PichiaPink™ Media Kit

El kit de medios PichiaPink™ es un juego de prácticos sobres de medios preempaquetados para su uso con el sistemaMás información

Número de catálogo	Cantidad
A11156	1 kit

Número de catálogo A11156

Precio (MXN)

Cantidad:

1 kit

El kit de medios PichiaPink™ es un juego de prácticos sobres de medios preempaquetados para su uso con el sistema de expresión de levadura PichiaPink™. El kit de medios PichiaPink™ contiene los medios necesarios para cultivar cepas de Pichia pastoris a partir de material congelado para obtener cultivos listos para su transformación y selección. El kit de medios PichiaPink™ es una manera fácil de empezar a usar Pichia pastoris para la producción de proteínas. Utilice el kit de medios PichiaPink™ para recargar sus kits del sistema de expresión de levadura PichiaPink™.

El kit de medios PichiaPink™ viene con sobres preempaquetados para las siguientes soluciones. Cada sobre produce un litro de solución. Los sobres de medios deben mantenerse secas y almacenarse a temperatura ambiente.

Medios	Uso	Sobres
YP + Agar	Para placas para sembrar colonias por estría	Dos sobres
YP	Para cultivos líquidos	Dos sobres
PAD (Pichia adenine Dropout) + agar	Para placas para cultivar recombinantes PichiaPink™	Dos sobres
YP + sorbital (YPS)	Para la recuperación de transformantes PichiaPink™	Dos sobres
Dextrosa	Para añadir a YP y YP + agar	1 bolsa

¿Por qué elegir el sistema de expresión de levadura PichiaPink™?
El sistema de expresión de levadura PichiaPink™ está basado en la levadura Pichia pastoris. Entre las ventajas de la Pichia pastoris se incluyen un rápido crecimiento, antecedentes genéticos bien definidos, una formulación de medios sencilla y un fácil manejo. Durante más de 30 años, la Pichia pastoris se ha utilizado en laboratorios de todo el mundo para producir cientos de proteínas diferentes de muchas especies, incluida la humana (referencias 1 y 2). El sistema de expresión de levadura PichiaPink™ permite producir proteínas de forma práctica y rentable desde pequeñas a grandes escalas.

Para obtener información sobre cómo obtener una licencia de uso comercial para el sistema de expresión de levadura PichiaPink™, consulte la disponibilidad en outlicensing@lifetech.com.

Para uso exclusivo en investigación. No está indicado para uso terapéutico ni diagnóstico animal o humano.

Enlaces relacionados
• Obtenga más información sobre el sistema de expresión de levaduras PichiaPink™.
• Obtenga más información sobre nuestros sistemas de expresión de proteínas.

Referencias

1. Cereghino JL, Cregg JM. Heterologous protein expression in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66. [PubMed]
2. Cereghino GP, Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM. Production of recombinant proteins in fermenter cultures of the yeast Pichia pastoris. Curr Opin Biotechnol. 2002 Aug; 13 (4): 329-32. [PubMed]

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Tipo de producto finalMedio líquido, placas de agar

Para utilizar con (equipo)A11150, A11151, A11152, A11153

FormatoKit

Tipo de mediosPAD, YP, YPS

Método de preparaciónAutoclave

Cantidad1 kit

Condiciones de envíoTemperatura ambiente

Designaciones de cepasPichiaPink™

FormularioPolvo

Clase de organismo dianaP. pastoris

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Contiene sobres suficientes para hacer cuatro medios básicos:

Dos sobres de agar PAD, dos sobres de YPDS, dos sobres de YPD, dos sobres de agar YPD, un sobre de dextrosa

Almacenar a temperatura ambiente

Preguntas frecuentes

I inoculated 25 mL of MGY with one colony and grew it overnight, but the OD is not 2-6 as mentioned in your manual. Is there something wrong?

This is likely due to low inoculum. We recommend having a starter culture to use, as it is more accurate than using a colony. You can use the doubling time to calculate the starting OD. In YPD, the doubling time is about 1.5 hours. In MGY, the doubling time is going to be about 3 hours.

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When selecting for blasticidin-resistant transformants in the X-33 strain using pPIC6/pPIC6α vectors, why do I get large and small colonies on YPD plates containing 300 µg/ml blasticidin?

Generally, large colonies represent transformants containing pPIC6/pPIC6α integrants, while small colonies represent transformants containing pPIC6/pPIC6α non-integrants. These non-integrants have transduced the pPIC6/pPIC6α plasmid, and therefore, exhibit a low level of blasticidin resistance in the initial selection process. Upon subsequent screening, these non-integrant transformants do not retain blasticidin resistance.

When choosing a blasticidin-resistant transformant for your expression studies, we recommend that you pick blasticidin-resistant colonies from the initial transformation plate and streak them on a second YPD plate containing the appropriate concentration of blasticidin. Select transformants that remain blasticidin-resistant for further studies.

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My transformation is not working. Do you have any suggestions?

Here are some suggestinos:

- Make sure that you have harvested cells during log-phase growth (OD <1.0 generally).
- If electroporation is being used, see the electroporator manual for suggested conditions. Vary electroporation parameters if necessary.
- Use more DNA.
- Use freshly made competent cells.
- If the LiCl transformation method is being used, try boiling the carrier DNA.

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My spheroplasting of Pichia worked twice, but hasn't worked since. The OD of the culture simply does not drop.

Here are some things to consider:

- If the OD of cells that are used is too high, they will not spheroplast. Do not overgrow cells.
- Do not use old cells and make sure that they are in log phase of growth.
- Make sure to mix zymolyase well before using. Zymolyase is more of a suspension than a solution.
- Make the PEG solution fresh each time and check the pH.

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Is there a functional difference between using peptone or tryptone for Pichia media?

Bacto-Tryptone and Bacto-Peptone are two different and specific types of peptones. Bacto-Tryptone is a slightly poorer nitrogen source, and more of the nitrogen is provided by tyrosine and tryptophan. When comparing the two as components of media for Pichia growth, growth curves may differ slightly, but there should be only minor differences between the two. In Pichia media formulations that include Yeast Nitrogen Base as a primary source of nitrogen, such as BMGY and BMMY, there should be very little or no difference.

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