Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit

Al igual que otros miembros de la familia de productos Cells-to-CT™, el kit Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ permite realizar análisis de expresión directamente desde células cultivadas sin purificación de ARN.

Esta nueva incorporación a la familia incluye una mezcla maestra TaqMan™ RT-PCR de un paso. El formato de tubo único del paso RT-PCR optimiza “la muestra para responder” al flujo de trabajo más que nunca. La combinación de la sencilla tecnología de lisis Cells-to-CT™ con la capacidad de ciclo rápido de la mezcla maestra de RT-PCR de 1 paso permite obtener resultados más rápidamente con una manipulación limitada de las muestras.

El kit Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ es:
• Completo: el flujo de trabajo optimizado incluye reactivos de lisis celular con eliminación de ADNg y la mezcla maestra de RT-PCR TaqMan™ de un paso
• Más rápido que nunca: la preparación de muestras en 7 minutos, incluido el tratamiento con ADNasa, combinado con un paso de RT-PCR en tiempo real de 28 minutos, permite un flujo de trabajo de muestra a respuesta de ∼35 minutos
• Sencillo: 10 pasos en total (combinación de preparación de muestra y RT-PCR en tiempo real)
• Sólido: realice análisis de expresión génica de entre 10 y 100 000 células por muestra; los resultados son equivalentes a los que se obtienen con ARN purificado
• Práctico: contiene suficientes reactivos para realizar 5 RT-PCR en tiempo real para cada muestra celular que prepare; esto le permite estudiar múltiples objetivos o realizar réplicas de RT-PCR

Nota: Los conjuntos de cebadores/sondas TaqMan ™ se venden por separado.

Preparación simple de la muestra de 7 minutos, luego preparada para RT-PCR en tiempo real
Utilice placas o tubos, el kit Cell-to-CT™1-Step TaqMan™ utiliza un sencillo procedimiento de preparación de la muestra de 7 minutos. La tecnología de lisis está diseñada para 10–100.000 células cultivadas por muestra. Las células se lavan en PBS y se lisan en la solución durante 5 minutos a temperatura ambiente con un el tratamiento de ADNasa simultáneo. Para finalizar la lisis, las células se deben someter a un proceso de incubación de 2 minutos con solución de parada a temperatura ambiente. El lisado ya está listo para analizar en su instrumento de PCR en tiempo real. Simplemente añádalo a una mezcla maestra de RT-PCR en tiempo real que contenga los conjuntos de cebadores/sondas TaqMan™ que le interesen. Alternativamente, el lisado se puede almacenar a –20°C. Puesto que las muestras se pueden procesar directamente en pocillos de cultivo (96 o 384 pocillos), la manipulación de las muestras y la posibilidad de pérdida de las muestras o de error de transferencia se reducen al mínimo, lo que permite disfrutar de un procesamiento de alto rendimiento rápido. A diferencia de los antiguos protocolos de aislamiento de ARN compuestos por varios pasos, con este kit no es necesario llevar a cabo ningún paso de calentamiento, lavado o centrifugación. El kit simplifica enormemente un laborioso proceso de 30–60 minutos y lo reduce a 7 minutos.

Solución validada completa
Todos los componentes del kit Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ han sido optimizados para un rendimiento uniforme y fiable. Esto minimiza las conjeturas asociadas a la preparación de muestras separadas, la RT-PCR de un paso en tiempo real y las mezclas maestras. Para mayor garantía de calidad, el kit Cells-to-CT™ de un paso TaqMan™ se ha validado con ensayos de expresión génica TaqMan™ y muestra un rendimiento equivalente al obtenido con ARN purificado.

Producto accesorio
El kit de control Cells-to-CT™TaqMan™ fue diseñado para su uso con productos Cells-to-CT™ TaqMan™. Este kit contiene un control endógeno (ACTB) para normalizar la variabilidad de la carga de muestras y un control artificial XenoRNA™ y el correspondiente ensayo de expresión génica TaqMan™ para controlar los efectos de la inhibición de PCR.