protein extract is diluted two fold.

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How do I process bacterial samples with EasyPep MS Sample Prep kits?

Add 1-2 µL of 50 mg/mL Lysozyme Solution (Cat. No. 90082) to 200 µL of the EasyPep lysis buffer provided in the kit and proceed with the sample prep. Add 200 µL of the prepared lysis solution to 5 X 10E8 bacterial cells (E. coli cells) (OD600 equal to 1, corresponding to 1 X 10E8 CFUs). Lyse by pipetting the sample repeatedly and centrifuge at 16,000 x g for 5 mins. Alternatively, E. coli cells can be lysed in lysis buffer using bead beating or sonication instead of lysozyme. After lysis, dilute samples to 1 mg/mL using lysis buffer, proceed with the EasyPep protocol for reduction, alkylation, digestion, and clean up as described in the product manual.

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Can you explain how the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent lyses cells?

The B-PER Reagent solution contains a proprietary, mild, non-ionic detergent in 20 mM Tris-HCl, pH 7.5. It effectively disrupts cells and solubilizes native or recombinant proteins without denaturation. The reagent creates holes in the cell membrane that will leak out cytosolic proteins. The sample may become very viscous when the bacterial chromosome is released. We recommend adding DNAse I (Cat. No. 90083) to the reagent to reduce viscosity. For better lysis efficiency and if there are inclusion bodies, we recommend adding Lysozyme (Cat. No. 90082) to the reagent. Alternatively, you may purchase the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent with Enzymes Kit (Cat. No. 90078 or 90079) that includes the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent, DNase I, and Lysozyme.

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Citations & References (2)

Citations & References
Abstract
Next-generation sequencing of whole saliva from patients with primary Sjögren's syndrome and non-Sjögren's sicca reveals comparable salivary microbiota.
Authors:Sembler-Møller ML,Belstrøm D,Locht H,Enevold C,Pedersen AML
Journal:Journal of oral microbiology
PubMed ID:31497258
Objective: To characterize and compare the salivary microbiota in patients with pSS and patients with non-Sjögren's-related sicca, and to relate the findings to their oral health status and saliva flow rates. Methods: Twenty-four patients fulfilled the 2016 classification criteria for pSS and 34 did not (non-pSS). A clinical examination included ... More
Porphyromonas gingivalis in saliva associates with chronic and aggressive periodontitis.
Authors:Damgaard C,Danielsen AK,Enevold C,Massarenti L,Nielsen CH,Holmstrup P,Belstrøm D
Journal:Journal of oral microbiology
PubMed ID:31489129
Objective: To characterize the salivary microbiota of patients with aggressive periodontitis, patients with chronica periodontitis and orally healthy individuals. Methods: A total of 81 unstimulated saliva samples from aggressive periodontitis patients (n = 31), chronic periodontitis patients (n = 25), and orally healthy controls (n = 25) were examined. The ... More