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Invitrogen™
Éster de NHS Alexa Fluor™ 430 (éster de succinimidilo)
Alexa Fluor™ 430 es un colorante con fluorescencia verde brillante. El tinte Alexa Fluor™ 430, empleado para la generación estableMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| A10169 | 5 mg |
Número de catálogo A10169
Precio (MXN)
-
Cantidad:
5 mg
Alexa Fluor™ 430 es un colorante con fluorescencia verde brillante. El tinte Alexa Fluor™ 430, empleado para la generación estable de señales para la obtención de imágenes en citometría de flujo, es soluble en agua e insensible al pH entre pH 4 y pH 10. Además de las formulaciones de colorante reactivo, ofrecemos el colorante Alexa Fluor™ 430 conjugado con una serie de anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación optimizados para la detección y el marcaje celular.
El éster NHS (o succinimidilo éster) de Alexa Fluor™ 430 es la herramienta más popular para conjugar este colorante con una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS se pueden usar para etiquetar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. El conjugado Alexa Fluor™ obtenido mostrará una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre este éster de NHS AlexaFluor™:
Etiqueta de fluoróforo: Tinte Alexa Fluor™ 430
Grupo reactivo: Éster NHS
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 430/545 nm
Coeficiente de extinción: 15 000 cm-1M-1
Peso molecular: 701,8
Reacción de conjugación habitual
Puede conjugar agentes aminorreactivos con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Puede ampliar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser al menos de 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos y emplear tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) (D12345) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1–0,2 M, pH 8,3, a temperatura ambiente durante una hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del tinte Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
El éster NHS (o succinimidilo éster) de Alexa Fluor™ 430 es la herramienta más popular para conjugar este colorante con una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS se pueden usar para etiquetar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. El conjugado Alexa Fluor™ obtenido mostrará una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre este éster de NHS AlexaFluor™:
Etiqueta de fluoróforo: Tinte Alexa Fluor™ 430
Grupo reactivo: Éster NHS
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 430/545 nm
Coeficiente de extinción: 15 000 cm-1M-1
Peso molecular: 701,8
Reacción de conjugación habitual
Puede conjugar agentes aminorreactivos con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Puede ampliar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser al menos de 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos y emplear tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) (D12345) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1–0,2 M, pH 8,3, a temperatura ambiente durante una hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del tinte Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Reactividad químicaAmina
Etiqueta o tinteAlexa Fluor™ 430
Cantidad5 mg
Fracción reactivaEster activo, succinimidilo éster
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de etiquetaColorantes Alexa Fluor
Línea de productosAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.
Preguntas frecuentes
I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?
I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?
Citations & References (9)
Citations & References
Abstract
Small heat shock protein Hsp16.3 modulates its chaperone activity by adjusting the rate of oligomeric dissociation.
Journal:Biochem Biophys Res Commun
PubMed ID:14521926
'Small heat shock proteins usually exist as oligomers and appear to undergo dynamic dissociation/reassociation, with oligomeric dissociation being a prerequisite for their chaperone activities. However, contradictory cases were also reported that chaperone activities could be enhanced with no change or even increase in oligomeric sizes. Using Hsp16.3 as a model
Detection and quantification of biotinylated proteins using the Storm 840 Optical Scanner.
Journal:J Nutr Biochem
PubMed ID:12770643
'The use of the avidin-biotin interaction is becoming an increasingly common method for the detection of proteins. The use of fluorescence detection with avidin-biotin systems has the potential to greatly increase both the sensitivity and linearity of this type of analysis. In this report, three fluorescent systems were tested for
In vivo blockade of the programmed cell death-1 pathway using soluble recombinant PD-1-Fc enhances CD4+ and CD8+ T cell responses but has limited clinical benefit.
Journal:
PubMed ID:24227774
'The programmed cell death-1 (PD-1)/programmed cell death ligand-1 pathway has been shown to limit cell-mediated effector functions during chronic viral infections impeding clearance of pathogens. As a strategy to reverse this exhaustion and increase T cell polyfunctionality, PD-1 ligands were blocked in vivo using a recombinant macaque PD-1 fused to
Platelets support a protective immune response to LCMV by preventing splenic necrosis.
Journal:Blood
PubMed ID:22566603
Severe arenaviral infections in humans are characterized by clinical findings common to other viral hemorrhagic fevers (VHFs), including thrombocytopenia, leukopenia, skin and internal organ hemorrhages, high viral replication, splenic necrosis, and death. Host responses, rather than direct damage by the arenaviral replication, account for most of the observed pathology, but
Plasmacytoid dendritic cells are recruited to the colorectum and contribute to immune activation during pathogenic SIV infection in rhesus macaques.
Journal:Blood
PubMed ID:21693759
In SIV/HIV infection, the gastrointestinal tissue dominates as an important site because of the impact of massive mucosal CD4 depletion and immune activation-induced tissue pathology. Unlike AIDS-susceptible rhesus macaques, natural hosts do not progress to AIDS and resolve immune activation earlier. Here, we examine the role of dendritic cells (DCs)