Enzima CorrectASE™
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Enzima CorrectASE™

La enzima CorrectASE™ elimina los desajustes causados por los errores de síntesis de oligonucleótidos, lo que lleva a una reducciónMás información
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A14973200 reacciones
Número de catálogo A14973
Precio (MXN)
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La enzima CorrectASE™ elimina los desajustes causados por los errores de síntesis de oligonucleótidos, lo que lleva a una reducción de 3 a 10 veces en las mutaciones de sus genes o fragmentos sintéticos. Al introducir la enzima CorrectASE™ en su flujo de trabajo de síntesis de genes, usted puede:

• Reduzca el número de mutaciones de su gen o fragmento sintético
• Reduzca su tiempo de trabajo mediante la detección solo de 2 a 4 clones en lugar de 10 a 16 clones por construcción sintética
•Reduzca sus costes secuenciando solo de 2 a 4 clones en lugar de 10 a 16 genes sintéticos

Prevenga mutaciones no deseadas
Los oligonucleótidos sintéticos disponibles comercialmente tienen una alta tasa de error durante la síntesis, que varía de una por cada 300 a 1000 bases, dependiendo de la fuente. Estos errores causan desplazamiento de lectura (eliminación e inserción) y mutaciones de desajuste durante la síntesis génica. La incubación con la enzima CorrectASE™ elimina ambos tipos de mutaciones.

El paso de incubación con la enzima CorrectASE™ se introduce después del montaje inicial de PCR de oligonucleótidos. El producto de PCR se desnaturaliza y se vuelve a hibridizar para que cualquier mutación sea incomparable. La enzima CorrectASE™ se une a los desajustes resultantes y corta ambas hebras de ADN 3’ del error. La actividad exonucleasa 3’ a 5’ de la enzima elimina los errores. Una PCR final con una polimerasa de corrección ensambla los fragmentos corregidos, aumentando así la probabilidad de aislar los clones con la secuencia correcta. Dependiendo de la calidad del oligonucleótido entrante, solo se necesitan examinar de 2 a 4 clones, en comparación con los 10 a 16 clones necesarios en un flujo de trabajo que no incluye el paso de corrección. La inclusión de la enzima CorrectASE™ en su flujo de trabajo de síntesis de genes reduce el tiempo de trabajo y los costes de secuenciación.

Uso exclusivo en investigación. No diseñado para uso terapéutico o de diagnóstico en animales o humanos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tampón compatibleTampón de reacción
Actividad exonucleasa3'-5'
Tipo de productoEnzima CorrectASE™
Pureza>95 % por SDS-PAGE
Cantidad200 reacciones
EnzimaCorrectASE™
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• CorrectASE, 4 tubes (50 reactions each)
• 10X CorrectASE Reaction Buffer, 1 tube

Preguntas frecuentes

What does CorrectASE enzyme do?

The CorrectASE enzyme has the ability to remove mismatches caused by oligonucleotide synthesis errors and is typically used in a do-it-yourself gene synthesis workflow to aid in decreasing mutations in your synthetic genes/fragements.

I'm confused with the primer concentration to use for the Do It Yourself Gene Synthesis Kit. Can you please clarify?

The protocol states that oligonucleotide stocks should be prepared at a final concentration of 100 µM in 1X TE buffer. The next line indicates the addition of 5 µL of each 10 µM primer together. According to R&D, the manual was written this way because our R&D typically brings up the lyophilized oligos to a 100 µM stock concentration (due to the volume of the tube). You do, however, want to use a 0.15 µM pool. Therefore, you can either dilute the stock to 10 µM or dilute the primer pool 1:1

I am not getting a PCR product using your GeneArt Do-It-Yourself Gene Synthesis Kit. What should I do?

Overdigestion with CorrectASE enzyme can lead to degradation of the DNA template.

Ensure that the reaction does not go longer than 60 mins. Also, ensure that the reaction is kept on ice until the PCR step or else the reaction will be prone to overdigestion by the CorrectASE enzyme.

I don't think my sequence is accurate. What should I do?

Please send an email to geneartsupport@lifetech.com explaining what is wrong. We will also need the project ID and construct ID, which we will forward to our QC department for further investigation.

After GeneArt Gene Synthesis, I cannot cut out my gene of interest using Xba1. Why is this?

We have a variety of strains that are used in production, such as Top10 or DH5α. Routinely, we grow them in dam+ strains. Therefore, you may be seeing inhibition because Xba1 is sensitive to dam methylation