Kit Jump In™ T-REx™ CHO-K1
Kit Jump In™ T-REx™ CHO-K1
Thermo Scientific™

Kit Jump In™ T-REx™ CHO-K1

El kit Jump-In™ T-REx™ CHO-K1 permite la integración selectiva de material genético en un sitio específico de R4 prediseñado enMás información
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Número de catálogoCantidad
A150071 Kit
Número de catálogo A15007
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 Kit
El kit Jump-In™ T-REx™ CHO-K1 permite la integración selectiva de material genético en un sitio específico de R4 prediseñado en la línea celular Jump-In™ CHO-K1, para crear una línea celular estable isogénica con menos esfuerzo y en menos tiempo que los métodos tradicionales de ingeniería celular. Estas células expresan de manera estable la proteína represora de tetraciclina, permitiendo la expresión inducible de su gen reorientado de interés sobre la adición de doxiciclina.

La alta eficiencia de la reorientación, facilitada por los sitios R4 en la línea celular CHO-K1, permite el uso de la piscina isogénica para experimentos adicionales sin necesidad de selección clonal. De forma alternativa, la alta eficacia de la reorientación permite seleccionar fácilmente un clon estable positivo para expresar el gen de interés.

El kit Jump-In™ T-REx™ CHO-K1 le permite:

• Desarrollar de forma rápida y eficaz grupos celulares isogénicos diseñados de forma estable en aproximadamente la mitad del tiempo en comparación con los métodos tradicionales de ingeniería celular
• Expresar de forma inducible su gen de interés mediante la doxiciclina
• Utilizar la expresión isogénica de un locus genómico definido como la solución ideal para el análisis comparativo de familias de genes, isoformas u ortologos
• Generar varias líneas de células en paralelo utilizando el flujo de trabajo simplificado
• Acceder fácilmente a la tecnología sin licencias complicadas o restricciones para interpretar

Ahorrar tiempo con la generación rápida y eficiente de líneas de células manipuladas
Con el kit Jump-In™ T-REx™ CHO-K1 puede generar grupos celulares funcionales en tan solo dos semanas sin el laborioso aislamiento y análisis de clones, y el flujo de trabajo optimizado facilita la generación de varias líneas de células al mismo tiempo. Incluso la generación de líneas de células clonales se puede hacer con menos tiempo y esfuerzo debido al alto porcentaje de clones positivos. Además, la tecnología Jump-In™ le da la libertad de generar un número ilimitado de líneas celulares sin requisitos restrictivos de licencia.

Amplíe sus capacidades experimentales
El kit Jump-In™ T-Rex™ CHO-K1 permite la expresión inducible de su gen de interés tóxico o inestable y es la solución ideal para objetivos y ensayos en los que las tecnologías de ingeniería transitorias son problemáticas. El kit también proporciona una manera práctica de crear paneles diana de familias de genes, isoformas u ortólogos. Los genes que codifican para proteínas de gran tamaño o proteínas multiunidad no son un problema, ya que los vectores de destino Gateway™ aceptan inserciones grandes.

El kit incluye:

Células Jump-In™T-Rex™ CHO-K1 (2 viales a 1 ml cada uno)
Vector pJTI™ R4 Dest CMV TO pA (100 µg)-- Un vector Gateway™ que impulsa la expresión inducible de su gen de interés bajo el control del acelerador fuerte CMV mediante la inclusión del Tet-Operon. Vector
PJTI™ R4 Int (100 µg)-- Expresa la integrasa R4 para facilitar la repetición de su gen de interés en el sitio R4.

Se vende por separado:

Vector PJTI™ R4 CMV-TO MCS pA--Un vector de clonación multisitio que impulsa la expresión inducible de su gen de interés bajo control del acelerador fuerte CMV mediante la inclusión del Tet-Operon.
Vector PJTI™ R4 EXP CMV-TO EmGFP pA-- Vector de control con expresión inducible de GFP bajo control del acelerador fuerte del CMV mediante la inclusión del Tet-Operon.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Línea de célulasCHO-K1
Tipo de entregaTransfección
Sistema de expresiónMamífero
Para utilizar con (aplicación)Desarrollo de ensayos
Agente inductorTetraciclina
de control principalDesarrollo de línea celular estable, integración orientada y expresión regulada
Línea de productosJump-In
Tipo de productoKit CHO-K1
Cantidad1 Kit
Agente de selección (eucariótico)Geneticin™ (G-418), higromicina, blasticidina
FormatoKit
PromotorCMV/TO
VectorPJTI™ R4 DEST CMV A pA, pJTI™ R4 Int
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Células Jump-In™ T-REx™ CHO-K1 (2 viales a 1 ml cada uno) , almacenar en nitrógeno líquido
Vector pJTI™ R4 DEST CMV TO pA (100 µg), almacenar a -20 °C
Vector pJTI™ R4 Int (100 µg), almacenar a -20 °C

Preguntas frecuentes

Why is sequential transfection recommended over co-transfection in the T-REx and GeneSwitch systems?

When a co-transfection is performed, there is no way of testing the double stable cell line for functional TetR or GeneSwitch protein, respectively. On the other hand, when sequential transfection is performed, one can functionally test the generated T-REx or GeneSwitch cell line by transiently transfecting the lacZ expression control plasmid and then picking a clone that shows the lowest basal level of expression of lacZ in the absence of the inducer, and the highest level of lacZ in the presence of the inducer. This clone can then be expanded and used to transfect the T-REx or GeneSwitch expression construct, as the case may be.

What is the main advantage of the GeneSwitch system over the T-REx system? And what is its main disadvantage?

With the GeneSwitch system, it is possible to have the absolute lowest basal levels of expression of the gene of interest, whereas the T-REx system may be a little leaky due to the inevitable presence of tetracycline in FBS. The induced level of expression in the GeneSwitch system can be even higher than that seen with the CMV promoter. The disadvantage of the GeneSwitch system is that the expression does not appear to switch off very easily in culture, although it has been demonstrated to function beautifully in transgenics. The T-REx system, on the other hand, can be switched on and off by the addition and removal of the inducer.

What is the advantage of the Flp-In T-REx system over the T-REx system?

The Flp-In T-REx system combines the targeted integration offered by the Flp-In system with the powerful inducible expression offered by the T-REx system. It allows generation of isogenic, inducible, stable cell lines and permits polyclonal selection of these cell lines. Once the Flp-In T-REx host cell line containing an integrated FRT site has been created, subsequent generation of Flp-In T-REx cell lines expressing the gene(s) of interest is rapid and efficient.

Can I use doxycycline instead of tetracycline as an inducer in the T-REx system?

Doxycycline may be used as an alternative inducing agent in the T-REx system. It is similar to tetracycline in its mechanism of action, and exhibits similar dose-response and induction characteristics as tetracycline in the T-REx system. Doxycycline has been shown to have a longer half-life than tetracycline (48 hours vs. 24 hours, respectively). We do not offer doxycycline, but it may be obtained from Sigma (Cat. No. D9891).

I am interested in a mammalian expression system where I can have regulated expression of my gene of interest. I see that you offer multiple systems for this purpose. Can you describe the main features of each system?

We offer three unique mammalian expression systems for inducible/regulated expression of the gene of interest:

- T-REx system
- Flp-In T-REx system
- GeneSwitch system

Please see below to see how they compare with one another:
System -- Basal Expression Level -- Induced Expression Level -- Response time to Maximal Expression -- Transgenic Appliation
T-Rex system -- Low -- Highest -- High -- Suitable
Flp-In T-REx system -- Lower -- High -- 24-48 hrs -- Suitable
GeneSwitch system -- Lowest -- High -- 24-48 hrs -- Suitable